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XPA蛋白在修復(fù)UVB損傷中的作用以及EGCG干預(yù)機(jī)制的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-07-20 16:48
  研究背景:目光中的紫外線(UV),主要為長(zhǎng)波紫外線(UVA)和中波紫外線(UVB),是導(dǎo)致皮膚日曬傷、光老化及皮膚癌的重要因素。在相同劑量下,UVB的光損傷作用比UVA約大800—1000倍。UVB輻射可導(dǎo)致自由基及活性氧的形成,引起細(xì)胞因子產(chǎn)生與分泌,局部及系統(tǒng)免疫抑制,細(xì)胞DNA損傷及突變頻率增加,甚至導(dǎo)致皮膚光老化及皮膚癌腫的發(fā)生。皮膚是抵抗紫外線作用的第一道防線,表皮中的角質(zhì)形成細(xì)胞是中波紫外線(UVB)照射的重要靶位。UVB輻射可引起表皮細(xì)胞DNA損傷,產(chǎn)生光產(chǎn)物,主要為6-4光產(chǎn)物((6-4)PPs)和環(huán)丁烷嘧啶二聚體(CPDs),這類光產(chǎn)物主要通過(guò)核苷酸切除修復(fù)(NER)進(jìn)行切除修復(fù)。NER包括:①損傷識(shí)別;②損傷部位DNA雙鏈的解螺旋;③損傷部位的雙切除;④包含損傷的DNA延伸鏈的移除;⑤DNA的再合成和連接。XPA、ERCC1、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)、復(fù)制蛋白A(RPA)、p53等30多種基因產(chǎn)物參與NER過(guò)程。XPA蛋白特異性識(shí)別紫外線誘導(dǎo)的損傷DNA,啟動(dòng)NER。XPA與RPA或者ERCC1結(jié)合。ERCC1多肽對(duì)于損傷DNA的NER修復(fù)是必需的。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞... 

【文章來(lái)源】:南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】:114 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

XPA蛋白在修復(fù)UVB損傷中的作用以及EGCG干預(yù)機(jī)制的研究


不同濃度EGCG干預(yù)處理對(duì)UVB輻射后HaCaT細(xì)胞活性的影響

照光,組圖


原代KC進(jìn)行細(xì)胞爬片,然后分組進(jìn)行UVB輻射,再進(jìn)行免疫組化實(shí)驗(yàn)。與照光組相比,非照光組和陰性對(duì)照組(以PBS代替一抗作為陰性對(duì)照)均未見(jiàn)到陽(yáng)性細(xì)胞,如圖1一1到圖1一3所示。從這些圖片中可以看出,UVB輻射可以損傷細(xì)胞,表現(xiàn)為DNA損傷,產(chǎn)生光產(chǎn)物,即表現(xiàn)為圖中具有棕揭色細(xì)胞核的陽(yáng)性細(xì)胞。。,.,.1·0。..一1.戶.夕.’.,.尹戶.湯匆?jiàn)^冷令、一‘.:..r

產(chǎn)物,情況,損傷作用,細(xì)胞損傷


八nU八︺n︶0︸I)︵ 0on甘侍匕八月q乙nR八 bA工Q乙︵令界裂00囚\令︶繃坦纂界、里UVB輻射后時(shí)間(h)圖2一 7UvB輻射后光產(chǎn)物產(chǎn)生和清除情況{白葉陽(yáng)性細(xì)胞夔i王il…|…口。nOU八l)fl﹄I)︺nU八11︵U沈月9自nR︺︵連匕且q山︵令契界00閃\令︶繃坦裂界、里UVB輻射后時(shí)間(h)圖2一 8uvB輻射后光產(chǎn)物產(chǎn)生和清除情況 3UVB照射劑量對(duì)細(xì)胞損傷的影響原代Kc進(jìn)行細(xì)胞爬片,然后接受不同劑量(30、60、 90mJ幾mZ)UVB照射,4h后進(jìn)行免疫組化實(shí)驗(yàn)。從圖3一1到圖3一3可以看出, 30mJ/cmZUVB照射后細(xì)胞變化較輕,顯微鏡下的陽(yáng)性細(xì)胞最少,60mjlc時(shí)uvB對(duì)細(xì)胞的損傷作用增大,陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)增多 ;90mJ/cmZ

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]應(yīng)用MTT法檢測(cè)腫瘤化療藥物的敏感性[J]. 徐靜,吳鋒,梅銘惠.  華夏醫(yī)學(xué). 2005(01)
[2]羥氯喹及中藥對(duì)紫外線損傷角質(zhì)形成細(xì)胞保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究(英文)[J]. 駱丹,閔瑋,林向飛,吳迪,繆旭.  Journal of Nanjing Medical University. 2004(04)



本文編號(hào):3293206

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