【摘要】: 目的 黃褐斑又稱“蝴蝶斑”,是一種常見的色素增多性皮膚病,皮疹好發(fā)于面部,對(duì)病人的身心健康有較大的影響。目前對(duì)黃褐斑的機(jī)制仍未完全闡明,其病因仍不太清楚,臨床治療上也無特效的方法[1],因此研究其色素沉著的發(fā)生機(jī)制,對(duì)于預(yù)防和治療黃褐斑具有十分重要的臨床意義。 以往研究表明,皮膚色素加深主要是由于皮膚中的黑素顆粒增多引起的。人類皮膚色素沉著過程主要為:成熟的黑素小體合成黑素,黑素小體向樹突遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移傳遞至鄰近角質(zhì)形成細(xì)胞,然后在角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)分布和降解。在這一過程中,黑素顆粒合成增多、黑素顆粒從黑素小體向鄰近角質(zhì)形成細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)減少及角質(zhì)形成細(xì)胞新陳代謝下降等環(huán)節(jié)都有可能引起皮膚中的色素沉著。 Imokawa[2]認(rèn)為在黑素細(xì)胞的增殖以及黑素顆粒的合成、成熟、轉(zhuǎn)運(yùn)等過程中,黑素細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞及成纖維細(xì)胞等可以分泌和產(chǎn)生多種細(xì)胞因子并構(gòu)成網(wǎng)絡(luò),相互協(xié)調(diào),共同調(diào)節(jié)。其中干細(xì)胞因子(stem cell factor SCF)和c-kit受體就是其中一對(duì)重要的細(xì)胞因子,主要調(diào)節(jié)黑素的合成[3]。 本實(shí)驗(yàn)研究擬通過免疫組織化學(xué)方法對(duì)c-kit受體在不同色素性皮膚疾病中的表達(dá)進(jìn)行染色,并采用CMIAS多功能真彩色病理圖像分析系統(tǒng)(空軍總醫(yī)院與北京航空航天大學(xué)共同研制),進(jìn)行染色后的病理形態(tài)學(xué)圖像定量分析,初步探討c-kit受體在黃褐斑中的特異性表達(dá),以及其在黃褐斑色素沉著發(fā)生機(jī)制中的作用。 方法 1收集空軍總醫(yī)院皮膚科2004年6月~2008年4月黃褐斑、黑變病、炎癥后色素沉著病理標(biāo)本32份,所有標(biāo)本診斷均經(jīng)臨床及病理學(xué)證實(shí)。其中實(shí)驗(yàn)組黃褐斑12例,對(duì)照1組黑變病9例,對(duì)照2組炎癥后色素沉著11例。應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法觀察c-kit受體在三組標(biāo)本中的表達(dá)情況。 2每張切片在顯微鏡物鏡40X下,隨機(jī)選擇5個(gè)視野進(jìn)行彩色圖像采集與存儲(chǔ),圖像分析時(shí)先期進(jìn)行陽性目標(biāo)(靶目標(biāo))的彩色分割、編輯,從而獲得滿意的圖形圖像后,對(duì)標(biāo)本進(jìn)行染色后的病理形態(tài)學(xué)圖像定量分析,計(jì)算出每個(gè)視野的形態(tài)學(xué)陽性目標(biāo)中的多項(xiàng)測(cè)量參數(shù)。本實(shí)驗(yàn)主要獲得實(shí)驗(yàn)組與兩對(duì)照組陽性目標(biāo)的平均積分光密度值及各組間平均積分光密度值的標(biāo)準(zhǔn)差(x±S)并進(jìn)行比較。 3經(jīng)SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行組間兩兩t檢驗(yàn)。 結(jié)果 1黃褐斑皮損的c-kit受體陽性表達(dá)產(chǎn)物為淺紅至深紅色顆;驁F(tuán)塊,定位于表皮基底層黑素細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞胞漿或細(xì)胞膜表面及毛囊周圍的表皮細(xì)胞,在表皮基底層處形成紅色條帶,其他部位幾乎無表達(dá);黑變病及炎癥后色素沉著皮損真皮中有少許吞噬黑素顆粒也呈現(xiàn)紅色,考慮為吞噬的黑素顆粒染色,c-kit受體呈弱陽性或陰性表達(dá)。 2 c-kit受體在三組中表達(dá)的平均積分光密度值經(jīng)SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行組間兩兩t檢驗(yàn),可以看出黃褐斑組中c-kit受體平均積分光密度值(1.18±0.38)明顯高于黑變病組(0.38±0.08)及炎癥后色素沉著組(0.42±0.07),差異顯著(p0.05),而后兩者無明顯差異(p0.05)。 結(jié)論 本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:c-kit受體在黃褐斑組皮損的表達(dá)量及強(qiáng)度均明顯高于對(duì)照的黑變病及炎癥后色素沉著組皮損,而兩對(duì)照組之間c-kit受體的表達(dá)無明顯差異,表明c-kit受體在黃褐斑發(fā)生機(jī)制中可能起重要的調(diào)控作用。為進(jìn)一步研究黃褐斑的發(fā)病機(jī)制及治療提供了重要的理論依據(jù),并為其他色素增加或色素脫失性疾病的研究提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。對(duì)預(yù)防和治療黃褐斑也具有十分重要的臨床意義。
【學(xué)位授予單位】:第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2009
【分類號(hào)】:R758.42
【圖文】:
圖 1 將圖像導(dǎo)入分析系統(tǒng)2.2.4 如圖 2 所示,用鼠標(biāo)單擊分割目錄下的子目錄單點(diǎn)彩色分割,對(duì)圖像進(jìn)行單點(diǎn)彩色分割,陽性目標(biāo)呈現(xiàn)為藍(lán)色,后去除孤立點(diǎn),得到更為準(zhǔn)確的陽性目標(biāo)。

圖 1 將圖像導(dǎo)入分析系統(tǒng)2.2.4 如圖 2 所示,用鼠標(biāo)單擊分割目錄下的子目錄單點(diǎn)彩色分割,對(duì)圖像進(jìn)行單點(diǎn)彩色分割,陽性目標(biāo)呈現(xiàn)為藍(lán)色,后去除孤立點(diǎn),得到更為準(zhǔn)確的陽性目標(biāo)。

第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文.5 如圖 3、4 所示,進(jìn)行分析工作前要先正確進(jìn)行比例尺寸及密度標(biāo)用 40X 專用標(biāo)尺進(jìn)行尺寸標(biāo)定,通常尺寸設(shè)定為 100μm,由計(jì)算機(jī)自該目標(biāo)下的實(shí)際比例尺寸;進(jìn)行光密度標(biāo)定時(shí),用鼠標(biāo)在空白區(qū)域上閉曲線,雙擊該曲線區(qū)域,右下角出現(xiàn)平均灰度值。尺寸及密度標(biāo)定放大倍數(shù)的物鏡下只需進(jìn)行一次即可。
【參考文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):
2751484
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