【摘要】：Wnt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,即由Wnt基因編碼產(chǎn)物所介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,其不僅在胚胎發(fā)育調(diào)控中起至關(guān)重要的作用,而且與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展也密切相關(guān)。Wnt信號通路與人類腫瘤的關(guān)系,是國際前沿的一個(gè)研究熱點(diǎn)。大量實(shí)驗(yàn)證實(shí),在許多人類腫瘤如結(jié)直腸癌及肝癌、肺癌等,Wnt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的APC(adenomatous polyposis coli,結(jié)直腸腺瘤性息肉病基因產(chǎn)物)、β-catenin(β-連環(huán)蛋白)等成分發(fā)生了遺傳改變。這些基因的突變導(dǎo)致了β-catenin在細(xì)胞漿內(nèi)異常積累并移位至細(xì)胞核內(nèi),與LEF-1(lymphoid enhancing factor-1,淋巴樣增強(qiáng)因子)相作用,激發(fā)Wnt信號通路下游靶基因的活化。其中β-catenin是Wnt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的正向調(diào)節(jié)因素,APC是負(fù)向調(diào)節(jié)因素,LEF-1則在激活下游靶基因中發(fā)揮重要作用。本實(shí)驗(yàn)旨在研究Wnt信號通路中這三種重要成分在皮膚良、惡性腫瘤中的表達(dá)及臨床、病理意義,并對其異常表達(dá)與腫瘤發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后的關(guān)系進(jìn)行初步探討。 第一部分 APC、β-catenin、LEF-1在良、惡性黑素細(xì)胞腫瘤及角質(zhì)形成細(xì)胞腫瘤中的表達(dá) 本實(shí)驗(yàn)采用免疫組織化學(xué)和原位雜交的方法,檢測了皮內(nèi)痣、惡性黑素瘤及脂溢性角化病、基底細(xì)胞癌中APC、β-catenin、LEF-1蛋白及LEF-1 mRNA的表達(dá)情況。結(jié)果顯示:
【圖文】：

雙鏈寡核營酸與線性化Pslinec3er.1一Hlneo的重組質(zhì)粒經(jīng)EcoRI和Hindm雙酶切后，電泳顯示為4125Pb及160帥的2個(gè)條帶，證實(shí)雙鏈寡核營酸成功克隆入線性化載體psileneer3.l一HIne。。(圖2一2)閱一一20001000750500250100閱一4125160圖2一2重組質(zhì)粒Pslineec3r.1一HI幾EF一1的雙酶切鑒定結(jié)果Fig.2一2AgroseelertoPhoresisofreeombinedPlasmiddigesteddoublerestrieteden習(xí)nleM:marker;A:PSilencer3.1一Hl/siRNAI:B:Psilencer3.l一HI/siRNAZ。二者經(jīng)EeoRI和HindHI雙酶切后，電泳顯示為4125bp及160bp的2個(gè)條帶。

2.重組質(zhì)粒DNA全長測序?qū)⒚盖需b定后的重組質(zhì)粒送上�；瞪锛夹g(shù)公司，，用F〔40)通用引物測序，結(jié)果完全正確。(圖2一3，圖2一4)將重組質(zhì)粒命名為Psileneer3.1一Hl/siRNAI、Psilencer3.1一HI/siRNAZ。圖2一3psilenee3r.l一HI/siNRAI測序結(jié)果Fig.2一3SequeneeofPsilneeer3.l一HI/siRNAI
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號】：R739.5

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本文編號：2704419