背景:鮑溫樣丘疹病(bowenoid papulosis,BP)及尖銳濕疣(condylomaacuminatum,CA)與人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染密切相關,尖銳濕疣多與低危型HPV(low-risk HPV)感染相關,而鮑溫樣丘疹病則與高危型HPV(high-risk HPV)感染密切相關。Wade等提出部分BP病例僅表現(xiàn)出CA的病理形態(tài),而不具有顯著的細胞排列紊亂及異型性,尤其是出現(xiàn)挖空細胞時,很難將二者鑒別開來,可能部分有發(fā)生不典型增生及惡變的可能。研究表明在HPV相關的CA與BP皮損中p16蛋白過度表達,且表達升高的程度不同,部分研究認為p16蛋白的表達升高與高危型HPV的感染呈正相關,有些則認為只有陽性結果呈正相關,而陰性結果無關。 目的:檢測p16蛋白在BP以及CA組織中的表達情況,并檢測上述組織中HPV感染的型別。探討p16蛋白在BP與CA中的表達情況,p16與HPV型別之間的關系,p16與HPV型別分別在鑒別診斷BP與CA中的意義及在推測向不典型增生及腫瘤轉化的可能。為可能向腫瘤及不典型增生轉化的尖銳濕疣與鮑溫樣丘疹病的臨床治療提供依據(jù)。 方法:收集外陰病理活檢確診為鮑溫樣丘疹病及尖銳濕疣的患者的活檢標本,應用免疫組織化學法檢測p16蛋白,導流雜交基因芯片技術檢測上述組織中HPV感染的型別。 結果:p16在正常對照包皮、尖銳濕疣、鮑溫樣丘疹病中的表達均值有統(tǒng)計學差異。且均值正常包皮低于尖銳濕疣,尖銳濕疣的均值低于鮑溫樣丘疹病的均值。28例尖銳濕疣中HPV6 DNA陽性14例(占50%),HPV11DNA陽性9例(占32.1%),HPV6及HPV11 DNA混合陽性3例(占10.7%),HPV11及HPV18 DNA混合陽性1例(占3.6%),未測出HPV DNA陽性1例(占3.6%)。28例鮑溫樣丘疹病標本中HPV16 DNA陽性17例(占60.7%),HPV6DNA陽性1例(占3.5%)、所測的31種HPV DNA均陰性10例(占35.7%)。 結論:尖銳濕疣感染的HPV感染率為96.4%,以HPV6、11為主,鮑溫樣丘疹病感染HPV陽性率為64.2%,以HPV16為主。p16~(INK4a)在高危型HPV陽性的標本中的表達陽性率高于在低危型HPV表達陽性的標本中的表達,遠遠高于在HPV陰性的標本中表達,且有統(tǒng)計學差異,但陰性結果無相關性。
【學位單位】：復旦大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2008
【中圖分類】：R752.53;R758.6
【部分圖文】：

尖銳濕疵組織:p16表達免疫組化X400

圖1一3正常對照包皮:P16表達免疫組化X400討論根據(jù)細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑的不同，細胞周期蛋白可以分為兩:eIP/KIP家族—p21、p27、p57:INK4家族—p一6、p15、pls、plg。p在內(nèi)皮受損時發(fā)生巨大變化，提示p16‘nk4。在腫瘤形成或細胞不典型增生中胞增殖〔3。〕。HPv病毒癌蛋白E6、E7和一些細胞周期蛋白導致了細胞周期與一系列后表達的變更。QueirozC進行了50例宮頸活檢標本(包括陰性標本和CIN)組化研究中，比較了p16、p53、ki67(MIB抗體)在宮頸上皮內(nèi)瘤形成的不表達量的不同。經(jīng)過與組織病理結果的比照，發(fā)現(xiàn)p16ink4。與ki67較pyclinDI與腫瘤形成的相關性更大。單克隆抗體p16ink4Q與ki67可運用被HPV感染的宮頸活檢標本，將其分為CINI(p16ink4a陽性)和高級別(細胞增生指數(shù)ki67)。設想通過這些細胞周期蛋白的免疫組化測定區(qū)分出治療或是積極治療的HPv感染的cIN病人〔3，’。

2.PCR體系配制:25ul反應體系中l(wèi)ul模板，23.25ulPCRmix，0.75ulTaq酶。試劑的配置在超凈臺內(nèi)完成。按操作說明書操作。3.PCR反應:反應程序為:95度gmin95度20see55度30sec40個循環(huán)72度30see72度smin4度HOLD4.導流雜交基因芯片技術:使用凱普醫(yī)用導流雜交儀和凱普HPV基因分型檢測試劑盒，按照操作說明書逐步操作試驗，分型檢測HPV。

【參考文獻】

相關期刊論文 前3條

1 郭書萍;白莉;馮艷;;P16蛋白表達在鮑溫樣丘疹病與尖銳濕疣鑒別診斷中的意義[J];中國藥物與臨床;2006年09期

2 余俐,彭杰,彭杰青,暴菊英,鄔全會,柳息洪;尖銳濕疣的原位雜交組化和免疫組化對比研究[J];中國皮膚性病學雜志;2004年04期

3 王家璧,劉躍華,王宏偉,王曉峰,方凱;鮑溫樣丘疹病患者的人乳頭瘤病毒DNA檢測[J];中華皮膚科雜志;1997年03期

本文編號：2819777