白癜風(fēng)是皮膚科常見的慢性疾病,臨床上以斑片狀或泛發(fā)狀皮膚色素脫失為特征,患者表皮皮損處黑素細(xì)胞明顯減少或完全消失。白癜風(fēng)的發(fā)病機(jī)制尚不清楚,不同學(xué)者就其病因及發(fā)病機(jī)理提出多種學(xué)說,如自身免疫學(xué)說、神經(jīng)學(xué)說、黑素細(xì)胞自毀學(xué)說、遺傳學(xué)說、黑素細(xì)胞生長因子缺乏學(xué)說等。但任何單一學(xué)說均不能完全解釋白癜風(fēng)的發(fā)病機(jī)理,有學(xué)者認(rèn)為多因素、多基因累積共同導(dǎo)致了白癜風(fēng)的發(fā)生,不同的個(gè)體可能存在不同病因的組合,其中遺傳基因的易感性在其中占據(jù)了重要的地位。 近些年來,關(guān)于白癜風(fēng)病因的研究趨向兩極分化的情況,一種理論傾向于白癜風(fēng)的發(fā)生是由于自身免疫性紊亂破壞黑素細(xì)胞引起,另一種理論則傾向于表皮細(xì)胞產(chǎn)生毒性物質(zhì)導(dǎo)致黑素細(xì)胞的破壞進(jìn)而引起白癜風(fēng)的發(fā)生。因此,鑒于兩種理論在白癜風(fēng)發(fā)病中所占的重要位置,本課題在研究之初便分別選擇了與自身免疫和黑素細(xì)胞毒作用緊密相關(guān)的兩個(gè)基因作為研究重點(diǎn),試圖尋找其基因多態(tài)性和白癜風(fēng)發(fā)病的相關(guān)性。 兒茶酚鄰位甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)催化兒茶酚胺第3位羥基甲基化,是降解兒茶酚胺的主要代謝酶。文獻(xiàn)表明COMT基因第4號外顯子存在一個(gè)GA點(diǎn)突變使158密碼子從纈氨酸(Val)到蛋氨酸(Met)錯(cuò)義突變,導(dǎo)致COMT酶活性改變,可以引起黑素細(xì)胞毒性兒茶酚胺過量表達(dá),從而導(dǎo)致黑素細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能破壞。Tursen在土耳其人群中對50名白癜風(fēng)患者和66名健康對照研究發(fā)現(xiàn), COMT-158(GA)單核苷酸基因多態(tài)性與面頸型白癜風(fēng)的發(fā)病相關(guān)。此位點(diǎn)不僅涉及遺傳學(xué)方面的問題,還涉及黑素細(xì)胞自毀學(xué)說,但Tursen的研究樣本量非常小,尚缺乏其它的相關(guān)報(bào)道,以大樣本證明該位點(diǎn)與白癜風(fēng)發(fā)病的相關(guān)性顯得特別重要。 PTPN22編碼淋巴蛋白酪氨酸磷酸酶(LYP),在T細(xì)胞信號通路里起著負(fù)調(diào)節(jié)作用。PTPN22的活性增強(qiáng)能提高胸腺細(xì)胞發(fā)育中效應(yīng)性TCR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的閾值,使對自身反應(yīng)性T細(xì)胞的陰性選擇缺乏。在正常機(jī)體內(nèi),調(diào)節(jié)性T(Treg)細(xì)胞對于防止機(jī)體罹患自身免疫性疾病有著極其重要的作用,有學(xué)者認(rèn)為PTPN22活性增加會(huì)降低調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的TCR信號轉(zhuǎn)導(dǎo),進(jìn)而減弱調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的調(diào)節(jié)功能。通過上述兩條機(jī)制的共同或單獨(dú)作用,PTPN22功能異�？梢詫�(dǎo)致自身免疫性疾病的發(fā)生。PTPN22基因被認(rèn)為是HLA之外最為重要的人類自身免疫性疾病的易感基因。PTPN22+1858 CT的錯(cuò)義突變,是高加索人種多種自身免疫性疾病的危險(xiǎn)因素。PTPN22基因是從自身免疫角度研究白癜風(fēng)發(fā)病的重要候選基因。 目的:分析COMT基因、PTPN22基因單核苷酸多態(tài)性與中國漢族人群白癜風(fēng)發(fā)病的相關(guān)性,探討白癜風(fēng)的遺傳學(xué)背景及發(fā)病機(jī)制。 方法:對749例白癜風(fēng)患者和763例正常對照抗凝血抽提基因組DNA,使用PCR-SSP方法檢測兒茶酚鄰位甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)基因第4外顯子158密碼子堿基單核苷酸多態(tài)性。使用PCR-RFLP和PCR-SSP方法分別檢測PTPN22基因+1858位點(diǎn),啟動(dòng)子-1123位點(diǎn),3’UTR區(qū)rs3811021三個(gè)位點(diǎn)單核苷酸多態(tài)性。對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,探討COMT基因,PTPN22基因單核苷酸多態(tài)性與中國漢族人群白癜風(fēng)發(fā)病的相關(guān)性。 結(jié)果:與COMT-158 GG基因型相比,-158GA (adjusted odds ratio [OR], 1.39; 95% CI, 1.13-1.72)和-158AA(adjusted OR, 1.55; 95% CI, 0.99-2.42)基因型增加罹患白癜風(fēng)的危險(xiǎn)性,合并基因型GA+AA顯著增加小于20歲人群( adjusted OR=1.95, 95% CI=1.45-2.60)和女性人群(adjusted OR=1.74, 95% CI=1.29-2.36)罹患白癜風(fēng)的危險(xiǎn)性。在臨床分型中合并基因型GA+AA與散發(fā)型白癜風(fēng)(adjusted OR=1.31, 95% CI=1.02-1.68)、局限型白癜風(fēng)(adjusted OR=1.62, 95% CI=1.17-2.25)和泛發(fā)型白癜風(fēng)(adjusted OR=1.50, 95% CI=0.98-2.30)發(fā)病相關(guān),但與肢端型和皮節(jié)型白癜風(fēng)的發(fā)病相關(guān)性不顯著。 通過兩種PCR-RFLP方法發(fā)現(xiàn),所選擇樣本中不存在PTPN22 +1858位點(diǎn)基因多態(tài)性現(xiàn)象。PTPN22-1123位點(diǎn)C等位基因頻率在白癜風(fēng)患者中顯著高于正常對照組(44.1% vs. 40.0%, P = 0.025)。在-1123 G/C多態(tài)性中與含有野生型G等位基因的聯(lián)合基因型GG+CG相比,變異的基因型CC增加罹患白癜風(fēng)的危險(xiǎn)性,CC基因型調(diào)整的比值比(aOR)和95%可信區(qū)間(95%CI)為1.29 (1.00-1.68)。rs3811021位點(diǎn)C等位基因頻率在白癜風(fēng)患者和正常對照組之間沒有顯著差異(20.6% vs. 20.8%, P = 0.928)。 進(jìn)一步對PTPN22-1123和rs3811021兩位點(diǎn)進(jìn)行單倍體型分析發(fā)現(xiàn),單倍體基因型中突變數(shù)目的增加與罹患白癜風(fēng)的危險(xiǎn)性呈正相關(guān)。單倍體基因型突變2-4個(gè)組顯著增加男性罹患白癜風(fēng)的危險(xiǎn)性1.42(1.03-1.97)。單倍體基因型突變2-4個(gè)組顯著增加20歲之后罹患白癜風(fēng)的危險(xiǎn)性1.61(1.10-2.34)。單倍體基因型突變2-4個(gè)組顯著增加罹患非節(jié)段型白癜風(fēng)的危險(xiǎn)性,但與臨床分期無關(guān)。 結(jié)論:本研究首次分析了中國漢族人群中COMT、PTPN22基因單核苷酸多態(tài)性和單倍體基因型與白癜風(fēng)發(fā)病的相關(guān)性,發(fā)現(xiàn)COMT-158和PTPN22-1123位點(diǎn)多態(tài)性和漢族白癜風(fēng)發(fā)病相關(guān),為研究漢族人群白癜風(fēng)易感基因打下基礎(chǔ)。由于種族差異,大樣本量、不同種族的重復(fù)性研究仍十分必要。所選兩個(gè)基因的研究結(jié)果支持白癜風(fēng)的發(fā)病與免疫學(xué)說、黑素細(xì)胞自毀學(xué)說及遺傳學(xué)說均相關(guān),但其臨床意義有待深入研究。
【學(xué)位單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2007
【中圖分類】：R758.41
【文章目錄】：
縮略語表
中文摘要
英文摘要
前言和文獻(xiàn)回顧
正文
    實(shí)驗(yàn)一 樣本資料的收集和基因組 DNA 抽提
        1.主要試驗(yàn)設(shè)備、試劑和液體配置
        2.調(diào)查表的設(shè)計(jì)以及條目定義
        3 研究對象的選擇與血液標(biāo)本的采集
        4. 數(shù)據(jù)錄入及統(tǒng)計(jì)分析
        5.基因組 DNA 的制備
    實(shí)驗(yàn)二 COMT-158 位點(diǎn)基因多態(tài)性的檢測及其與白癜風(fēng)的相關(guān) 性研究
        1. 實(shí)驗(yàn)步驟及方法
        2 結(jié)果
        3 討論
    實(shí)驗(yàn)三 PTPN22 基因多態(tài)性位點(diǎn)的檢測及其與白癜風(fēng)的相關(guān) 性研究
        1. 實(shí)驗(yàn)步驟及方法
        2.結(jié)果
        3. 討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
個(gè)人簡歷和研究成果
致謝

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 孫越,韓菁,朱光斗;白癜風(fēng)150例家系調(diào)查[J];臨床皮膚科雜志;2000年03期

2 高天文,李強(qiáng),李春英,李志強(qiáng),王秋楓;白癜風(fēng)2008例臨床分析[J];中國皮膚性病學(xué)雜志;2002年05期

3 肖毅,趙玉銘,宋芳吉,劉永學(xué),高德凱,楊克力;HLA-DRB1等位基因與中國北方漢族 白癜風(fēng)的相關(guān)性[J];中華皮膚科雜志;2000年01期

4 邵明,劉焯霖,陶恩祥,陳彪;中國漢族人兒茶酚胺氧位甲基轉(zhuǎn)移酶基因多態(tài)性[J];中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志;2000年03期

本文編號：2873093