目的:沉默調(diào)節(jié)蛋白（Sirtuin,Sirt）是一類具有多種代謝調(diào)節(jié)酶活性的蛋白質(zhì)家族,Sirtuin家族成員共有7個成員（Sirt 1-7）,其成員中Sirt 4蛋白和Sirt 5蛋白具有多種酶的活性。近年來研究發(fā)現(xiàn),Sirt 4和Sirt 5廣泛參與到細胞生存、衰老和代謝等生物學(xué)過程中,在生物體應(yīng)激反應(yīng)、炎癥反應(yīng)、腫瘤發(fā)生和能量代謝等眾多生物學(xué)過程中扮演著重要角色,并在癌癥、糖尿病、肥胖、帕金森和阿爾茲海默病等疾病的臨床治療方面具有一定潛力。黑色素細胞瘤是臨床上比較常見的皮膚腫瘤,目前尚沒有關(guān)于Sirt 4和Sirt 5在黑色素瘤細胞中表達情況的研究,Sirt 4和Sirt 5調(diào)控惡性黑色素腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)移機制尚不明確,針對該疾病的治療還需要更多的探索。本文擬研究Sirt 4和Sirt 5在黑色素瘤中的表達及其功能。研究方法:在黑色素瘤（n=82）和痣（n=18）的組織芯片上,應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色技術(shù)檢測Sirt 4和Sirt 5在其中的表達情況。收集這些患者臨床及病理資料,通過統(tǒng)計學(xué)分析手段探索臨床信息、Sirt 4和Sirt 5的表達情況與黑色素瘤惡性程度的相關(guān)性。在3... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

Sirt4和Sirt5在惡性黑色素瘤和痣中的表達

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文22圖2 實時熒光定量PCR檢測Sirt 4和Sirt 5 mRNA的表達水平3.3 Western Blot技術(shù)檢測Sirt 4和Sirt 5在正常黑色素細胞和黑色素瘤細胞中蛋白質(zhì)水平的表達為了進一步驗證 Sirt 4 和 Sirt 5 蛋白在黑色素瘤細胞系的表達情況，本研究對惡性黑色素瘤細胞系 HTB140、C8161、A2058、2813、A375、435S 和正常黑色素細胞系 PIG-1 的 Sirt 4 和 Sirt 5 蛋白表達水平進行 Western Blot 檢測。實驗結(jié)果顯示，Sirt 4 和 Sirt 5 蛋白在 7 個細胞系中都存在表達（圖 3）。為進一步探究相關(guān)蛋白的功能，本研究根據(jù)蛋白質(zhì)表達情況選擇惡性黑色素瘤細胞系 A375、C8161、A2058 和正常黑素細胞系 PIG-1 進行后續(xù)實驗。圖3 Sirt 4和Sirt 5蛋白在細胞系中的表達（A）Western Blot技術(shù)檢測Sirt 4在惡性黑色素瘤細胞系和黑色素細胞系中的表達。（B）Sirt 4蛋白在細胞系中的相對表達量。（C）Western Blot技術(shù)檢測Sirt 5在惡性黑色素瘤細胞系和黑色素細

圖2 實時熒光定量PCR檢測Sirt 4和Sirt 5 mRNA的表達水平3.3 Western Blot技術(shù)檢測Sirt 4和Sirt 5在正常黑色素細胞和黑色素瘤細胞中蛋白質(zhì)水平的表達為了進一步驗證 Sirt 4 和 Sirt 5 蛋白在黑色素瘤細胞系的表達情況，本研究對惡性黑色素瘤細胞系 HTB140、C8161、A2058、2813、A375、435S 和正常黑色素細胞系 PIG-1 的 Sirt 4 和 Sirt 5 蛋白表達水平進行 Western Blot 檢測。實驗結(jié)果顯示，Sirt 4 和 Sirt 5 蛋白在 7 個細胞系中都存在表達（圖 3）。為進一步探究相關(guān)蛋白的功能，本研究根據(jù)蛋白質(zhì)表達情況選擇惡性黑色素瘤細胞系 A375、C8161、A2058 和正常黑素細胞系 PIG-1 進行后續(xù)實驗。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Sirtuin 5:a review of structure,known inhibitors and clues for developing new inhibitors[J]. Lingling Yang,Xiaobo Ma,Yanying He,Chen Yuan,Quanlong Chen,Guobo Li,Xianggui Chen.  Science China（Life Sciences）. 2017(03)



本文編號：3252172