【目的】建立小鼠皮膚光老化模型,用強(qiáng)脈沖光(Intense PulsedLight,IPL)進(jìn)行治療,通過比較治療前后皮膚組織中生化指標(biāo)、組織結(jié)構(gòu)、病理形態(tài)學(xué)和細(xì)胞因子的變化,從不同層面全面評價和了解IPL的作用。 【方法】 ①長波紫外線(Ultraviolet A,UVA)、中波紫外線(UltravioletB,UVB)聯(lián)合光照造模。 ②實(shí)驗分組:設(shè)立正常對照組、模型組小鼠,模型成功后,從中分別設(shè)立IPL治療組(IPL治療后1w、3w),以及與造模停止后與IPL治療組同期動態(tài)觀察的IPL對照組(未治療1w后組、未治療3w后組)。 ③生化指標(biāo)的測量:紫外分光光度計測定IPL治療前各組小鼠皮膚中的超氧化物歧化酶(Superoxide Dismatase,SOD)、丙二醛(Malcic Dialdehyde,MDA)、羥脯氨酸(Hydroxyproline,HYP)含量; ④組織形態(tài)學(xué)觀察:分別采用HE常規(guī)染色和地衣紅染色法觀察皮膚的組織結(jié)構(gòu)和膠原纖維和彈力纖維的變化; ⑤細(xì)胞因子的檢測:用免疫組化SP法檢測IPL治療前后核轉(zhuǎn)錄因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)、血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、腫瘤壞死因子(Tumour Necrosis Factor,TNF-α)在小鼠皮膚中的表達(dá)與分布情況。 【結(jié)果】 1.肉眼觀察:模型組小鼠出現(xiàn)明顯的光老化特征; 2.生物指標(biāo)檢測:與正常對照組比較,模型組SOD、HYP含量降低,MDA含量升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);IPL治療后,SOD、MDA變化不明顯,HYP輕度升高,與未治療兩組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05): 3.病理組織切片形態(tài)學(xué)觀察觀察: 正常對照組:表皮菲薄,細(xì)胞層數(shù)少或單層,真皮層膠原纖維較纖細(xì),排列較稀疏,呈粉紅色; 模型組:表皮明顯增厚,可伴有角化過度或角化不全,表皮細(xì)胞體積增大,核深染,真皮淺層膠原束增粗,均質(zhì)化,染色變深: IPL治療組:IPL治療后1w、3w組表皮逐漸變薄;真皮淺層膠原增厚,組織排列較前致密; 未治療組:未治療1w、3w后組表皮逐漸變薄;真皮層變化不大; 4.皮膚厚度測量: 模型組小鼠表皮厚度值明顯高于正常組小鼠,兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);模型組小鼠真皮厚度值明顯低于正常組小鼠,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05): IPL治療1w表皮略厚于未治療1w后組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05),真皮厚度差異亦無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);IPL治療3w后與未治療3w后組比較,表皮厚度差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05),真皮厚度差異有統(tǒng)計學(xué)意義,即IPL治療3w后組真皮厚于未治療3w后組(P＜0.05); 5.彈力纖維染色:用地衣紅染色法將彈力纖維染成棕黑色,與正常組比較模型組可見增多、增粗的變形彈力纖維,IPL治療后,變性彈力纖維逐漸變少; 6.彈力纖維面積:模型組與正常對照組兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05),即模型組彈力纖維面積大于正常對照組;IPL治療3w組與未治療3w后組比較兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05),即IPL治療3w后組彈力纖維面積小于未治療3w后組彈力纖維面積; 7.免疫組化染色: ①NF-κB的表達(dá):模型組與正常組相比,差異顯著,有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);IPL治療后1w組與未治療1w后組相比,有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05);IPL治療后3w組與未治療3w后組相比,無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05); ②TNF-α的表達(dá):在模型組中的表達(dá)與正常對照組相比,差異顯著有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);IPL治療后,模型1w組與IPL1w組比較,有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05),未治療3w后組與IPL1w組比較,無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05); ③VEGF的表達(dá):模型組與正常組對比,差異顯著,有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);IPL治療1w后與未治療1w組對比,有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05);IPL治療3w與未治療3w后比較,無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05): 【結(jié)論】 ①經(jīng)UVA聯(lián)合UVB照射8w的小鼠初步具備皮膚光老化模型臨床及病理診斷依據(jù); ②IPL對表皮層的刺激較小,引起的表皮增厚現(xiàn)象在組織病理形態(tài)學(xué)上并不持久; ③IPL主要作用于真皮層;④NF-κB、TNF-α、VEGF三者的表達(dá)與皮膚光老化的形成有顯著相關(guān); ⑤IPL治療后NF-κB、TNF-α、VEGF的表達(dá)上調(diào),提示三者可能參與了IPL所致的熱損傷修復(fù)過程,且可能有時間相關(guān)性。
【學(xué)位單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2008
【中圖分類】：R751.05
【部分圖文】：

碩士學(xué)位論文第三章實(shí)驗結(jié)果第三章實(shí)驗結(jié)果3.1肉眼觀察(見圖3一‘一3一‘2)正常對照組:小鼠背部皮膚薄嫩光滑，濕潤有光澤，柔韌而富有彈性，皮紋細(xì)致，看不見皺紋，無光老化皮膚特征;光照模型組:接受照射1周小鼠皮膚暴光部位明顯較前潮紅，濕潤度下降;光照2周皮膚干燥，皮紋加深;光照3周皮膚干燥伴局部脫屑，可見活動性皺紋;光照4周，觸感皮膚增厚，彈性下降，可見活動性皺紋;光照5周，靜止?fàn)顟B(tài)下可見皺紋;光照6周皮膚明顯干燥、皺紋變深

碩士學(xué)位論文第三章實(shí)驗結(jié)果第三章實(shí)驗結(jié)果3.1肉眼觀察(見圖3一‘一3一‘2)正常對照組:小鼠背部皮膚薄嫩光滑，濕潤有光澤，柔韌而富有彈性，皮紋細(xì)致，看不見皺紋，無光老化皮膚特征;光照模型組:接受照射1周小鼠皮膚暴光部位明顯較前潮紅，濕潤度下降;光照2周皮膚干燥，皮紋加深;光照3周皮膚干燥伴局部脫屑，可見活動性皺紋;光照4周，觸感皮膚增厚，彈性下降，可見活動性皺紋;光照5周，靜止?fàn)顟B(tài)下可見皺紋;光照6周皮膚明顯干燥、皺紋變深

明顯干燥、皺紋變深，皮膚彈性差，膚質(zhì)較硬圖3一7接受光照6w，皺紋進(jìn)一加寬、加深，膚質(zhì)硬圖3一8接受光照8w，皮膚溝槽樣粗深皺紋形成圖3一10IPL術(shù)后的模型鼠圖3一 11IPL術(shù)后3周的模型鼠，皺紋較治療前明顯減少、變淺圖3一12與IPL治療后3w比較，未治療3w后小鼠皮膚外觀無明顯改善3.2小鼠皮膚組織中生化指標(biāo)的測定與正常對照組比較，模型含量組SOD、HYP含量明顯降低，MDA含量增高

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 章小曼;基于新型光學(xué)成像技術(shù)的小鼠皮膚光老化及修復(fù)機(jī)制的實(shí)驗研究[D];福建師范大學(xué);2010年

2 徐小暉;小鼠皮膚深Ⅱ度燙傷及治療的光學(xué)觀察與分析[D];福建師范大學(xué);2012年

本文編號：2809922