發(fā)布時間：2020-07-04 02:06

【摘要】： [研究背景]新生隱球菌所致的感染好發(fā)于細(xì)胞免疫功能低下患者,隨著器官移植、骨髓移植等新技術(shù)的發(fā)展以及AIDS患者的增多,隱球菌感染的發(fā)生率也呈逐年明顯上升的趨勢。研究發(fā)現(xiàn)隱球菌是一種胞內(nèi)兼性寄生菌,不僅可逃避巨噬細(xì)胞吞噬且即使被吞噬后也可存活于巨噬細(xì)胞內(nèi),可能是導(dǎo)致隱球菌病臨床復(fù)發(fā)的重要原因。因此選用合適載體將更多藥物輸送至感染細(xì)胞內(nèi)部是治愈該病的關(guān)鍵。殺手肽(killerpeptide),是近期研發(fā)的一種人工合成十肽,其序列為AKVTMTCSAS,它是一種水溶性多肽,對耐氟康唑白念珠菌、利什曼原蟲、巴西芽生菌和新生隱球菌均具有較強殺滅作用,初步研究表明其作用靶點主要為真菌細(xì)胞壁β1,3-葡聚糖。多肽類抗生素由于其結(jié)構(gòu)完全不同于傳統(tǒng)抗真菌藥物,目前耐藥發(fā)生率較低,且同傳統(tǒng)治療深部真菌感染的藥物相比,靶點位于細(xì)胞壁因此對哺乳動物副作用小,因此殺手肽具有安全無毒和不易耐藥等優(yōu)點。 [研究目的]本研究旨在選擇合適納米材料作為殺手肽KP的有效載體,探索并優(yōu)化制備工藝,制備出具有細(xì)胞內(nèi)靶向性且安全的載藥納米粒。。 [研究方法]基于以上目的,經(jīng)過預(yù)實驗,我們選擇目前研究較多的載體材料聚乳酸—羥基乙酸(poly lactic-co-glycolic acid,PLGA),采用雙乳法制備殺手肽—聚乳酸羥基乙酸納米復(fù)合體(KP-PLGA-NP),并采用透射電鏡、掃描電鏡、動態(tài)光散射、測定包封率載藥量、考察體外釋放等手段進(jìn)行相應(yīng)的表征測定;采用平板計數(shù)法驗證人工合成殺手肽對新生隱球菌ATCC32609的體外殺滅作用;構(gòu)建小鼠隱球菌系統(tǒng)感染模型,通過生存期和重要臟器染藺量的變化比較納米制劑同未包裹KP的療效變化,并通過生化指標(biāo)考察納米制劑毒副作用情況。 [研究結(jié)果]成功制備出并表征KP-PLGA-NP;驗證不同參數(shù)下其粒徑、包封率、分散度的變化趨勢,證明PVA濃度是影響表征的主要參數(shù);證實人工合成KP具有較強抗新生隱球菌ATCC32609作用,其作用強度同濃度正相關(guān),但療效不及CBS6995菌株,可能與ATCC32609菌株毒力較強有關(guān);同未被包裹的KP相比較,納米制劑使隱球菌系統(tǒng)感染小鼠生存期明顯延長,重要臟器染菌量顯著下降:納米物物對肝、腎及血液系統(tǒng)均未產(chǎn)生明顯損害 [結(jié)論]納米材料包裹KP可顯增強抗系統(tǒng)性隱球菌感染療效,其作用機制可能與納米材料的MPS細(xì)胞內(nèi)被動靶向性、對MPS系統(tǒng)的激活作用及減少肽類藥物同體內(nèi)各種酶的接觸有關(guān),因此納米材料制作為一種新型藥物傳遞與控釋的載體,具有靶向性、緩釋性、定時性和穩(wěn)定性等優(yōu)點。生物醫(yī)學(xué)和納米技術(shù)的結(jié)合將給會給隱球菌病的治療帶來更廣闊的前景。
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R318.08;R519;R756
【圖文】：

圖1.4KP一PLGA一NP體外釋藥(A，F(xiàn)):結(jié)果顯示在開始24小時內(nèi)1%PVA(A)和5%PVA(F)有一個較為明顯的突釋，但在后續(xù)釋放過程中，1%PVA比5%PVA釋放快，兩者都呈時間依賴釋放，并具有一定緩釋性。

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 吳梧桐,王友同,吳文俊;21世紀(jì)生物技術(shù)和生物制藥 一、生物技術(shù)藥物發(fā)展現(xiàn)狀[J];藥物生物技術(shù);2001年01期

本文編號：2740479