本文關鍵詞：基于Caspase-3、Bcl-2、Bax的阿魏酸對表皮黑素細胞抗氧化保護效應及凋亡的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的本課題擬以自由基調控黑素生成這一熱點作為切入點,通過體外實驗,將阿魏酸對黑素細胞的調控作為整體進行研究,在細胞水平,進一步研究阿魏酸對正常人表皮黑素細胞抗氧化效應及凋亡的影響,闡明和揭示阿魏酸治療色素障礙性皮膚病的部分作用機制,為中藥治療色素障礙性皮膚病提供可靠的實驗數據及新的思路。方法1.正常人表皮黑素細胞的傳代培養(yǎng)及鑒定將引進的黑素細胞株進行傳代培養(yǎng),用L-DOPA染色法鑒定所培養(yǎng)細胞為正常人表皮黑素細胞。2.不同濃度阿魏酸處理后正常人表皮黑素細胞內ROS、SOD、MDA水平的檢測采用免疫熒光術檢測不同濃度阿魏酸處理后正常人黑素細胞內ROS水平,采用WST-1法測定阿魏酸處理后正常人表皮黑素細胞內SOD水平和TBA法測定MDA水平。3.不同濃度阿魏酸處理后正常人表皮黑素細胞內caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表達水平的測定采用Western blot蛋白質印跡法測定不同濃度阿魏酸溶液對正常人表皮黑素細胞內caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白的表達水平。4.采用SPSS17.0統(tǒng)計分析,所有數據采用()表示,運用One-Way ANOVA法進行組間分析,方差齊時運用SNK法進行兩兩比較,當P0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。結果1.正常人表皮黑素細胞經L-DOPA染色后,呈陽性反應,各細胞樹突及胞漿呈現棕褐色或黑色。2.對照組含有藍綠色熒光的細胞數最多,實驗組內含有藍綠色熒光的細胞量隨阿魏酸濃度的升高而逐漸減少,反映黑素細胞內ROS水平隨著阿魏酸濃度的升高而逐漸降低。3.實驗組與對照組相對比,黑素細胞內的SOD活性升高(P0.05);MDA含量下降(P0.05)。4.caspase-3蛋白表達水平對照組與其他各組比較,正常人表皮黑素細胞內caspase-3蛋白表達水平較高(P0.05);隨著阿魏酸溶液濃度的遞增,caspase-3蛋白的表達水平逐漸下降,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。5.Bcl-2蛋白表達水平對照組與其他各組比較,正常人表皮黑素細胞內Bcl-2蛋白表達水平較低(P0.05);隨著阿魏酸濃度的增加,Bcl-2蛋白表達水平逐漸上升,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。6.Bax蛋白表達水平對照組與其他各組比較,正常人表皮黑素細胞內Bax蛋白表達水平較高(P0.05);隨著阿魏酸溶液濃度的遞增,Bax蛋白的表達水平逐漸下降,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論1.不同濃度阿魏酸可以不同程度地降低正常人表皮黑素細胞內ROS水平。2.阿魏酸可能是通過升高SOD活性來降低正常人表皮黑素細胞內ROS水平,同時減少MDA的生成。3.阿魏酸可以抑制正常人表皮黑素細胞凋亡,可能是通過上調正常人表皮黑素細胞內Bcl-2蛋白表達水平,同時下調caspase-3及Bax蛋白表達水平來進行調控。4.阿魏酸可減少正常人表皮黑素細胞內ROS含量,并且抑制正常人表皮黑素細胞凋亡,提示阿魏酸抗黑素細胞凋亡的作用機制可能與其抗氧化效應有關。
【關鍵詞】：阿魏酸 黑素細胞 抗氧化 凋亡
【學位授予單位】：暨南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R758.54
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-8
• 前言8-12
• 1 色素障礙性皮膚病的研究現狀8
• 2 色素障礙性皮膚病與自由基損傷8-9
• 3 自由基損傷與細胞凋亡9-10
• 4 細胞凋亡蛋白Caspase- 3、Bcl-2、Bax10
• 5 阿魏酸與色素障礙性皮膚病10-11
• 6 本課題研究的目的和意義11-12
• 第一部分 黑素細胞的培養(yǎng)及鑒定以及阿魏酸溶液的配置12-18
• 1 實驗目的12
• 2 實驗材料12-14
• 3 實驗方法14-16
• 4 實驗結果16-17
• 5 實驗討論17-18
• 第二部分 不同濃度阿魏酸溶液對正常人表皮黑素細胞ROS、SOD、MDA水平的影響18-27
• 1 實驗目的18
• 2 實驗材料18-19
• 3 實驗方法19-21
• 4 實驗結果21-24
• 5 實驗討論24-27
• 第三部分 不同濃度阿魏酸溶液對黑素細胞凋亡相關蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax表達水平的影響27-35
• 1 實驗目的27
• 2 實驗材料27-28
• 3 實驗方法28-30
• 4 實驗結果30-32
• 5 實驗討論32-35
• 全文小結35-36
• 參考文獻36-39
• 附錄39-42
• （一）中英文對照表39-40
• （二） 附圖40-42
• 在讀期間發(fā)表論文及參研課題42-43
• 致謝43

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