研究背景殘毀性掌踦角皮癥（Vohwinkel syndrome,VS）是罕見的難治性遺傳性皮膚病,依據(jù)不同的突變基因和臨床表現(xiàn),分為典型和變異型二型,病因及發(fā)病機制至今不清。已有研究證實GJB2基因突變可致典型殘毀性掌跖角皮癥,但國內(nèi)外尚無相關(guān)功能學(xué)研究闡明其具體機制。隨著近年來基因表達譜技術(shù)研究的飛速發(fā)展,基因表達芯片在篩選發(fā)現(xiàn)疾病相關(guān)基因、探索疾病的發(fā)生與發(fā)展、尋求精準治療靶位點等方面,發(fā)揮著越來越重要的作用。為了更全面地了解殘毀性掌跖角皮癥中異�；虻谋磉_的差異情況,本課題將在前期研究的基礎(chǔ)上對該病已成功構(gòu)建的細胞模型進行差異基因的篩選,從而更精準地發(fā)現(xiàn)和分析差異表達基因在疾病發(fā)生中的具體功能。目的本研究構(gòu)建攜帶Tet-on系統(tǒng)調(diào)控的兩種殘毀性掌跖角皮癥GJB2突變型基因（G130V、D66H）慢病毒載體轉(zhuǎn)染永生化角質(zhì)形成細胞（HaCaT）的穩(wěn)定株。利用流式細胞儀檢測細胞凋亡,運用人基因表達譜技術(shù)（Afffymetrix表達譜）,研究GJB2基因突變體可能導(dǎo)致殘毀性掌跖角皮癥特殊臨床癥狀的機制。方法（1）通過利用PCR技術(shù)擴增人GJB2基因突變型（G130V、D66H）,克隆至以... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２?Ａ與Ｂ是感染慢病毒Ｇ１３０Ｖ的２９３Ｔ細胞中加與不加ＤＯＸ誘導(dǎo)后ＧＪＢ２?ｍＲＮＡ的表??４７??

?山東大學(xué)碩士學(xué)位論文???達水平檢測；Ｃ與Ｄ是感染慢病毒Ｄ６６Ｈ的２９３Ｔ細胞中加與不加ＤＯＸ誘導(dǎo)后ＧＪＢ２?ｍＲＮＡ??的表達水平檢測；穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的２９３Ｔ細胞加ＤＯＸ誘導(dǎo)后表達量增高。??１２０．０?????１００．０?－—?——－－?－－－??——?????＾?｜ＢＢ??１?卜—ｉ?二Ｉ?－??ｐ２０＇１＾?■?■??ｏ．ｏ???■■■＿＿？?■…．－－?????——???ＮＣ?ＯＥ１?ＯＥ２??圖３穩(wěn)定轉(zhuǎn)染慢病毒Ｇ１３０Ｖ?（ＯＥ１）和Ｄ６６Ｈ?（ＯＥ２）的ＨａＣａＴ細胞加ＤＯＸ誘導(dǎo)后表達量??增高。???ｘｌＯＱ?ｘ２００???Ｇ１３０Ｖ＾ｌ＾ｉ??＿?＿＿??圖４經(jīng)ＤＯＸ誘導(dǎo)４８ｈ后Ｔｅｔ－ｏｎ過表達慢病毒感染ＨａＣａＴ細胞細胞形態(tài)??４８??

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【參考文獻】：
期刊論文
[1]殘毀性掌跖角皮癥伴耳聾一例[J]. 佟盼琢,毛艷紅,霍文倩.  中國麻風(fēng)皮膚病雜志. 2016(04)



本文編號：3414257