【摘要】：將單純皰疹病毒的胸苷激酶(Herpes simplex virus thymidine kinase，HSV-tk)基因導入腫瘤細胞中表達，聯(lián)合使用藥物丙氧鳥苷(Ganciclovir，GCV)可有效地殺傷腫瘤。其主要機理是：GCV作為一種核苷類似物，可在HSV-TK酶(胸苷激酶)作用下生成一磷酸化合物(GCVMP)，繼而在細胞內其它酶的作用下生成三磷酸化合物(GCVTP)，后者可阻斷細胞DNA復制，導致細胞死亡。另外，通過“旁觀者效應(bystander effect)”還可以有效殺傷tk~+細胞周圍的tk~-細胞。因此只要有一部分腫瘤細胞表達HSV-tk基因即可殺死全部腫瘤細胞。 本研究用一種與潮霉素磷酸轉移酶基因(hygromycin phosphotransferase gene，hph)相融合的HSV1-tk基因作為目的基因(稱為HyTK基因)，構建了重組逆轉錄病毒載體LNCHyTK；用lipofectin將其導入包裝細胞PA317中，獲得了產(chǎn)病毒細胞PA317／LNCHyTK及含有重組病毒的細胞上清(病毒上清)；以惡性黑色素瘤細胞為主要對象，研究了逆轉錄病毒介導的HyTK基因轉移聯(lián)合應用GCV對小鼠惡性黑色素瘤細胞株B16的體外及體內殺傷作用。此外，還觀察了HyTK基因／GCV對人宮頸癌細胞株HeLa和SiHa細胞，及人肝癌細胞株H7402細胞的體外殺傷作用。 體外實驗表明，逆轉錄病毒介導的HyTK基因轉移可顯著提高B16細胞對GCV的敏感性(較未轉染的B16細胞高100-1000倍以上)，并且可觀察到“旁觀者效應”。HyTK基因／GCV系統(tǒng)對H7402細胞和HeLa細胞也具有
【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：1996
【分類號】：R739.5

【參考文獻】

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1 吳小兵,蘇成芝,伍志堅,趙健,彭朝暉;逆轉錄病毒介導的HyTK基因轉移及殺傷惡性黑色素瘤細胞的研究[J];第四軍醫(yī)大學學報;1996年03期

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3 賴冠華，陳詩書;用于多基因表達的逆轉錄病毒載體[J];生命的化學(中國生物化學會通訊);1995年05期

本文編號：2758710