【摘要】： 目的研究HPV感染宮頸組織后蛋白質組表達情況，初步探討高、低�；蛐透腥緦m頸組織后表達的差異，并對差異的蛋白點通過質譜分析其意義。 方法首先采用測序法及l(fā)uminex法對42例臨床HPV感染的標本進行高、低�；蚍中�，分成HPV高危基因型感染宮頸組織的CIN組，低�；蛐透腥緦m頸組織的CA組，每組篩選出3例標本，打成混合池，與正常對照3例標本混合池進行雙向凝膠電泳，比較之間的差異，選取差異大的蛋白點，進行MALDI-TOF質譜分析。 結果 1．對HPV感染陽性的31例女性泌尿生殖道尖銳濕疣和11例宮頸CIN組織標本，通過測序法和luminex法分型的結果為：(1)尖銳濕疣標本(無論長在什么部位)或CINⅠ標本，其HPV感染的基因型均為6、11等低危型，測序表現(xiàn)出的是單一峰型，而宮頸CINⅡ～Ⅲ，其HPV感染的基因型均為16、18、33、58等高危型或高危型的混合感染，測序表現(xiàn)出的是單峰或雜峰；(2)外陰和宮頸同時患有尖銳濕疣的標本，其HPV感染的基因型是一致的。 2．我們將每組篩選的3例標本打成混合池，并對宮頸尖銳濕疣、宮頸CIN及對照宮頸上皮組織蛋白質組圖譜進行兩兩比較，HPV低�；蛐透腥镜膶m頸尖銳濕疣組織標本與正常宮頸組織標本相比有63個蛋白質點有顯著差異，其差異倍數(shù)最大的為20.2939，宮頸尖銳濕疣組表達上調的蛋白點有51個，下調的有12個蛋白點；HPV高�；蛐透腥镜膶m頸CIN組織標本與正常宮頸組織標本相比有47個蛋白質點有顯著差異，，宮頸CIN表達上調的蛋白點有21個，下調的有26個蛋白點，上調倍數(shù)最大的為11.2506倍，下調倍數(shù)最大的為9.00021倍。HPV高�；蛐透腥镜膶m頸CIN組織標本與低�；蛐透腥镜膶m頸尖銳濕疣組織標本相比有39個蛋白質點有顯著差異，宮頸CIN組較宮頸濕疣組表達上調的蛋白點有15個，下調的有24個蛋白點，上調倍數(shù)最大的為4.24857倍，下調倍數(shù)最大的為3.37334倍。 3．我們對3組26個差異蛋白質點進行分析，獲得了22張肽質量指紋圖，軟件識別其有效肽片段峰后查詢數(shù)據(jù)庫，搜索后得到匹配的有18個蛋白質點，并通過查詢NCBInr數(shù)據(jù)庫，獲得初步鑒定的18個蛋白質的功能信息。它們主要與細胞代謝、信號傳導、細胞分泌、細胞骨架構建及細胞增值、分化與凋亡等相關。 結論本實驗采用雙向凝膠電泳技術得到了HPV高、低�；蛐透腥緦m頸組織和正常宮頸上皮組織的蛋白組表達圖譜，并找到兩者之間的差異蛋白點。通過質譜分析及生物信息學技術鑒定了部分差異蛋白，其中一些可能與宮頸腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關。為HPV感染宮頸組織的蛋白質數(shù)據(jù)庫的建立提供了有意義的資料。這些蛋白點能否作為診斷的標記物和治療的靶標，值得進一步研究。
【圖文】：

HPV高�；蛐透腥镜膶m頸CIN組織標本與正常宮頸組織標本差異蛋白質組學圖譜的比較

圖12兩組差異蛋白質組學柱狀圖(部分)4.HPV高�；蛐透腥镜膶m頸CIN組織標本與低�；蛐透腥镜膶m頸尖銳濕慶組織標本的雙向凝膠電泳圖譜的比較(圖13~15)經兩組比較，我們發(fā)現(xiàn)有39個蛋白質點有顯著差異(見表3)，宮頸CIN組較宮頸濕洗組表達上調的蛋白點有巧個，下調的有24個蛋白點，上調倍數(shù)最大的為4.24857倍，下調倍數(shù)最大的為3.37334倍。我們共選了5個蛋白點做質譜分析，其ID號分別是:2119、2112、1907、2128、2022、NZ。表3HPV高�；蛐透腥镜膶m頸CIN組織標本與低�；蛐透腥镜膶m頸CA組織標本蛋白點差異變化GrouPIDMaxe1assAe!assB
【學位授予單位】：中國協(xié)和醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2007
【分類號】：R752.53

【引證文獻】

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1 朱寧;Acidiphilium DX1-1細胞膜蛋白質表達譜構建[D];中南大學;2010年

本文編號：2705028