【摘要】： 研究背景及目的:惡性黑素瘤是一種最具侵襲性的皮膚腫瘤,其對常規(guī)化療藥物的耐藥性嚴重影響其預(yù)后。惡性黑素瘤的耐藥性可以是其內(nèi)在固有的,或者在腫瘤治療中形成的。這種耐藥性使腫瘤細胞不僅對用于治療的化療藥物耐藥,而且對其他不同作用機制的藥物產(chǎn)生多藥耐藥。因而逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞的耐藥性,以提高化療療效,是治療惡性黑素瘤的重要課題。 近年來,對凋亡相關(guān)分子及其在惡性黑素瘤中變化的認識,為研究惡性黑素瘤耐藥的分子基礎(chǔ)提供了新依據(jù)。因為大多數(shù)化療藥物通過誘導(dǎo)細胞凋亡發(fā)揮作用,因此腫瘤細胞對凋亡的抵抗可降低細胞對化療藥物的敏感性�，F(xiàn)有研究已證實凋亡及其調(diào)節(jié)因子是決定惡性黑素瘤耐藥的重要機制。其中以抗凋亡基因Bcl-2相關(guān)蛋白的作用尤為引人注目。Bcl-2基因家族促進凋亡基因和抑制凋亡基因之間的平衡決定細胞存活和凋亡。動物實驗研究表明,Bcl-2相關(guān)蛋白的變化可顯著改變藥物敏感性,與惡性黑素瘤耐藥有關(guān)。越來越多證據(jù)表明針對性抑制Bcl-2,可促進細胞凋亡,提高腫瘤細胞對化療藥物的敏感性,從而逆轉(zhuǎn)惡性黑素瘤的耐藥性。因而Bcl-2可作為抗腫瘤治療選擇的靶點。 反義寡核苷酸是人工合成的DNA序列,通過與特定靶基因的mRNA序列互補結(jié)合形成穩(wěn)定的雜交體,從而抑制特定基因的表達。反義寡核苷酸用于抑制致病基因已取得肯定療效。近來針對凋亡相關(guān)基因的反義核酸基因治療方法為惡性黑素瘤的治療提供了新途徑,對逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥性、延長病人生存期有重要意義。目前針對Bcl-2的反義核酸作為最有希望的反義核酸藥物已同化療藥物聯(lián)合用于惡性黑素瘤Ⅲ期臨床實驗。Bcl-xl和Mcl-1是Bcl-2基因家族抗凋亡基因,盡管已有報道Bcl-xl
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號】：R739.5
【圖文】：

圖 3. 免疫細胞化學(xué)染色顯示 Mcl-1 蛋白分布情況. A.未轉(zhuǎn)染 WM451 細胞;B 轉(zhuǎn)染 Mcl-1AS-ODNWM451 細胞 .三 Mcl-1 反義寡核苷酸對細胞增殖的影響結(jié)果見圖 4。Mcl-1 反義寡核苷酸濃度低于 200nM 時,對細胞無明顯抑制。隨 Mcl-1 反義寡核苷酸濃度增加及作用時間延長, 惡性黑素瘤細胞 WM451 的增殖能力降低。抑制作用在 48 小時達高峰，以 400nM 濃度最為明顯，抑制率為 63.0%。隨后，抑制作用逐漸減弱，細胞恢復(fù)增殖。S-ODN、 NS-ODN 組在高濃度時對細胞生長也有抑制作用。60%80%100%)24h

1 2 3 4 5 6圖 1 .RT-PCR 檢測 Bcl-xl 的 mRNA 表達4.AS-ODN24 小時； 5. AS-ODN10 小時；二 Bcl-xl 反義寡核苷酸在蛋白水平Western-blot 檢測 Bcl-xl 的蛋白酸 10 小時后，反義寡核苷酸組 Bcl-無義寡核苷酸組基因表達無顯著變化1 2 3 4 5

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前3條

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本文編號：2719392