【摘要】：全文分三篇，分別就不同培養(yǎng)條件對(duì)糠秕馬拉色菌蛋白產(chǎn)量和組成的影響、糠秕馬拉色菌相關(guān)皮膚疾病(MFASD)與M．Fuffur相關(guān)的體液免疫研究以及MFASD患者Th1模式／Th2模式免疫狀態(tài)進(jìn)行描述。 第一篇重點(diǎn)闡述不同培養(yǎng)條件對(duì)糠秕馬拉色菌蛋白產(chǎn)量和組成的影響。首次采用L16(4~5)正交設(shè)計(jì)對(duì)糠秕馬拉色菌(P．Ovale)不同的培養(yǎng)條件進(jìn)行設(shè)定，其中包括溫度、培養(yǎng)時(shí)間、脂肪種類、不同吐溫等因素，通過(guò)紫外分光光度法測(cè)定蛋白質(zhì)含量和SDS—PAGE對(duì)蛋白組份進(jìn)行研究，探索在不同培養(yǎng)條件下，對(duì)同一糠秕馬拉色菌胞外提取物(ECE)、胞壁提取物(CWE)、胞漿蛋白(CPE)中的蛋白產(chǎn)量和組成變化的影響，并首次篩選出獲得蛋白產(chǎn)量最高和組成最豐的最適培養(yǎng)條件。我們的研究結(jié)果顯示：糠秕馬拉色菌胞外提取物、胞壁提取物、胞漿提取物中蛋白含量的高低和其中中低分子量蛋白組份的多少與我們?cè)O(shè)定五因素四水平的影響因素密切相關(guān)。糠秕馬拉色菌三種不同提取物蛋白含量最高和中低分子量蛋白組份最多的最適培養(yǎng)條件各不相同，糠秕馬拉色菌胞外提取物、胞壁提取物、胞漿提取物中蛋白含量最高最適培養(yǎng)條件，一般而言，最適培養(yǎng)溫度為30℃，不能缺乏單硬脂酸甘油酯，培養(yǎng)時(shí)間2～7天，以芝麻油和橄欖油為最佳。三種提取物中中低分子量蛋白成份最豐的最適培養(yǎng)條件，以芝麻油最好，最適培養(yǎng)溫度32℃和30℃，最適培養(yǎng)時(shí)間4～7天。通常37℃培養(yǎng)、培養(yǎng)基中加入2％橄欖油培養(yǎng)并非最適培養(yǎng)條件。培養(yǎng)條件的不同與糠秕馬拉色菌相關(guān)免疫學(xué)研究的可重復(fù)性至關(guān)重要。 第二篇重點(diǎn)闡述糠秕馬拉色菌相關(guān)皮膚疾病(MFASD)與M．Furfur相關(guān)的體液免疫研究。采用病例對(duì)照設(shè)計(jì)，以糠秕馬拉色菌整菌、胞外提取物、胞壁提取物、胞漿提取物為抗原，首次在同一條件下用ELISA對(duì)糠秕馬拉色菌相關(guān)皮膚疾病(MFASD)中的花斑癬、糠秕馬拉色菌毛囊炎、脂溢性皮炎、特應(yīng)性皮炎和四型銀屑病血清中的抗M．Furfur IgG、IgM、IgA抗體進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示：正常人血清中存在高滴度抗M．Furfur IgG抗體：花斑癬患者血清中IgG抗體明顯低于正常對(duì)照組，，男性患者則更低；病程一年以上者IgG抗體明顯低于病程少于一年者�？筂．Fuffur IgG抗體可能具有保護(hù)作用，花斑癬的反復(fù)發(fā)病與免疫缺陷有關(guān)�？凤躐R拉色菌毛囊炎(MFf)患者血清中大量抗M．Furfur IgA抗體以及IgG抗體，未發(fā)現(xiàn)患者有免疫缺陷狀況存在。糠秕馬拉色菌毛囊炎(MFf)發(fā)病主要在皮脂分泌
【圖文】：

和方法的情況下，收集了15種不同條件培養(yǎng)獲得的糠批馬拉色菌胞外提取物、胞壁提取物、胞漿提取物，并用紫外檢測(cè)蛋白濃度，經(jīng)冷凍干燥將蛋白濃度調(diào)至sm動(dòng)‘，用SD-sRAGE對(duì)糠批馬拉色菌在不同條件下菌的蛋白組成進(jìn)行分析，結(jié)果見圖1一2~7。根據(jù)糠批馬拉色菌胞外提取物、胞壁提取物、胞漿提取物在SDS一APGE上的條帶數(shù)，可得表1一8。A(試驗(yàn)號(hào)5):25℃培養(yǎng)、4天、橄欖油、吐溫礴o、單硬脂酸甘油酷濃度.35叭B(試驗(yàn)號(hào)9):25℃培養(yǎng)、7天、椰子油、吐溫一80、單硬脂酸甘油酷濃度.25叭C(試驗(yàn)號(hào)13):25℃培養(yǎng)、14天、芝麻油、吐溫一20、單硬脂酸甘油醋濃度3.0叭D(試驗(yàn)號(hào)2):30℃培養(yǎng)、2天、橄欖油、吐溫一。、單硬脂酸甘油酷濃度.25叭E(試驗(yàn)號(hào)6):30℃培養(yǎng)、4天、無(wú)油脂、吐溫·80、單硬脂酸甘油酷濃度.30叭F(試驗(yàn)號(hào)10):30℃培養(yǎng)、7天、芝麻油、吐溫一0、無(wú)單硬脂酸甘油酷濃度G(試驗(yàn)號(hào)14):30℃培養(yǎng)、14天、椰子油、無(wú)吐溫、單硬脂酸甘油酷濃度3.5叭H(試驗(yàn)號(hào)3):32℃培養(yǎng)、2天、椰子油、吐溫一。、單硬脂酸甘油酩濃度.3oLg/I(試驗(yàn)號(hào)7):32℃培養(yǎng)、4天、芝麻油、無(wú)吐溫、單硬脂酸甘油酩濃度.25叭J(試驗(yàn)號(hào)11):32℃培養(yǎng)、7天、無(wú)油脂、吐溫一20、單硬脂酸甘油酷濃度3.5叭K(試驗(yàn)號(hào)15):32℃培養(yǎng)、14天、橄欖油、吐溫一80、無(wú)單硬脂酸甘油酷濃度L(試驗(yàn)號(hào)4):37℃培養(yǎng)、2天、芝麻油、吐溫一80、單硬脂酸甘油酷濃度3.5叭M(試驗(yàn)號(hào)8):37℃培養(yǎng)、4天、椰子油、吐溫一20、無(wú)單硬脂酸甘油酷濃度N(試驗(yàn)號(hào)12):37℃培養(yǎng)、7天、橄欖油、無(wú)吐溫、單硬脂酸甘油酪濃度3.0叭O(試驗(yàn)號(hào)16):37℃培養(yǎng)、14天、無(wú)油脂、吐溫一。、單硬脂酸甘油酷濃度.25叭M.業(yè)er:為中低分量標(biāo)準(zhǔn)蛋白圖1一2~7中蛋白條帶的分子量計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)蛋白分子量的對(duì)數(shù)與蛋白多肚在SDS一APGE中的相對(duì)遷移率呈直線負(fù)相關(guān)

.4kD圖1一4糠批馬拉色菌15種胞壁提取物(CWE)在12.5%SDS一PAGE上的帶型表現(xiàn)(A~D，考馬斯亮藍(lán)染色JKLMN0Marker9.74kD66.2kD43kD3IkD20.IkD14.4kD圖l一5糠批馬拉色菌15種胞壁提取物(C刃E)在12.5%SDS一APGE上的帶型表現(xiàn)(J~o)，考馬斯亮藍(lán)染色
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2000
【分類號(hào)】：R756

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2689450