目的:1.研究UVB對(duì)皮膚成纖維細(xì)胞的作用及Salubrinal抗UVB照射潛在的藥用價(jià)值。2.探討Salubrinal在UVB照射引起的皮膚成纖維細(xì)胞死亡中的作用機(jī)制。方法:1.UVB照射對(duì)皮膚成纖維細(xì)胞的影響及Salubrinal對(duì)UVB誘導(dǎo)的皮膚成纖維細(xì)胞死亡的影響:采用體外培養(yǎng)的人包皮成纖維細(xì)胞(BJ細(xì)胞),實(shí)驗(yàn)分4組,空白對(duì)照組,Salubrinal處理組,Salubrinal預(yù)處理后UVB照射組,UVB照射組,然后通過MTT法、臺(tái)盼藍(lán)試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖存活情況。2.Salubrinal對(duì)UVB照射引起的皮膚成纖維細(xì)胞死亡的作用,采用體外培養(yǎng)的人包皮成纖維細(xì)胞(BJ細(xì)胞),分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組用Salubrinal預(yù)處理,對(duì)照組不進(jìn)行處理,然后分別用5種不同強(qiáng)度UVB照射,通過MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖存活情況。3.Salubrinal有效劑量測(cè)定:體外培養(yǎng)的人包皮成纖維細(xì)胞分為實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組,對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組均用5個(gè)濃度梯度Salubrinal預(yù)處理,然后實(shí)驗(yàn)組用凋亡劑量UVB照射,對(duì)照組不用UVB照射,通過MTT法檢測(cè)各組細(xì)胞增殖存活情況。4.UVB照射對(duì)皮膚成纖維細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激水平的影響:實(shí)驗(yàn)分4組,每組用不同強(qiáng)度UVB照射,然后通過Western blot檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白p-PERK、PERK、CHOP、p-IRE1α及裂解的caspase3的變化。5.Salubrinal對(duì)UVB照射皮膚成纖維細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激水平的影響:實(shí)驗(yàn)分4組,對(duì)照組,Salubrinal處理組,UVB照射組,Salubrinal預(yù)處理后UVB照射組,通過Western Blot檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)記物p-PERK、PERK、CHOP及p-IRE1α的水平變化。6.Salubrinal對(duì)UVB照射皮膚成纖維細(xì)胞胞內(nèi)Ca~(2+)水平影響,實(shí)驗(yàn)分Salubrinal處理組和對(duì)照組,然后分別分別用3個(gè)不同強(qiáng)度UVB照射,通過共聚焦熒光顯微鏡觀察細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的Ca~(2+)信號(hào)。結(jié)果:1.UVB照射皮膚成纖維細(xì)胞后,細(xì)胞存活率下降,經(jīng)不同濃度Salubrinal預(yù)處理后,細(xì)胞存活率增加,且呈劑量依賴性。2.不同強(qiáng)度UVB照射人皮膚成纖維細(xì)胞后,胞內(nèi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白p-PERK、CHOP、p-IRE1α及裂解的caspase3表達(dá)水平增加,且呈劑量依賴性方式。3.經(jīng)Salubrinal預(yù)處理組較未處理組相比,UVB照射人皮膚成纖維細(xì)胞后,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白p-PERK、CHOP、p-IRE1α表達(dá)水平下降。4.Salubrinal能防止UVB照射引起的人皮膚成纖維細(xì)胞內(nèi)Ca2+水平增加。結(jié)論:1.UVB照射能引起皮膚成纖維細(xì)胞死亡,Salubrinal對(duì)其具有保護(hù)作用。2.UVB照射通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及鈣穩(wěn)態(tài)失衡引起皮膚成纖維細(xì)胞死亡,Salubrinal對(duì)其保護(hù)作用是通過阻斷內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及調(diào)節(jié)鈣穩(wěn)態(tài)來實(shí)現(xiàn)的。
【學(xué)位單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R758.1
【部分圖文】：

Salubrinal濃度對(duì)UVB誘導(dǎo)的皮膚成纖維細(xì)胞損傷的影響

UVB照射對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激水平的影響

通過Western blot檢測(cè)Salubrinal預(yù)處理并暴露于UVB照射后細(xì)胞內(nèi)CHPERK，磷酸化PERK（Thr 980）和磷酸化IRE1α（Ser 724）的表達(dá)水平，如示，通過預(yù)處理Salubrinal，UVB誘導(dǎo)的CHOP和磷酸化的PERK / IRE1a的表平升高顯著減弱（圖3A和B），而對(duì)照組及只加Salubrinal組相關(guān)蛋白表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。A3.Salubrinal 預(yù)處理后 UVB 照射人皮膚成纖維細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)水平變化

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 蔣潔瑤;紀(jì)超;畢志剛;張美華;;反式玉米素抑制紫外線誘導(dǎo)的水通道蛋白3下調(diào)有關(guān)的信號(hào)通路[J];臨床皮膚科雜志;2013年06期

本文編號(hào)：2819655