研究背景 銀屑病是一種常見(jiàn)的易反復(fù)發(fā)作的慢性炎癥性皮膚病，其典型特征為角質(zhì)形成細(xì)胞的過(guò)度增生以及T細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的浸潤(rùn)。銀屑病的確切病因不明。遺傳、激素、環(huán)境和感染因素在疾病的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮一定的作用。目前認(rèn)為銀屑病是由輔助性T細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫性疾病，多種炎癥細(xì)胞及細(xì)胞因子在其發(fā)病過(guò)程中起重要的作用。角質(zhì)形成細(xì)胞和浸潤(rùn)細(xì)胞產(chǎn)生的促炎細(xì)胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6參與在銀屑病的病理生理學(xué)機(jī)制。多種細(xì)胞因子的級(jí)聯(lián)反應(yīng)導(dǎo)致銀屑病皮損部位的炎癥持續(xù)存在。雖然銀屑病最初被認(rèn)為是Th1介導(dǎo)的疾病，但是最近有報(bào)道Th17細(xì)胞參與銀屑病發(fā)病過(guò)程。 IL-26，也被稱(chēng)為AK155，主要由Th17細(xì)胞產(chǎn)生，屬于IL-10細(xì)胞因子家族成員。IL-26基因絕在大多數(shù)脊椎動(dòng)物中相對(duì)保守，但不存在于大多數(shù)的嚙齒動(dòng)物（包括小鼠、大鼠）。IL-26基因在松鼠猴皰疹病毒轉(zhuǎn)化的T細(xì)胞首次被發(fā)現(xiàn)。IL-26僅表達(dá)于某些T細(xì)胞和NK細(xì)胞亞群中。有研究報(bào)道IL-26可通過(guò)異二聚體受體IL-10R2/IL-20R1進(jìn)行信號(hào)傳導(dǎo)。IL-10R2廣泛表達(dá)于各種細(xì)胞中，但I(xiàn)L-20R1僅表達(dá)于各種上皮細(xì)胞中。IL-26在克羅恩病和類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中表達(dá)升高；IL-26可上調(diào)腸上皮細(xì)胞表達(dá)IL-8、IL-10、TNF-α和或CD54，這與STAT3（和/或STAT1）磷酸化有關(guān)；但是IL-26在人類(lèi)疾病中的潛在作用仍然未知。 目的: 研究IL-26在銀屑病患者血清中的表達(dá)及其在銀屑病發(fā)病機(jī)制中的作用，從而為闡明銀屑病的發(fā)病機(jī)制和疾病的診斷、治療提供新的線(xiàn)索。 方法： 1.采用ELISA方法測(cè)定血清中IL-26水平，分析其與銀屑病皮損面積和嚴(yán)重程度指數(shù)的相關(guān)性。 2. Western Blot檢測(cè)IL-26刺激HaCaT細(xì)胞后STAT1的磷酸化。 3.采用ELISA方法測(cè)定IL-26刺激角質(zhì)形成細(xì)胞后產(chǎn)生的細(xì)胞因子（TNF-α、IFN-γ和IL-1β)的表達(dá)水平。 結(jié)果： 1.與健康對(duì)照組比較，銀屑病患者血清中的IL-26濃度顯著升高（t=-15.63，P0.001），并且與患者銀屑病皮損面積和嚴(yán)重程度指數(shù)正相關(guān)（r=0.62，P0.001）。 2. IL-26誘導(dǎo)HaCaT細(xì)胞STAT1磷酸化。 3. IL-26刺激后角質(zhì)形成細(xì)胞中的TNF-α、IFN-γ和IL-1β表達(dá)顯著升高(P﹤0.001)。 結(jié)論： 1.血清IL-26在銀屑病中表達(dá)升高并與疾病嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。 2. IL-26誘導(dǎo)角質(zhì)形成細(xì)胞中STAT1的磷酸化和細(xì)胞因子(TNF-α、IFN-γ和IL-1β)的產(chǎn)生參與銀屑病的發(fā)病機(jī)制。
【學(xué)位單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2014
【中圖分類(lèi)】：R758.63
【部分圖文】：

實(shí)驗(yàn)結(jié)果1 IL-26 在銀屑病中的表達(dá)與 PASI 的關(guān)系ELISA 測(cè)定銀屑病患者組和健康組血清中的 IL-26 濃度，結(jié)±244.37 pg/ml、537.24±148.78 pg/ml。與健康對(duì)照組比較，銀屑蛋白濃度升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t = -15.63，P<0.001），如圖 1Area and Severity Index）為銀屑病皮損面積和嚴(yán)重程度指數(shù)，是嚴(yán)重程度的可靠指標(biāo)。銀屑病患者 PASI 為 11.93±2.45，為進(jìn)疾病的相關(guān)性，我們采用 Pearson 相關(guān)性分析方法分析 IL-26 關(guān)性，結(jié)果顯示血清 IL-26 濃度與 PASI 呈正相關(guān)，差異具有統(tǒng)P<0.001），如圖 1B。

圖1 B 銀屑病患者血清IL-26濃度與PASI的相關(guān)性2 IL-26對(duì)HaCaT細(xì)胞STAT1蛋白的作用角質(zhì)形成細(xì)胞增殖、分化以及功能的異常是銀屑病皮損組織典型的特征STAT1 是機(jī)體重要的轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)控炎性相關(guān)基因的表達(dá)；多種細(xì)胞因可通活化 STAT1 角調(diào)節(jié)質(zhì)形成細(xì)胞的病理生理活性。因此，我們分析 IL-26 對(duì) HaC細(xì)胞（永生化角質(zhì)形成細(xì)胞）中 STAT1 磷酸化的影響。HaCaT 細(xì)胞與濃度為ng/ml、1 ng/ml、10 ng/ml 和 50 ng/ml 的 IL-26 培養(yǎng)液共培養(yǎng) 1 h 后，經(jīng)反復(fù)測(cè)，Western blot 結(jié)果如圖 2 所示，不同濃度（1 ng/ml、10 ng/ml 和 50 ng/ml）IL刺激組 HaCaT 細(xì)胞中 STAT1 均發(fā)生了磷酸化改變；然而空白對(duì)照組未發(fā)STAT1 磷酸化。

圖 2 HaCaT 細(xì)胞 STAT1 磷酸化。 Blank：空白組,A：1 ng/ml ，B：10 ng/ml， C：50 ng/ml IL-26 刺激 1 h 后 HaCaT 細(xì)胞 STAT1 磷酸化。3 IL-26 刺激 HaCaT 細(xì)胞分泌炎癥細(xì)胞因子為了進(jìn)一步研究IL-26對(duì)HaCaT細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)，我們采用不同濃度IL-26(1 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml) 培養(yǎng)液與 HaCaT 細(xì)胞共培養(yǎng) 24 h 后， ELISA 分析細(xì)胞培養(yǎng)上清液 TNF-α、IFN-γ和 IL-1β的表達(dá)，如表 1 所示：與空白對(duì)照組比較，不同濃度 IL-26 刺激組 TNF-α、IFN-γ和 IL-1β的表達(dá)顯著升高（P均<0.001），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；并且 TNF-α、IFN-γ和 IL-1β水平均隨 IL-26濃度增加而升高（P 均<0.001）。
【參考文獻(xiàn)】

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1 趙愷;黃棟;趙冬梅;陳翀;吳慶運(yùn);潘彬;曾令宇;李振宇;徐開(kāi)林;;異基因骨髓移植并發(fā)移植物抗宿主病小鼠體內(nèi)IL-22的細(xì)胞來(lái)源[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2013年06期

本文編號(hào)：2878135