【摘要】： 目的:皮膚的屏障功能對(duì)角質(zhì)細(xì)胞DNA的合成具有調(diào)節(jié)作用,在急性動(dòng)物模型中,當(dāng)屏障功能降低時(shí),表皮細(xì)胞DNA的合成增加,其增加的程度與屏障功能異常的程度成正比,當(dāng)屏障功能改善后,由屏障功能異常所誘導(dǎo)的DNA的合成受到相應(yīng)的抑制。亞急性及慢性皮炎的主要病理改變是表皮增生過度;生理改變是表皮屏障功能降低,但亞急性及慢性皮炎表皮增生過度與屏障功能改變的相關(guān)性,目前尚無此方面的研究。本實(shí)驗(yàn)的目的是分別以0.5%2,4二硝基氟苯(DNFB)及0.01%佛波酯(TPA)造亞急性及慢性皮炎的動(dòng)物模型,并通過加用非通透性的膜覆蓋及涂擦保濕劑硅油來改善表皮屏障功能,以普通組織病理及增生細(xì)胞核抗原(PCNA)的表達(dá)來評(píng)價(jià)表皮增生是否改變,進(jìn)而推斷表皮屏障功能改變是否與亞急性或慢性皮炎的表皮增生有關(guān)。 方法:將小鼠隨機(jī)分成A、B、C三組,每組分為1、2、3小組,其中A組乙醇組,B組2,4二硝基氟苯組(DNFB)、C組佛波酯組(TPA);1設(shè)為基質(zhì)組,2設(shè)為保鮮膜組,3設(shè)為硅油組,分別計(jì)為A1、A2、A3;B1、B2、B3;C1、C2、C3。A1組(乙醇基質(zhì)組)為單純外搽90%乙醇,A2組(乙醇保鮮膜組)為外搽90%乙醇后加用保鮮膜覆蓋,A3組(乙醇硅油組)為外搽90%乙醇后涂擦硅油; B1組(DNFB基質(zhì)組)為單純外搽0.5% DNFB,B2組為(DNFB保鮮膜組)為外搽0.5% DNFB后加用保鮮膜覆蓋,B3組(DNFB硅油組)為外搽0.5% DNFB后涂擦硅油; C1組( TPA基質(zhì)組)為單純外搽0.01% TPA ,C2組(TPA保鮮膜組)為外搽0.01% TPA后加用保鮮膜覆蓋,C(3TPA硅油組)為外搽0.01% TPA后涂擦硅油。各組經(jīng)除毛后,第1天及第2天每日僅在B組的腹、背部涂擦1次,每次70微升,自第7天開始,每組均用相應(yīng)的制劑治療,每隔2日一次,每次70微升,加用保鮮膜組在涂相應(yīng)制劑30分鐘后于涂藥區(qū)加蓋保鮮膜,涂擦硅油組在涂相應(yīng)制劑30分鐘后于涂藥區(qū)涂擦硅油,每日2次,造膜期為25天。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,于各組動(dòng)物的腹、背部取小鼠皮膚活檢,分別做普通病理(HE染色)及PCNA的免疫組化染色,在顯微鏡相同放大倍數(shù)下,測量各組表皮的厚度,計(jì)算均值;觀察表皮細(xì)胞PCNA的染色,計(jì)數(shù)表皮PCNA陽性細(xì)胞數(shù),計(jì)算PCNA陽性標(biāo)記率,并計(jì)算均值,分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大體觀察顯示乙醇各組動(dòng)物皮膚無潮紅、增厚;DNFB各組動(dòng)物皮膚輕度潮紅、粗糙、增厚,個(gè)別部位稍有滲出、結(jié)痂,呈亞急性皮炎表現(xiàn);TPA各組動(dòng)物皮膚輕度潮紅、表皮干燥、增厚,呈慢性皮炎表現(xiàn)。 組織病理顯示乙醇各組未見表皮增厚,未見真皮內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤,且各組PCNA陽性細(xì)胞表達(dá)僅限于基底細(xì)胞層;DNFB各組及TPA各組表皮明顯增厚,真皮內(nèi)較多量炎癥細(xì)胞浸潤,DNFB組及TPA組的PCNA陽性細(xì)胞表達(dá)分布于表皮的中下層包括基底細(xì)胞層和棘細(xì)胞層,其表達(dá)數(shù)量及表達(dá)厚度較乙醇各組均明顯增加。DNFB基質(zhì)組、TPA基質(zhì)組分別比較乙醇基質(zhì)組其表皮增生厚度及PCNA陽性標(biāo)記率均在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異,P0.05,亞急性皮炎、慢性皮炎表皮增生模型成功。DNFB保鮮膜組較DNFB基質(zhì)組其表皮增生厚度及PCNA陽性標(biāo)記率在統(tǒng)計(jì)學(xué)上未見顯著性差異(P0.05);DNFB硅油組較DNFB基質(zhì)組其表皮增生厚度及PCNA陽性標(biāo)記率在統(tǒng)計(jì)學(xué)上亦未見顯著性差異(P0.05)。 TPA保鮮膜組較TPA基質(zhì)組其表皮增生厚度及PCNA陽性標(biāo)記率在統(tǒng)計(jì)學(xué)上未見顯著性差異(P0.05);TPA硅油組較TPA基質(zhì)組其表皮增生厚度及PCNA陽性標(biāo)記率在統(tǒng)計(jì)學(xué)上亦未見顯著性差異(P0.05)。 結(jié)論:1.利用0.5%2,4二硝基氟苯(DNFB)及0.01%佛波酯(TPA)反復(fù)涂擦小鼠背部可以復(fù)制亞急性或慢性皮炎的模型。2.增生細(xì)胞核抗原在亞急性皮炎或慢性皮炎的動(dòng)物模型中的表達(dá)明顯增高。3.應(yīng)用非通透性的膜覆蓋及涂擦保濕劑硅油對(duì)亞急性及慢性皮炎小鼠模型的表皮增生沒有明顯的調(diào)節(jié)作用。
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R751
【圖文】：

各組表皮病理圖像（HE染色×400）

各組表皮PCNA的表達(dá)（免疫組化×400）

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本文編號(hào)：2717796