本文關(guān)鍵詞：基于Caspase-3、Bcl-2、Bax的阿魏酸對表皮黑素細胞抗氧化保護效應(yīng)及凋亡的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的本課題擬以自由基調(diào)控黑素生成這一熱點作為切入點,通過體外實驗,將阿魏酸對黑素細胞的調(diào)控作為整體進行研究,在細胞水平,進一步研究阿魏酸對正常人表皮黑素細胞抗氧化效應(yīng)及凋亡的影響,闡明和揭示阿魏酸治療色素障礙性皮膚病的部分作用機制,為中藥治療色素障礙性皮膚病提供可靠的實驗數(shù)據(jù)及新的思路。方法1.正常人表皮黑素細胞的傳代培養(yǎng)及鑒定將引進的黑素細胞株進行傳代培養(yǎng),用L-DOPA染色法鑒定所培養(yǎng)細胞為正常人表皮黑素細胞。2.不同濃度阿魏酸處理后正常人表皮黑素細胞內(nèi)ROS、SOD、MDA水平的檢測采用免疫熒光術(shù)檢測不同濃度阿魏酸處理后正常人黑素細胞內(nèi)ROS水平,采用WST-1法測定阿魏酸處理后正常人表皮黑素細胞內(nèi)SOD水平和TBA法測定MDA水平。3.不同濃度阿魏酸處理后正常人表皮黑素細胞內(nèi)caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表達水平的測定采用Western blot蛋白質(zhì)印跡法測定不同濃度阿魏酸溶液對正常人表皮黑素細胞內(nèi)caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白的表達水平。4.采用SPSS17.0統(tǒng)計分析,所有數(shù)據(jù)采用()表示,運用One-Way ANOVA法進行組間分析,方差齊時運用SNK法進行兩兩比較,當P0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果1.正常人表皮黑素細胞經(jīng)L-DOPA染色后,呈陽性反應(yīng),各細胞樹突及胞漿呈現(xiàn)棕褐色或黑色。2.對照組含有藍綠色熒光的細胞數(shù)最多,實驗組內(nèi)含有藍綠色熒光的細胞量隨阿魏酸濃度的升高而逐漸減少,反映黑素細胞內(nèi)ROS水平隨著阿魏酸濃度的升高而逐漸降低。3.實驗組與對照組相對比,黑素細胞內(nèi)的SOD活性升高(P0.05);MDA含量下降(P0.05)。4.caspase-3蛋白表達水平對照組與其他各組比較,正常人表皮黑素細胞內(nèi)caspase-3蛋白表達水平較高(P0.05);隨著阿魏酸溶液濃度的遞增,caspase-3蛋白的表達水平逐漸下降,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。5.Bcl-2蛋白表達水平對照組與其他各組比較,正常人表皮黑素細胞內(nèi)Bcl-2蛋白表達水平較低(P0.05);隨著阿魏酸濃度的增加,Bcl-2蛋白表達水平逐漸上升,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。6.Bax蛋白表達水平對照組與其他各組比較,正常人表皮黑素細胞內(nèi)Bax蛋白表達水平較高(P0.05);隨著阿魏酸溶液濃度的遞增,Bax蛋白的表達水平逐漸下降,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1.不同濃度阿魏酸可以不同程度地降低正常人表皮黑素細胞內(nèi)ROS水平。2.阿魏酸可能是通過升高SOD活性來降低正常人表皮黑素細胞內(nèi)ROS水平,同時減少MDA的生成。3.阿魏酸可以抑制正常人表皮黑素細胞凋亡,可能是通過上調(diào)正常人表皮黑素細胞內(nèi)Bcl-2蛋白表達水平,同時下調(diào)caspase-3及Bax蛋白表達水平來進行調(diào)控。4.阿魏酸可減少正常人表皮黑素細胞內(nèi)ROS含量,并且抑制正常人表皮黑素細胞凋亡,提示阿魏酸抗黑素細胞凋亡的作用機制可能與其抗氧化效應(yīng)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：阿魏酸 黑素細胞 抗氧化 凋亡
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R758.54
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-8
• 前言8-12
• 1 色素障礙性皮膚病的研究現(xiàn)狀8
• 2 色素障礙性皮膚病與自由基損傷8-9
• 3 自由基損傷與細胞凋亡9-10
• 4 細胞凋亡蛋白Caspase- 3、Bcl-2、Bax10
• 5 阿魏酸與色素障礙性皮膚病10-11
• 6 本課題研究的目的和意義11-12
• 第一部分 黑素細胞的培養(yǎng)及鑒定以及阿魏酸溶液的配置12-18
• 1 實驗?zāi)康?/span>12
• 2 實驗材料12-14
• 3 實驗方法14-16
• 4 實驗結(jié)果16-17
• 5 實驗討論17-18
• 第二部分 不同濃度阿魏酸溶液對正常人表皮黑素細胞ROS、SOD、MDA水平的影響18-27
• 1 實驗?zāi)康?/span>18
• 2 實驗材料18-19
• 3 實驗方法19-21
• 4 實驗結(jié)果21-24
• 5 實驗討論24-27
• 第三部分 不同濃度阿魏酸溶液對黑素細胞凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax表達水平的影響27-35
• 1 實驗?zāi)康?/span>27
• 2 實驗材料27-28
• 3 實驗方法28-30
• 4 實驗結(jié)果30-32
• 5 實驗討論32-35
• 全文小結(jié)35-36
• 參考文獻36-39
• 附錄39-42
• （一）中英文對照表39-40
• （二） 附圖40-42
• 在讀期間發(fā)表論文及參研課題42-43
• 致謝43

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本文編號：322125