角質(zhì)形成細(xì)胞抗白念珠菌感染免疫作用機(jī)制的研究
【學(xué)位單位】:四川大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位年份】:2005
【中圖分類】:R756
【部分圖文】:
四川大學(xué)博士學(xué)位論文2一4代細(xì)胞和原代培養(yǎng)的細(xì)胞形態(tài)上沒(méi)有明顯差別。繼續(xù)培養(yǎng),細(xì)胞逐步變大,呈不規(guī)則型,出現(xiàn)空泡,甚至偽足,細(xì)胞崩解、死亡。一般可傳5一9代,約30一60天。
1.1細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化:消化分離的細(xì)胞大小不一,呈圓形、橢圓形或不規(guī)則形,細(xì)胞境界清楚,胞漿均勻;培養(yǎng)4一h6后細(xì)胞開始貼壁,至24h貼壁達(dá)到高峰(圖1一1)。貼壁細(xì)胞多呈島狀分布,逐漸向四周生長(zhǎng)擴(kuò)散,約二周左右細(xì)胞長(zhǎng)滿培養(yǎng)皿底部,達(dá)到融合。此時(shí)多以小細(xì)胞為主,呈多角形,扁平,鋪路石狀,核大,無(wú)異常核分裂像,細(xì)胞呈單層生長(zhǎng),沒(méi)有成纖維細(xì)胞混雜(圖1一2一1一5);而在有血清的培養(yǎng)基中,混雜較多的成纖維細(xì)胞(圖1一6);當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)滿皿底70一8%0時(shí)傳代,第
四川大學(xué)博士學(xué)位論文圖l一5無(wú)血清培養(yǎng)1d2細(xì)胞形態(tài)x600圖1一6血清培養(yǎng)12d細(xì)胞形態(tài)x400圖1一1~1一5分別代表角質(zhì)形成細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)條件下,從貼壁(24h開始)到融合(12d左右)的過(guò)程;細(xì)胞形態(tài)呈多角形,扁平,鋪路石狀,細(xì)胞核較大。圖1一6代表血清培養(yǎng)的角質(zhì)形成細(xì)胞,有成纖維細(xì)胞的混雜。1.2細(xì)胞鑒定:試驗(yàn)組用抗廣譜角蛋白抗體對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞免疫組化染色,細(xì)胞漿呈黃棕色顆粒,即對(duì)廣譜角蛋白抗體呈陽(yáng)性反應(yīng)(圖1一7),鑒定為角質(zhì)形成細(xì)胞;而陰性對(duì)照組細(xì)胞沒(méi)有著色。圖1一7廣譜角蛋白CK的免疫組化染色x400細(xì)胞漿對(duì)廣譜角蛋白KC抗體呈陽(yáng)性反應(yīng)(黃棕色),提示培養(yǎng)的細(xì)胞為角質(zhì)形成細(xì)胞2RT一POR檢洲TL--RZmRNA的結(jié)果
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本文編號(hào):2820759
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