【摘要】： [研究背景]新生隱球菌所致的感染好發(fā)于細胞免疫功能低下患者,隨著器官移植、骨髓移植等新技術的發(fā)展以及AIDS患者的增多,隱球菌感染的發(fā)生率也呈逐年明顯上升的趨勢。研究發(fā)現隱球菌是一種胞內兼性寄生菌,不僅可逃避巨噬細胞吞噬且即使被吞噬后也可存活于巨噬細胞內,可能是導致隱球菌病臨床復發(fā)的重要原因。因此選用合適載體將更多藥物輸送至感染細胞內部是治愈該病的關鍵。殺手肽(killerpeptide),是近期研發(fā)的一種人工合成十肽,其序列為AKVTMTCSAS,它是一種水溶性多肽,對耐氟康唑白念珠菌、利什曼原蟲、巴西芽生菌和新生隱球菌均具有較強殺滅作用,初步研究表明其作用靶點主要為真菌細胞壁β1,3-葡聚糖。多肽類抗生素由于其結構完全不同于傳統(tǒng)抗真菌藥物,目前耐藥發(fā)生率較低,且同傳統(tǒng)治療深部真菌感染的藥物相比,靶點位于細胞壁因此對哺乳動物副作用小,因此殺手肽具有安全無毒和不易耐藥等優(yōu)點。 [研究目的]本研究旨在選擇合適納米材料作為殺手肽KP的有效載體,探索并優(yōu)化制備工藝,制備出具有細胞內靶向性且安全的載藥納米粒。。 [研究方法]基于以上目的,經過預實驗,我們選擇目前研究較多的載體材料聚乳酸—羥基乙酸(poly lactic-co-glycolic acid,PLGA),采用雙乳法制備殺手肽—聚乳酸羥基乙酸納米復合體(KP-PLGA-NP),并采用透射電鏡、掃描電鏡、動態(tài)光散射、測定包封率載藥量、考察體外釋放等手段進行相應的表征測定;采用平板計數法驗證人工合成殺手肽對新生隱球菌ATCC32609的體外殺滅作用;構建小鼠隱球菌系統(tǒng)感染模型,通過生存期和重要臟器染藺量的變化比較納米制劑同未包裹KP的療效變化,并通過生化指標考察納米制劑毒副作用情況。 [研究結果]成功制備出并表征KP-PLGA-NP;驗證不同參數下其粒徑、包封率、分散度的變化趨勢,證明PVA濃度是影響表征的主要參數;證實人工合成KP具有較強抗新生隱球菌ATCC32609作用,其作用強度同濃度正相關,但療效不及CBS6995菌株,可能與ATCC32609菌株毒力較強有關;同未被包裹的KP相比較,納米制劑使隱球菌系統(tǒng)感染小鼠生存期明顯延長,重要臟器染菌量顯著下降:納米物物對肝、腎及血液系統(tǒng)均未產生明顯損害 [結論]納米材料包裹KP可顯增強抗系統(tǒng)性隱球菌感染療效,其作用機制可能與納米材料的MPS細胞內被動靶向性、對MPS系統(tǒng)的激活作用及減少肽類藥物同體內各種酶的接觸有關,因此納米材料制作為一種新型藥物傳遞與控釋的載體,具有靶向性、緩釋性、定時性和穩(wěn)定性等優(yōu)點。生物醫(yī)學和納米技術的結合將給會給隱球菌病的治療帶來更廣闊的前景。
【學位授予單位】：第二軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2008
【分類號】：R318.08;R519;R756
【圖文】：

圖1.4KP一PLGA一NP體外釋藥(A，F):結果顯示在開始24小時內1%PVA(A)和5%PVA(F)有一個較為明顯的突釋，但在后續(xù)釋放過程中，1%PVA比5%PVA釋放快，兩者都呈時間依賴釋放，并具有一定緩釋性。

【參考文獻】

相關期刊論文 前1條

1 吳梧桐,王友同,吳文俊;21世紀生物技術和生物制藥 一、生物技術藥物發(fā)展現狀[J];藥物生物技術;2001年01期

本文編號：2740479