目的:犬小孢子菌病是由親動(dòng)物性真菌-犬小孢子菌感染人類所致的頭皮、頭發(fā)、光滑皮膚及甲的傳染性皮膚病。隨著生活水平不斷提高人們的生活習(xí)慣隨之改變,貓狗等寵物與人類的密切接觸導(dǎo)致犬小孢子菌病的發(fā)病率逐年增加,特別是犬小孢子菌所致膿癬的病例數(shù)急劇增加。有關(guān)該病的發(fā)病機(jī)制,近年多數(shù)學(xué)者明確提出蛋白酶在皮膚癬菌病中具有一定致病作用,然而蛋白酶與膿癬的相關(guān)性及在膿癬中發(fā)病機(jī)制的研究尚無報(bào)道。由于膿癬幾乎發(fā)生于學(xué)齡前兒童頭皮處,特殊的發(fā)病年齡與部位,提醒了本研究的設(shè)想,即兒童頭皮組織在犬小孢子菌所致膿癬的發(fā)病中存在了某種特殊的致病因子,該因子是否就是文獻(xiàn)所報(bào)道具有致病作用的蛋白酶尚不清楚。因而,本研究設(shè)想以兒童頭皮組織誘導(dǎo)底物為tester,兒童光滑皮膚組織誘導(dǎo)底物為driver1,成人頭皮組織為誘導(dǎo)底物driver2,應(yīng)用抑制消減雜交技術(shù)（SSH）分別比較犬小孢子菌在tester與driver1,tester與driver2培養(yǎng)中表達(dá)的差異基因,再與genebank比對(duì),明確該些差異基因的功能,從而探討犬小孢子菌在膿癬中的發(fā)病機(jī)制,也為將來犬小孢子菌所致膿癬的防治及新藥作用靶位的開發(fā)研究做出一些探... 

【文章來源】：大連醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

抑制消減雜交流程圖

犬小孢子菌米飯培養(yǎng)基中大分生孢子棉蘭染色10×40

呈乳白色膜樣結(jié)構(gòu)，底部菌絲團(tuán)呈絮狀。在不含皮膚組織的陰性培養(yǎng)基上生長(zhǎng)不良，無液氣面的膜樣結(jié)構(gòu)，但底部見微量的菌絲團(tuán)（見圖 3）。圖3 蛋白酶誘導(dǎo)培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果1左為無皮膚組織的培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果；1右為 driver2誘導(dǎo)培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果；2為 driver1誘導(dǎo)培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果；3為 tester誘導(dǎo)培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果。3．犬小孢子菌總 RNA提取用1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)所提取的總RNA（見圖4），分別為28S，18S， 5S三條帶，其中 28S與 18S條帶的亮度比值為 2:1， 5S的亮度較弱，表明所提取的總RNA質(zhì)量完整，降解極少。用紫外分光光度計(jì)檢測(cè)顯示總RNAOD260/ OD2 80>1.9,表明所提取的總 RNA純度較高


本文編號(hào)：3333221