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微針聯(lián)合脂肪干細(xì)胞來源胞外囊泡延緩小鼠皮膚光老化的作用及機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2021-07-14 02:45
  背景皮膚光老化是長期紫外線(ultraviolet,UV)暴露引起的外源性皮膚衰老。UV可刺激皮膚細(xì)胞產(chǎn)生大量氧化應(yīng)激反應(yīng)、直接及間接誘導(dǎo)DNA突變并改變基因表達(dá)模式,引起皮膚組織結(jié)構(gòu)及組織微環(huán)境的改變,以及屏障功能、免疫監(jiān)視等生理功能的下降。近年來,間充質(zhì)干細(xì)胞及其胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)相關(guān)療法在皮膚衰老及損傷修復(fù)領(lǐng)域受到廣泛關(guān)注。EVs是由多種細(xì)胞分泌的微小囊泡,作為重要的細(xì)胞間信號(hào)傳遞工具,可調(diào)控受體細(xì)胞的生理活動(dòng)。雖然既往研究表明,間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)上清可改善光老化小鼠模型的臨床表現(xiàn),但培養(yǎng)上清中的具體有效成分尚不明確;另外體外研究表明,人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(adipocyte-derived stem cells,ADSCs)來源的EVs可有效改善UV誘導(dǎo)的人成纖維細(xì)胞及角質(zhì)形成細(xì)胞損傷,但EVs在體作用尚未見報(bào)道。本研究提取人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的胞外囊泡,外用EVs聯(lián)合微針,研究其對UV誘導(dǎo)的SKH-1無毛小鼠光老化的延緩、修復(fù)作用及機(jī)制。目的研究微針聯(lián)合脂肪干細(xì)胞來源的胞外囊泡(EVs)對紫外線(UV)誘導(dǎo)的SKH-1無毛小鼠皮膚光老... 

【文章來源】:揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:47 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

微針聯(lián)合脂肪干細(xì)胞來源胞外囊泡延緩小鼠皮膚光老化的作用及機(jī)制研究


圖1小鼠光老化建模過程??

細(xì)胞,真皮,表皮,膠原


?第一章SKH-1無毛小鼠光老化模型的建立及ADSCs-EVs的提取???排列整齊;真皮層結(jié)構(gòu)致密,膠原纖維分布均勻,排列整齊緊密;表皮真皮及皮下組??織層次清晰。??照光6輪后:表皮明顯增厚,部分增生不規(guī)則,細(xì)胞層數(shù)增多且大小不均,表皮??突平坦;真皮厚度下降,膠原纖維疏松紊亂。??建橫前?照光6輪后??::??>?一?-.?-;??二?一?,?d:.??圖2小鼠建模前后H&E染色(X?200)??三、ADSCs的形態(tài)學(xué)特征??采用經(jīng)典的酶消化法分離的ADSCs,原代細(xì)胞通常在48h內(nèi)貼壁,72h后換液??去除未貼壁細(xì)胞。細(xì)胞最初為小圓形,3天左右逐漸伸展幵,鏡K觀察為短梭形或小??多角形。細(xì)胞為單核,核仁清晰。約一周后,細(xì)胞大量增殖。將傳代至第三代的ADSCs??倒置顯微鏡下觀察,生長形態(tài)如圖,"丨見細(xì)胞呈梭形、不規(guī)則三角形或多角形,細(xì)胞??形態(tài)似成纖維細(xì)胞,且呈束狀或漩渦狀生長(圖3)。傳代后,增值速度加快,通常5??天左右達(dá)到80%融合度,但形態(tài)無明顯變化。??Hi??圖3第三代ADSCs(400X?)??13??

建模,細(xì)胞,真皮,表皮


?第一章SKH-1無毛小鼠光老化模型的建立及ADSCs-EVs的提取???排列整齊;真皮層結(jié)構(gòu)致密,膠原纖維分布均勻,排列整齊緊密;表皮真皮及皮下組??織層次清晰。??照光6輪后:表皮明顯增厚,部分增生不規(guī)則,細(xì)胞層數(shù)增多且大小不均,表皮??突平坦;真皮厚度下降,膠原纖維疏松紊亂。??建橫前?照光6輪后??::??>?一?-.?-;??二?一?,?d:.??圖2小鼠建模前后H&E染色(X?200)??三、ADSCs的形態(tài)學(xué)特征??采用經(jīng)典的酶消化法分離的ADSCs,原代細(xì)胞通常在48h內(nèi)貼壁,72h后換液??去除未貼壁細(xì)胞。細(xì)胞最初為小圓形,3天左右逐漸伸展幵,鏡K觀察為短梭形或小??多角形。細(xì)胞為單核,核仁清晰。約一周后,細(xì)胞大量增殖。將傳代至第三代的ADSCs??倒置顯微鏡下觀察,生長形態(tài)如圖,"丨見細(xì)胞呈梭形、不規(guī)則三角形或多角形,細(xì)胞??形態(tài)似成纖維細(xì)胞,且呈束狀或漩渦狀生長(圖3)。傳代后,增值速度加快,通常5??天左右達(dá)到80%融合度,但形態(tài)無明顯變化。??Hi??圖3第三代ADSCs(400X?)??13??


本文編號(hào):3283248

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