目的:1.研究UVB對皮膚成纖維細胞的作用及Salubrinal抗UVB照射潛在的藥用價值。2.探討Salubrinal在UVB照射引起的皮膚成纖維細胞死亡中的作用機制。方法:1.UVB照射對皮膚成纖維細胞的影響及Salubrinal對UVB誘導的皮膚成纖維細胞死亡的影響:采用體外培養(yǎng)的人包皮成纖維細胞(BJ細胞),實驗分4組,空白對照組,Salubrinal處理組,Salubrinal預處理后UVB照射組,UVB照射組,然后通過MTT法、臺盼藍試驗檢測細胞增殖存活情況。2.Salubrinal對UVB照射引起的皮膚成纖維細胞死亡的作用,采用體外培養(yǎng)的人包皮成纖維細胞(BJ細胞),分為實驗組和對照組,實驗組用Salubrinal預處理,對照組不進行處理,然后分別用5種不同強度UVB照射,通過MTT法檢測細胞增殖存活情況。3.Salubrinal有效劑量測定:體外培養(yǎng)的人包皮成纖維細胞分為實驗組及對照組,對照組及實驗組均用5個濃度梯度Salubrinal預處理,然后實驗組用凋亡劑量UVB照射,對照組不用UVB照射,通過MTT法檢測各組細胞增殖存活情況。4.UVB照射對皮膚成纖維細胞內質網應激水平的影響:實驗分4組,每組用不同強度UVB照射,然后通過Western blot檢測內質網應激相關蛋白p-PERK、PERK、CHOP、p-IRE1α及裂解的caspase3的變化。5.Salubrinal對UVB照射皮膚成纖維細胞內質網應激水平的影響:實驗分4組,對照組,Salubrinal處理組,UVB照射組,Salubrinal預處理后UVB照射組,通過Western Blot檢測細胞內質網應激標記物p-PERK、PERK、CHOP及p-IRE1α的水平變化。6.Salubrinal對UVB照射皮膚成纖維細胞胞內Ca~(2+)水平影響,實驗分Salubrinal處理組和對照組,然后分別分別用3個不同強度UVB照射,通過共聚焦熒光顯微鏡觀察細胞內相應的Ca~(2+)信號。結果:1.UVB照射皮膚成纖維細胞后,細胞存活率下降,經不同濃度Salubrinal預處理后,細胞存活率增加,且呈劑量依賴性。2.不同強度UVB照射人皮膚成纖維細胞后,胞內內質網應激相關蛋白p-PERK、CHOP、p-IRE1α及裂解的caspase3表達水平增加,且呈劑量依賴性方式。3.經Salubrinal預處理組較未處理組相比,UVB照射人皮膚成纖維細胞后,內質網應激相關蛋白p-PERK、CHOP、p-IRE1α表達水平下降。4.Salubrinal能防止UVB照射引起的人皮膚成纖維細胞內Ca2+水平增加。結論:1.UVB照射能引起皮膚成纖維細胞死亡,Salubrinal對其具有保護作用。2.UVB照射通過內質網應激及鈣穩(wěn)態(tài)失衡引起皮膚成纖維細胞死亡,Salubrinal對其保護作用是通過阻斷內質網應激及調節(jié)鈣穩(wěn)態(tài)來實現的。
【學位單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R758.1
【部分圖文】：

Salubrinal濃度對UVB誘導的皮膚成纖維細胞損傷的影響

UVB照射對人皮膚成纖維細胞內質網應激水平的影響

通過Western blot檢測Salubrinal預處理并暴露于UVB照射后細胞內CHPERK，磷酸化PERK（Thr 980）和磷酸化IRE1α（Ser 724）的表達水平，如示，通過預處理Salubrinal，UVB誘導的CHOP和磷酸化的PERK / IRE1a的表平升高顯著減弱（圖3A和B），而對照組及只加Salubrinal組相關蛋白表達無統(tǒng)計學差異。A3.Salubrinal 預處理后 UVB 照射人皮膚成纖維細胞內質網應水平變化

【參考文獻】

相關期刊論文 前1條

1 蔣潔瑤;紀超;畢志剛;張美華;;反式玉米素抑制紫外線誘導的水通道蛋白3下調有關的信號通路[J];臨床皮膚科雜志;2013年06期

本文編號：2819655