本文關(guān)鍵詞：Tiam1及Nm23-h1在惡性黑色素瘤中的表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景及目的惡性黑色素瘤簡(jiǎn)稱惡黑(Malignant Melanoma,MM),是一種高度惡性腫瘤。其主要起源于黑色素細(xì)胞,多見于皮膚及粘膜。皮膚惡性黑色素瘤(Cutaneous Malignant Melanoma,CMM)與其他體表腫瘤相比,侵襲及轉(zhuǎn)移最具特征性,也是影響患者預(yù)后最重要的原因。CMM侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制異常復(fù)雜,是由多種致病因素、多個(gè)發(fā)病步驟及階段共同作用的結(jié)果。Liotta提出的惡性腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的三步假說即粘附、降解、移動(dòng)。包括原發(fā)灶處腫瘤細(xì)胞的脫落,通過各種作用機(jī)制進(jìn)入血運(yùn)及淋巴管中播散,隨后在其他器官組織處粘附,之后通過分泌相關(guān)因子加速新生血管生成并增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)的對(duì)抗作用,最終形成新的惡性腫瘤病灶。目前各項(xiàng)有關(guān)研究表明其中尤為重要的因素是其相關(guān)癌基因的激活及其抑癌基因表達(dá)降低或消失,引起癌細(xì)胞增殖及侵襲能力增強(qiáng)而致病。因此針對(duì)惡黑的各種癌基因及抑癌基因作為靶點(diǎn)的基因治療逐漸成為一個(gè)有效治療方法。T淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)因子1(T lymphoma invasion and metastasis inducing factor 1,Tiam1)編碼的Tiam 1蛋白是一系列Roh樣GTPase的鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子(guanine nucleotide exchange factor,GEF)。Tiam1主要能參與GDP與GTP的轉(zhuǎn)化過程中,從而進(jìn)一步影響微管蛋白的聚合和解聚;另外進(jìn)一步激活Rac 1(Ras相關(guān)的C3肉毒素底物1),參與JNK激酶(c-jun N-terminal kinase)、p38 MAPK激酶(mitogen activated protein kinase)等下游信號(hào)分子轉(zhuǎn)導(dǎo)。通過上述作用機(jī)制對(duì)機(jī)體的細(xì)胞骨架進(jìn)行調(diào)節(jié),參與細(xì)胞的形變及偽足的形成,增強(qiáng)細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)、遷移能力。同時(shí)對(duì)微管蛋白進(jìn)行調(diào)控并與其他基因協(xié)同作用共同影響細(xì)胞的增殖與凋亡。在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲及轉(zhuǎn)移過程中起到重要作用。轉(zhuǎn)移抑制因子23(non-metastasis 23 homologue 1,Nm23-h1)基因是近來研究較多的一個(gè)基因。Nm23-h1的生物活性主要通過其編碼蛋白產(chǎn)物核苷二磷酸激酶(NDPK)來實(shí)現(xiàn)。NDPK一方面直接參與微管蛋白的聚合與解聚從而調(diào)節(jié)細(xì)胞有絲分裂及細(xì)胞運(yùn)動(dòng);另一方面NDPK通過多種方式參與G蛋白的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,介導(dǎo)細(xì)胞的增殖與形態(tài)變化;另外其與Rho家族成員廣泛藕聯(lián),通過對(duì)下游基因的表達(dá)調(diào)控來影響腫瘤細(xì)胞的增殖及浸潤(rùn)。本實(shí)驗(yàn)通過RT-PCR法了解Tiam1及Nm23-h1在A375細(xì)胞和正常皮膚組織細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄水平差異,利用免疫組化方法檢測(cè)Tiam1及Nm23-h1蛋白在皮膚惡性黑色素瘤、皮膚交界痣和正常皮膚組織中的表達(dá)。初步探究其與惡性黑色素瘤侵襲轉(zhuǎn)移能力的相關(guān)性,并進(jìn)一步了解Tiam1與Nm23-h1之間的相關(guān)作用。此次研究在于揭示Tiam1及Nm23-h1在惡性黑色素瘤發(fā)生、發(fā)展過程中的變化規(guī)律,為臨床基因靶向治療惡黑提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。材料與方法采用RT-PCR法檢測(cè)Tiam1及Nm23-h1m RNA在A375細(xì)胞及正常皮膚組織細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄水平差異。運(yùn)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析,運(yùn)用t檢驗(yàn)法,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的α=0.05,P0.05。收集2010~2014年期間鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科存檔的皮膚惡性黑色素瘤蠟塊66例,交界痣30例。年齡22~76歲不等,平均年齡58.8±9.2歲;男性36例,女性30例;對(duì)照組所采用的正常皮膚組織20例來自于鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院整形外科手術(shù)切除的多余正常全厚皮膚組織。以上所有實(shí)驗(yàn)對(duì)象具有完整的病史資料,無相關(guān)疾病病史,也未行相關(guān)如冷凍、化學(xué)藥物、激光及放射等治療。各組患者性別、年齡及病變部位等差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。66例CMM、30例皮膚交界痣和20例正常皮膚組織中Tiam1及Nm23-h1蛋白的表達(dá)水平采用免疫組化法進(jìn)行檢測(cè)。采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,運(yùn)用卡方檢驗(yàn)和pearson法相關(guān)性分析,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的α=0.05,P0.05。結(jié)果1.人正常皮膚組織及人惡性黑色素瘤A375細(xì)胞中Tiam1 m RNA相對(duì)表達(dá)量分別為1.001±0.074、2.546±0.357,正常皮膚組織及A375細(xì)胞中Nm23-h1m RNA相對(duì)表達(dá)量分別為0.999±0.034、0.953±0.022。Tiam1 m RNA在人惡性黑色素瘤A375細(xì)胞中的表達(dá)明顯高于其在人正常皮膚組織中的表達(dá);Nm23-h1m RNA在人惡性黑色素瘤A375細(xì)胞中的表達(dá)低于其在人正常皮膚組織中的表達(dá),其差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.Tiam1蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì),呈棕褐色顆粒。Tiam蛋白在CMM、皮膚交界痣及正常皮膚組中陽性表達(dá)率分別為78.79%(52/66)、46.67%(14/30)和10.00%(2/20),呈逐漸降低趨勢(shì),差異具有統(tǒng)學(xué)意義(P0.05)。三組間兩兩比較顯示:CMM組中Tiam1蛋白陽性表達(dá)明顯高于其在皮膚交界痣中的陽性表達(dá),其在交界痣的表達(dá)明顯高于正常皮膚組織中的表達(dá)(P0.05);在CMM中隨腫瘤浸潤(rùn)深度的增加Tiam1蛋白的陽性表達(dá)也逐漸增高,在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的CMM患者中Tiam1蛋白表達(dá)水平高于不伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者,并且差異均具有統(tǒng)計(jì)意義(P0.05)。3.Nm23-h1蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)中,呈棕黃色顆粒狀。Nm23-h1蛋白在CMM、皮膚交界痣及正常皮膚組中陽性表達(dá)率為15.15%(10/66)、44.67%(14/30)和80.00%(16/20)。Nm23-h1蛋白在CMM、皮膚交界痣及正常皮膚中表達(dá)逐漸增強(qiáng),其在三組中的陽性表達(dá)率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),三組間兩兩比較顯示:CMM組中Nm23-h1蛋白陽性表達(dá)明顯低于其在皮膚交界痣中的陽性表達(dá),其在交界痣的表達(dá)明顯低于正常皮膚組織中的表達(dá)(P0.05);在CMM中隨腫瘤浸潤(rùn)深度的增加Nm23-h1蛋白的陽性表達(dá)也逐漸降低,在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的CMM患者中Nm23-h1蛋白表達(dá)水平低于不伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者,并且差異均具有統(tǒng)計(jì)意義(P0.05)。4.Tiam1及Nm23-h1蛋白表達(dá)的相關(guān)性分析:Tiam1蛋白的表達(dá)與Nm23-h1蛋白的表達(dá)均呈負(fù)相關(guān)(r=-0.298,P0.05)。結(jié)論1.Tiam1在惡性黑色素瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中存在促進(jìn)作用。2.Nm23-h1在惡性黑色素瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中起一定的抑制作用。3.Tiam1、Nm23-h1可能作為治療惡性黑色素瘤的基因靶點(diǎn),為惡黑的診斷治療及預(yù)后分析提供新的參考。
【關(guān)鍵詞】：T淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)因子1 轉(zhuǎn)移抑制因子23 惡性黑色素瘤 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng) 免疫組化
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R739.5
【目錄】：

• 摘要4-8
• Abstract8-14
• 中英文縮略詞對(duì)照表14-15
• 前言15-19
• 材料與方法19-27
• 結(jié)果27-31
• 討論31-37
• 結(jié)論37-38
• 參考文獻(xiàn)38-41
• 附圖41-44
• 綜述部分 惡性黑色素瘤與Tiam1 的研究進(jìn)展44-59
• 參考文獻(xiàn)56-59
• 個(gè)人簡(jiǎn)介及在讀期間已發(fā)表和正在發(fā)表的論文59-60
• 致謝60-61

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 劉書靜;田道法;何迎春;曾亮;黃辰;劉宇勤;;不同轉(zhuǎn)移潛能鼻咽癌細(xì)胞鈣電流特征與細(xì)胞遷徙能力的相關(guān)性[J];癌癥;2007年05期

2 胡華;;多西他賽對(duì)小鼠肺轉(zhuǎn)移黑色素瘤抑制作用的研究[J];標(biāo)記免疫分析與臨床;2015年06期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 陳潔;人卵巢癌細(xì)胞系具有不同轉(zhuǎn)移潛能亞系的分離和鑒定及體外腹膜模型的建立[D];山東大學(xué);2005年

2 程萬宏;Wnt-1基因和nm23-H_1基因在肺腺癌中的表達(dá)及siRNA抑制Wnt-1基因?qū)θ朔蜗侔┘?xì)胞株A2的影響[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2007年

3 劉書靜;鼻咽癌顱內(nèi)轉(zhuǎn)移的證型特點(diǎn)及其分子基礎(chǔ)初步研究[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2005年

  本文關(guān)鍵詞：Tiam1及Nm23-h1在惡性黑色素瘤中的表達(dá)，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：318510