【摘要】： 研究背景及目的:惡性黑素瘤是一種最具侵襲性的皮膚腫瘤,其對(duì)常規(guī)化療藥物的耐藥性嚴(yán)重影響其預(yù)后。惡性黑素瘤的耐藥性可以是其內(nèi)在固有的,或者在腫瘤治療中形成的。這種耐藥性使腫瘤細(xì)胞不僅對(duì)用于治療的化療藥物耐藥,而且對(duì)其他不同作用機(jī)制的藥物產(chǎn)生多藥耐藥。因而逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的耐藥性,以提高化療療效,是治療惡性黑素瘤的重要課題。 近年來(lái),對(duì)凋亡相關(guān)分子及其在惡性黑素瘤中變化的認(rèn)識(shí),為研究惡性黑素瘤耐藥的分子基礎(chǔ)提供了新依據(jù)。因?yàn)榇蠖鄶?shù)化療藥物通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡發(fā)揮作用,因此腫瘤細(xì)胞對(duì)凋亡的抵抗可降低細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性。現(xiàn)有研究已證實(shí)凋亡及其調(diào)節(jié)因子是決定惡性黑素瘤耐藥的重要機(jī)制。其中以抗凋亡基因Bcl-2相關(guān)蛋白的作用尤為引人注目。Bcl-2基因家族促進(jìn)凋亡基因和抑制凋亡基因之間的平衡決定細(xì)胞存活和凋亡。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究表明,Bcl-2相關(guān)蛋白的變化可顯著改變藥物敏感性,與惡性黑素瘤耐藥有關(guān)。越來(lái)越多證據(jù)表明針對(duì)性抑制Bcl-2,可促進(jìn)細(xì)胞凋亡,提高腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性,從而逆轉(zhuǎn)惡性黑素瘤的耐藥性。因而B(niǎo)cl-2可作為抗腫瘤治療選擇的靶點(diǎn)。 反義寡核苷酸是人工合成的DNA序列,通過(guò)與特定靶基因的mRNA序列互補(bǔ)結(jié)合形成穩(wěn)定的雜交體,從而抑制特定基因的表達(dá)。反義寡核苷酸用于抑制致病基因已取得肯定療效。近來(lái)針對(duì)凋亡相關(guān)基因的反義核酸基因治療方法為惡性黑素瘤的治療提供了新途徑,對(duì)逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥性、延長(zhǎng)病人生存期有重要意義。目前針對(duì)Bcl-2的反義核酸作為最有希望的反義核酸藥物已同化療藥物聯(lián)合用于惡性黑素瘤Ⅲ期臨床實(shí)驗(yàn)。Bcl-xl和Mcl-1是Bcl-2基因家族抗凋亡基因,盡管已有報(bào)道Bcl-xl
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R739.5
【圖文】：

圖 3. 免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示 Mcl-1 蛋白分布情況. A.未轉(zhuǎn)染 WM451 細(xì)胞;B 轉(zhuǎn)染 Mcl-1AS-ODNWM451 細(xì)胞 .三 Mcl-1 反義寡核苷酸對(duì)細(xì)胞增殖的影響結(jié)果見(jiàn)圖 4。Mcl-1 反義寡核苷酸濃度低于 200nM 時(shí),對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯抑制。隨 Mcl-1 反義寡核苷酸濃度增加及作用時(shí)間延長(zhǎng), 惡性黑素瘤細(xì)胞 WM451 的增殖能力降低。抑制作用在 48 小時(shí)達(dá)高峰，以 400nM 濃度最為明顯，抑制率為 63.0%。隨后，抑制作用逐漸減弱，細(xì)胞恢復(fù)增殖。S-ODN、 NS-ODN 組在高濃度時(shí)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)也有抑制作用。60%80%100%)24h

1 2 3 4 5 6圖 1 .RT-PCR 檢測(cè) Bcl-xl 的 mRNA 表達(dá)4.AS-ODN24 小時(shí)； 5. AS-ODN10 小時(shí)；二 Bcl-xl 反義寡核苷酸在蛋白水平Western-blot 檢測(cè) Bcl-xl 的蛋白酸 10 小時(shí)后，反義寡核苷酸組 Bcl-無(wú)義寡核苷酸組基因表達(dá)無(wú)顯著變化1 2 3 4 5

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

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2 李春英,高天文,李廷慧,孫東杰,李強(qiáng),高鴿,劉玉峰;TRP-1編碼基因反義核酸對(duì)黑素細(xì)胞增殖及功能的影響[J];中華皮膚科雜志;2004年02期

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本文編號(hào)：2719392