本文關鍵詞：抑黑方和促黑方調(diào)節(jié)人黑色素瘤A375細胞黑色素合成及酪氨酸酶活性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：從臨床治療黃褐斑和白癜風常用中藥中篩選調(diào)節(jié)黑色素合成的有效中藥以研制抑制和促進黑色素合成的中醫(yī)方劑，觀察該方對黑色素合成及酪氨酸酶活性的作用，探討抑黑方和促黑方治療色素障礙性皮膚病的作用機制和中醫(yī)病機，為中醫(yī)治療色素障礙性皮膚病提供有效方劑。 方法：從近30年中國期刊全文數(shù)據(jù)庫檢索治療黃褐斑和白癜風總結(jié)出常用270味中藥作為候選中藥，用95%乙醇室溫提取1周制備中藥醇提物；以100μg/ml藥物濃度處理人黑色素瘤A375細胞48小時后，用MTT法測定細胞生長活性，用NaoH裂解法測定黑色素含量，計算藥物抑制或促進黑色素合成率，選出黑色素合成抑制率或促進率高的藥物，分別檢測藥物作用量效關系；運用正交試驗設計優(yōu)選出最佳的藥物組合組成抑制或促進黑色素合成方劑，，分別命名為抑黑方和促黑方。檢測抑黑方和促黑方對人黑色素瘤A375細胞黑色素合成的量效和時效關系，用多巴氧化法檢測對人黑色素瘤A375細胞酪氨酸酶活性的量效和時效關系，在倒置顯微鏡下觀察黑色素瘤A375細胞形態(tài)變化并拍照。 結(jié)果：1.調(diào)節(jié)人黑色素瘤A375細胞黑色素合成中藥的篩選和方劑研制。分別用270味中藥醇提物以100μg/ml濃度處理人黑色素瘤A375細胞48h后，對加藥組與對照組的黑色素含量和細胞數(shù)光密度值（OD）進行單因素方差分析，選擇對黑色素合成有明顯差異而對細胞數(shù)無明顯差異的藥物，結(jié)果確定抑制黑色素藥物6味：荔枝核、香附、豬苓、薏苡仁、枸杞子和龜板；促進黑色素藥物6味：木香、川楝子、巴戟天、杜仲、蟬蛻和白芷。經(jīng)過正交試驗分析優(yōu)選出由分別上述兩組中藥組成的抑制黑色素合成方和促進進黑色素合成方，分別命名為抑黑方和促黑方。 2.抑黑方和促黑方對人黑色素瘤A375細胞黑色素合成作用呈量效和時效關系。當抑黑方和促黑方藥物濃度為6.25～100μg/ml時,隨著藥物濃度增加,對人黑色素瘤A375細胞黑色素合成抑制率和促進率都增強，藥物濃度至100μg/ml時達到最高峰值；當濃度為200～800μg/ml時,隨著藥物濃度增高，黑素抑制率和促進率都呈下降趨勢，至800μg/ml時都降至最低峰值。 3.抑黑方和促黑方對人黑色素瘤A375細胞酪氨酸酶活性作用呈量效和時效關系。抑黑方和促黑方濃度為6.25～100μg/ml時，隨著藥物濃度增加，對人黑色素瘤A375細胞酪氨酸酶活性抑制率和促進率都增加，藥物濃度為100μg/ml達最高峰值；當濃度為200～800μg/ml時，隨著藥物濃度增加，對酪氨酸酶活性抑制率和促進率都呈下降趨勢，至800μg/ml時降至最低峰值。 4.正常人黑色素瘤A375細胞鏡下呈梭形，當用100μg/ml藥物濃度處理細胞48小時后，抑黑方與對照組比較，細胞體積減小，細胞樹突變少，細胞內(nèi)黑素顆粒明顯減少；促黑方與對照組比較，細胞體積增大，細胞樹突增多，細胞呈梭形，三級或多級，細胞內(nèi)黑素顆粒顯著增加。 結(jié)論: 1.本研究為治療色素障礙性皮膚病提供了有效方劑抑黑方和促黑方。 2.抑黑方抑制黑色素合成和促黑方促進黑色素合成具有劑量和時間依賴性作用。 3.抑黑方和促黑方對黑色素合成作用與調(diào)節(jié)酪氨酸酶活性作用呈正相關。 4.通過文獻分析和實驗研究結(jié)果表明：色素障礙性皮膚病存在肝郁、腎虛、風濕邪侵病機。
【關鍵詞】：人黑色素瘤細胞A375 黑色素 酪氨酸酶 抑黑方 促黑方
【學位授予單位】：河南中醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R739.5
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-12
• 材料與方法12-20
• 1 實驗材料12-14
• 2 實驗方法14-18
• 3 統(tǒng)計學分析方法18-20
• 結(jié)果20-36
• 1 調(diào)節(jié)人黑色素瘤 A375 細胞黑色素合成中藥的篩選20
• 2 所選 12 味中藥對人黑色素瘤 A375 細胞黑色素合成的作用20-28
• 3 正交實驗確定抑制黑色素合成和促進黑色素合成最佳藥物組合28-32
• 4 抑黑方和促黑方對人黑色素瘤 A375 細胞黑色素合成的作用32-33
• 5 抑黑方和促黑方對人黑色素瘤 A375 細胞酪氨酸酶活性的作用33-34
• 6 抑黑方和促黑方對人黑色素瘤 A375 細胞形態(tài)學的影響34-36
• 討論36-42
• 1 抑黑方和促黑方對人黑色素瘤 A375 細胞黑色素合成的作用36-37
• 2 抑黑方和促黑方對人黑色素瘤 A375 細胞酪氨酸酶活性的作用37-38
• 3 抑黑方和促黑方體現(xiàn)中醫(yī)對色素障礙性皮膚病病因病機的探討38-42
• 結(jié)論42-44
• 參考文獻44-46
• 附錄 1 文獻綜述46-52
• 參考文獻51-52
• 附錄 2 在校期間論文論著和科研情況52

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 詹紅生;含藥血清實驗方法及其在中藥新藥研制中的應用展望[J];浙江中醫(yī)學院學報;2000年02期

2 郭念筠;滋補肝腎法治療自癜風的臨床體會[J];北京醫(yī)學;1980年04期

3 陳可平;王禾;;滋補肝腎疏風解郁法治療白癜風150例療效分析[J];北京中醫(yī);2006年10期

4 寧嶺;皮膚的美白[J];日用化學工業(yè);1998年03期

5 鄧燕,楊柳;當歸對體外黑素細胞和酪氨酸酶的激活作用[J];第一軍醫(yī)大學學報;2003年03期

6 馬慧軍,朱文元,岳學狀,王大光;甲氧沙林對培養(yǎng)人表皮黑素細胞黑素合成的影響及信號轉(zhuǎn)導的研究[J];臨床皮膚科雜志;2004年09期

7 馬慧軍,朱文元,王大光,岳學狀;中藥單體胡椒堿促進表皮黑素細胞黑素合成的實驗研究[J];臨床皮膚科雜志;2005年01期

8 成愛華;韓梅海;;黑素再生中藥對體外培養(yǎng)的黑素細胞酪氨酸酶基因和c-kit基因表達的影響[J];中國臨床醫(yī)學;2008年01期

9 羅增香;項蕾紅;李劍;張勇;鄭志忠;;兩味中藥單體對人黑素細胞酪氨酸酶活性及黑素合成的影響[J];中國麻風皮膚病雜志;2008年08期

10 易建平;黃聯(lián)繼;易建昌;;歸芪二白凝膠外治黃褐斑62例療效觀察[J];新中醫(yī);2006年05期

  本文關鍵詞：抑黑方和促黑方調(diào)節(jié)人黑色素瘤A375細胞黑色素合成及酪氨酸酶活性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：271867