目的:研究姜黃揮發(fā)油(TVO)對人皮膚鱗狀細(xì)胞癌SCL-1細(xì)胞體外增殖、遷移與侵襲的影響,初步探討其凋亡的作用機(jī)制。方法:運(yùn)用噻唑藍(lán)(MTT)法檢測不同濃度姜黃揮發(fā)油在不同時(shí)間段(24h、48h、72h)對人皮膚鱗癌SCL-1細(xì)胞體外增殖的影響;細(xì)胞劃痕和細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)檢測姜黃揮發(fā)油對人皮膚鱗癌SCL-1細(xì)胞體外遷移和侵襲能力的影響;流式細(xì)胞術(shù)分析及倒置顯微鏡觀察確定姜黃揮發(fā)油誘導(dǎo)SCL-1細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡率;蛋白免疫印記(Western blot)檢測姜黃揮發(fā)油對人皮膚鱗癌SCL-1細(xì)胞Survivin及Caspase-3蛋白表達(dá)量變化的影響。結(jié)果:通過MTT、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)及細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)提示姜黃揮發(fā)油對SCL-1細(xì)胞的體外增殖、遷移和侵襲具有明顯抑制作用。MTT法檢測結(jié)果表明姜黃揮發(fā)油能夠有效抑制皮膚鱗癌SCl-1細(xì)胞增殖,隨姜黃揮發(fā)油濃度增加,作用時(shí)間加長,姜黃揮發(fā)油對細(xì)胞SCL-1抑制增殖作用越明顯,呈一定時(shí)間-濃度依賴性。倒置顯微鏡下觀察經(jīng)姜黃揮發(fā)油(5、10、20、40、80mg/L)處理SCL-1細(xì)胞48h后,與對照組相比較,SCL-1細(xì)胞增殖速度逐漸減慢,貼壁性逐漸降低,隨藥物濃度越高細(xì)胞間隙增大越明顯;可見細(xì)胞胞體變圓、變小、甚至脫落,可見漂浮細(xì)胞;流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果提示經(jīng)姜黃揮發(fā)油干預(yù)過的SCL-1細(xì)胞,隨著姜黃揮發(fā)油濃度不斷增加,凋亡率明顯增加;80mg/L姜黃揮發(fā)油抑制率達(dá)33%(P0.05)。選擇濃度相對較低的姜黃揮發(fā)油(10、20mg/L)為終濃度實(shí)驗(yàn)組,通過細(xì)胞劃痕試驗(yàn)、細(xì)胞侵襲試驗(yàn)檢測姜黃揮發(fā)油對皮膚鱗癌SCL-1細(xì)胞遷移、侵襲的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn),與對照組(DMSO組)相比姜黃揮發(fā)油能顯著降低皮膚鱗癌細(xì)胞的遷移與侵襲能力(P0.05);Western blot檢測姜黃揮發(fā)油作用SCL-1細(xì)胞48h后,實(shí)驗(yàn)濃度Caspase-3蛋白表達(dá)量高于對照組,Survivin蛋白表達(dá)量明顯低于對照組,以20mg/L姜黃揮發(fā)油蛋白表達(dá)量變化幅度最大。結(jié)果表明姜黃揮發(fā)油能顯著上調(diào)凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3的表達(dá)(P0.05),下調(diào)Survivin蛋白的表達(dá)。結(jié)論:姜黃揮發(fā)油能夠顯著抑制人皮膚鱗癌SCL-1細(xì)胞的體外增殖、遷移與侵襲能力;且與其濃度呈正相關(guān);Western blot檢測結(jié)果表明姜黃揮發(fā)油能顯著上調(diào)凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3的表達(dá)(P0.05),下調(diào)Survivin蛋白的表達(dá)(P0.05);其可能的機(jī)制是通過調(diào)節(jié)凋亡相關(guān)蛋白survivin、caspase-3蛋白的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。
【學(xué)位單位】：貴州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R739.5
【部分圖文】：

姜黃的化學(xué)結(jié)構(gòu)式
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本文編號：2882609