目的誘導(dǎo)建立小鼠淋巴管內(nèi)皮細胞構(gòu)成的良性腫瘤模型,觀察小鼠黑素瘤細胞B16-F1體外對淋巴管增生的影響,探討大蒜素抑制小鼠黑素瘤細胞B16-F1體外誘導(dǎo)淋巴管增生及大蒜素對小鼠黑素瘤細胞B16-F1增殖及凋亡的影響。方法8周齡C57BL/6小鼠16只腹腔注射弗氏不完全佐劑,間隔15天2次,分批處死小鼠后,對誘導(dǎo)出的小鼠腹腔新生物進行病理組織學(xué)觀察,用免疫組織化學(xué)方法檢測淋巴管內(nèi)皮細胞標(biāo)志性抗原VEGF-C和Flt-4。分離、分切腫物后,于纖維蛋白凝膠內(nèi)用單純B16-F1細胞條件培養(yǎng)液培養(yǎng)及分別加入不同濃度（3、6、9μg/ml）的大蒜素細胞條件培養(yǎng)液培養(yǎng),倒置顯微鏡下觀察。傳代培養(yǎng)小鼠黑素瘤B16-F1細胞,使細胞濃度為5×1 04個/ml,分別加入不同濃度（3、6、9、12、15μg/ml）的大蒜素細胞培養(yǎng)液。培養(yǎng)不同時間后,用噻唑藍（MTT）法檢測細胞毒性,用原位末端標(biāo)記（TUNEL）法檢測細胞凋亡,用定量RT-PCR法檢測了不同濃度的大蒜素作用小鼠黑素瘤細胞B16-F1后腫瘤細胞ras基因的表達水平。結(jié)果實驗小鼠中13只（81.3%）膈肌腹腔面、肝臟表面及側(cè)腹壁腹腔面可見邊界清楚... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

腫瘤組織電子顯微鏡下表現(xiàn)

4.免疫組織化學(xué)免疫組織化學(xué)可見構(gòu)成的多管腔囊性結(jié)構(gòu)的腫瘤內(nèi)皮細胞表達VEGF一C和Flt一4陽性(圖3)。(A)VEGF一3表達 X100(B)Flt一4表達 x200圖3腫瘤組織免疫組織化學(xué)

結(jié)果見第一部分。疫組織化學(xué)結(jié)果見第一部分。淋巴管體外培養(yǎng)觀察淋巴管瘤組織塊培養(yǎng)3一4天后可見出芽，從腫瘤長入凝膠，逐管狀，微管有明顯的管壁和管腔，逐級分支。在B16一Fl細胞養(yǎng)液作用下，微淋巴管生成數(shù)顯著高于對照組(圖4)。在不同3、6、9pg/而)的大蒜素細胞條件培養(yǎng)液作用下，微淋巴管生著低于對照組(圖5)。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2972706