研究背景及目的色素障礙性皮膚病是常見的疾病,其機制復雜,對于色素性疾病,臨床治療的手段也多樣化,藥物治療療效欠佳且不良反應多。激光治療色素的同時又易引發(fā)色素沉著。由于色素沉著的機制是皮膚美容的研究基礎,因此尋找安全有效的美白劑是目前的研究熱點。脂肪源性血管基質(zhì)片段（SVFs）是富含脂肪來源干細胞的復合細胞成分,被證實有促進組織的再生、愈合及血管化等的能力。小鼠黑色素瘤細胞B16容易獲取,生長迅速、方便培養(yǎng),反復經(jīng)過幾代培養(yǎng)后,仍有較高的黑色素產(chǎn)生能力,并且高度同源于人的表皮黑素細胞的基因。本研究將SVFs與B16細胞共培養(yǎng),觀察黑色素生成及酪氨酸酶活性。并進一步制備豚鼠皮膚色素沉著動物模型,局部注射SVFs,評判SVFs對皮膚色素沉著的治療效果。研究方法1、SVFs與B16共培養(yǎng):CCK8法檢測B16細胞的活性;NaOH法檢測黑色素的含量;Western Blot檢測酪氨酸酶表達。2、SVFs與3-異丁-1-甲基黃嘌呤（IBMX）處理的B16共培養(yǎng):采用免疫細胞化學方法檢測黑色素標志分子HMB-45;NaOH法測定黑色素含量;Western Blot檢測酪氨酸酶表達。3、多巴氧化法測定... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．黑色素的生物合成過程（摘自ＹａｎＺｈｏｕｅｔａｌ．Ｐｌｏｓｏｎｅ，２０１４）??膚的色由黑色細胞生黑的及量，影響、和??

我們使用ＣＣＫ８實驗分別檢測Ｂ１６細胞以及Ｂ１６與ＳＶＦｓ共培養(yǎng)（不同的??濃度及不同的時間）后細胞的活性。實驗結(jié)果顯示，ＳＶＦｓ與Ｂ１６共培養(yǎng)能夠降??低Ｂ１６細胞的活性，降低其增殖能力（圖２）。??１．５－１??＾?１．０－???＊??＞?本本氺??Ｓ?°－５￣?［＾］?＊＊＊??Ｉ??〇■〇?Ｊ＿?＿｜＿?＿＿｜￣￣｜￣?￣￣｜￣?￣Ｉ￣??，ｍ．??４８ｈ?９６ｈ??圖２．?ＣＣＫ８實驗檢測ＢＩ６細胞及Ｂ１６細胞１?ｊ?ＳＶＦｓ共培養(yǎng)不同的濃度及不同的時間）后的??細胞活性。??１．４．２黑色素含量??接下來，我們進一步使用ＮａＯＨ法檢測Ｂ１６細胞以及Ｂ１６與ＳＶＦｓ共培養(yǎng)??后細胞中黑色素的含量。結(jié)果顯示：ＳＶＦｓ與ＢＩ６共培養(yǎng)的細胞中，黑色素的含??１３??

??量與對照組沒有明顯的改變（圖３）。??ＳＶＦＳ＋Ｂ１６??８－??６－??丨?丨?丨??〇ｊ?４－??＂５５??Ｅ??２－；?丨?丨?丨；??〇Ｊ??｜???｜?????＃?，?，??圖３．?ＮａＯＨ法檢測Ｂ１６細胞以及Ｂ１６與ＳＶＦｓ共培養(yǎng)后細胞中黑色素的含量。??１．４．３酪氨酸酶表達情況??進一步我們運用ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測Ｂ１６細胞以及Ｂ１６與ＳＶＦｓ共培養(yǎng)后細胞??中ｔｙｒｏｓｉｎａｓｅ的表達。結(jié)果顯不：與ＳＶＦｓ共培養(yǎng)的Ｂ１６細胞，ｔｙｒｏｓｉｎａｓｅ的表達??無明顯變化（圖４）。??１４??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]酶消化法與機械法處理抽吸脂肪獲得的基質(zhì)血管細胞群組成成分對比[J]. Alexandra Conde-Green,Ricardo L.Rodriguez,Sheri Slezak,Devinder P.Singh,Nelson H.Goldberg,John McLenithan,朱利娜,高景恒,張晨,袁繼龍.  中國美容整形外科雜志. 2015 (08)
[2]基質(zhì)血管成分與體外擴增的脂肪來源干細胞促進移植脂肪成活的對比研究[J]. 趙建輝,易成剛,邱璇,李龍,梁麗華,夏煒,蘇映軍,郭樹忠.  中國美容醫(yī)學. 2013(01)
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本文編號：3400700