發(fā)布時間：2020-09-16 11:00

　　 背景:鮑溫樣丘疹病(bowenoid papulosis,BP)及尖銳濕疣(condylomaacuminatum,CA)與人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染密切相關(guān),尖銳濕疣多與低危型HPV(low-risk HPV)感染相關(guān),而鮑溫樣丘疹病則與高危型HPV(high-risk HPV)感染密切相關(guān)。Wade等提出部分BP病例僅表現(xiàn)出CA的病理形態(tài),而不具有顯著的細(xì)胞排列紊亂及異型性,尤其是出現(xiàn)挖空細(xì)胞時,很難將二者鑒別開來,可能部分有發(fā)生不典型增生及惡變的可能。研究表明在HPV相關(guān)的CA與BP皮損中p16蛋白過度表達(dá),且表達(dá)升高的程度不同,部分研究認(rèn)為p16蛋白的表達(dá)升高與高危型HPV的感染呈正相關(guān),有些則認(rèn)為只有陽性結(jié)果呈正相關(guān),而陰性結(jié)果無關(guān)。 目的:檢測p16蛋白在BP以及CA組織中的表達(dá)情況,并檢測上述組織中HPV感染的型別。探討p16蛋白在BP與CA中的表達(dá)情況,p16與HPV型別之間的關(guān)系,p16與HPV型別分別在鑒別診斷BP與CA中的意義及在推測向不典型增生及腫瘤轉(zhuǎn)化的可能。為可能向腫瘤及不典型增生轉(zhuǎn)化的尖銳濕疣與鮑溫樣丘疹病的臨床治療提供依據(jù)。 方法:收集外陰病理活檢確診為鮑溫樣丘疹病及尖銳濕疣的患者的活檢標(biāo)本,應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測p16蛋白,導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)檢測上述組織中HPV感染的型別。 結(jié)果:p16在正常對照包皮、尖銳濕疣、鮑溫樣丘疹病中的表達(dá)均值有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。且均值正常包皮低于尖銳濕疣,尖銳濕疣的均值低于鮑溫樣丘疹病的均值。28例尖銳濕疣中HPV6 DNA陽性14例(占50%),HPV11DNA陽性9例(占32.1%),HPV6及HPV11 DNA混合陽性3例(占10.7%),HPV11及HPV18 DNA混合陽性1例(占3.6%),未測出HPV DNA陽性1例(占3.6%)。28例鮑溫樣丘疹病標(biāo)本中HPV16 DNA陽性17例(占60.7%),HPV6DNA陽性1例(占3.5%)、所測的31種HPV DNA均陰性10例(占35.7%)。 結(jié)論:尖銳濕疣感染的HPV感染率為96.4%,以HPV6、11為主,鮑溫樣丘疹病感染HPV陽性率為64.2%,以HPV16為主。p16~(INK4a)在高危型HPV陽性的標(biāo)本中的表達(dá)陽性率高于在低危型HPV表達(dá)陽性的標(biāo)本中的表達(dá),遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于在HPV陰性的標(biāo)本中表達(dá),且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但陰性結(jié)果無相關(guān)性。
【學(xué)位單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2008
【中圖分類】：R752.53;R758.6
【部分圖文】：

尖銳濕疵組織:p16表達(dá)免疫組化X400

圖1一3正常對照包皮:P16表達(dá)免疫組化X400討論根據(jù)細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑的不同，細(xì)胞周期蛋白可以分為兩:eIP/KIP家族—p21、p27、p57:INK4家族—p一6、p15、pls、plg。p在內(nèi)皮受損時發(fā)生巨大變化，提示p16‘nk4。在腫瘤形成或細(xì)胞不典型增生中胞增殖〔3�！场Pv病毒癌蛋白E6、E7和一些細(xì)胞周期蛋白導(dǎo)致了細(xì)胞周期與一系列后表達(dá)的變更。QueirozC進(jìn)行了50例宮頸活檢標(biāo)本(包括陰性標(biāo)本和CIN)組化研究中，比較了p16、p53、ki67(MIB抗體)在宮頸上皮內(nèi)瘤形成的不表達(dá)量的不同。經(jīng)過與組織病理結(jié)果的比照，發(fā)現(xiàn)p16ink4。與ki67較pyclinDI與腫瘤形成的相關(guān)性更大。單克隆抗體p16ink4Q與ki67可運(yùn)用被HPV感染的宮頸活檢標(biāo)本，將其分為CINI(p16ink4a陽性)和高級別(細(xì)胞增生指數(shù)ki67)。設(shè)想通過這些細(xì)胞周期蛋白的免疫組化測定區(qū)分出治療或是積極治療的HPv感染的cIN病人〔3，’。

2.PCR體系配制:25ul反應(yīng)體系中l(wèi)ul模板，23.25ulPCRmix，0.75ulTaq酶。試劑的配置在超凈臺內(nèi)完成。按操作說明書操作。3.PCR反應(yīng):反應(yīng)程序?yàn)?95度gmin95度20see55度30sec40個循環(huán)72度30see72度smin4度HOLD4.導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù):使用凱普醫(yī)用導(dǎo)流雜交儀和凱普HPV基因分型檢測試劑盒，按照操作說明書逐步操作試驗(yàn)，分型檢測HPV。

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 郭書萍;白莉;馮艷;;P16蛋白表達(dá)在鮑溫樣丘疹病與尖銳濕疣鑒別診斷中的意義[J];中國藥物與臨床;2006年09期

2 余俐,彭杰,彭杰青,暴菊英,鄔全會,柳息洪;尖銳濕疣的原位雜交組化和免疫組化對比研究[J];中國皮膚性病學(xué)雜志;2004年04期

3 王家璧,劉躍華,王宏偉,王曉峰,方凱;鮑溫樣丘疹病患者的人乳頭瘤病毒DNA檢測[J];中華皮膚科雜志;1997年03期

本文編號：2819777