解脲支原體U.Parvum基因分型和分子流行病學研究
發(fā)布時間:2020-05-25 04:36
【摘要】: 支原體屬柔體膜綱微生物,1954年,Shepard首先于非淋菌性尿道炎病人的尿道中分離得到,并對其寄生形態(tài)作了描述,1974年被確定為—獨立的屬。解脲支原體是支原體屬中最小的一種,沒有細胞壁,于光鏡下不易觀察到,因其能夠分解尿素而得名。正常男性其泌尿生殖道解脲支原體菌群的寄生率約為25%,女性其泌尿生殖道菌群的寄生率約為0~80%,其中又以解脲支原體第一生物群(U.parvum)更為常見。關于致病性的報道所見尚少,目前臨床已確定解脲支原體可以導致大約15%的男性非特異性尿道炎,在男性不育中可能起著不可忽視的作用。近年來被普遍關注的不良妊娠結局也與解脲支原體有關。隨著性傳播疾病的認識,人們也了解到泌尿生殖道解脲支原體感染與性活動傳播有關。 病人感染解脲支原體后,臨床表現(xiàn)多種多樣:部分患者病程長,癥狀明顯;部分病人病程較短、癥狀不明顯或者僅為隱性攜帶;部分患者病原體僅處于下生殖道,而有的感染則上行引起盆腔附件炎癥;部分孕期患者導致嚴重的不良妊娠結果,而有的 則沒有影響。一些學者推測,這些不同的臨床過程可能與不同的 U.U.型別有關。目前的血清學分型方法將U.U.分為14個血清型, 但這些型別與臨床疾病過程的關系并不確定,血清學分型方法有 諸多缺陷限制了其臨床應用,F(xiàn)在較多的研究以解膝支原體的 PCR基因分型技術為基礎,國內尤以限制性片段長度多態(tài)性分析 (PCR一RFLP)為常用130],但后者仍存在操作復雜、儀器要求較高、 結果判定困難等因素,限制了臨床廣泛應用。因而發(fā)展一簡便、 經濟、易于臨床應用的基因分型方法就很迫切。 我們的研究根據(jù)Kon咖nrong等關于解睬支原體U.p~m、 U.urealvticum兩個種以及u.p~m三個型的劃分的研究結果[32], 針對MBa抗原基因5/末端設計型特異性引物,建立復合PCR基 因分型方法,對解睬支原體U.p~m分型。本實驗標本來自STD 門診診斷為NGU的病人,經過培養(yǎng)分離出解眼支原體,再提取模 版DNA,參考Teng等的反應條件,應用u.u.通用引物PcR劃分兩 個種,檢出U.P~陽性標本,后采用各型特異性引物,參考 Kongfanrong等的反應條件進行復合PCR基因分型,擴增產物經 渙乙錠(0 .5林留ml)染色后,1.5%瓊脂糖凝膠電泳分離,,在紫外線燈下 觀察結果。 結果提示:應用U.U.通用引物進行PCR,1、3/14、6、8 2000級碩士研究生論文 型標準株均得擴增,8型擴增出448bp的條帶,其余三型擴增出 403bP的條帶,與理論推測及其它文獻結果報道一致。應用型特異 引物擴增U.parvuml、3/14、6型,分別得到398、369、442bp的 條帶,與理論推測及其它文獻結果報道一致。經過對衣原體、白 念等下泌尿生殖道其他微生物的PCR擴增,未發(fā)現(xiàn)陽性條帶。全 部61例U.U.標本均得到陽性擴增結果,除1例為U.urealyticum 外,其余均為U.p~,占98.36%;擴增率100%。進一步分型 結果顯示,3/14型占86.67%、l型占5 .00%、6型占1 .67%、1和 3/14混合型占6.67%。在60例陽性標本中,16例NGU癥狀明顯 的病人中,U.p~m各型分布具有統(tǒng)計學上的顯著性差異,結果 以1型、混合型、3/14型為最多,以前二型的癥狀較為明顯,而 3/14型以隱性攜帶較多見。因之推測1型、或者1和3/14型混合 型協(xié)同作用導致NGU。在不同社會層次內U.p~各型構成亦 有統(tǒng)計學上的顯著性差異,各型分布均以中層為最多。而U. p~各型與年齡、性別、非婚性接觸、病程、伴發(fā)不同STD等 方面均無統(tǒng)計學上的差異。 本文建立了解眼支原體U.P理n八lm的基因分型方法,并用于 臨床標本的分型。較之以往,該方法敏感、特異而又簡便、經濟、 易于臨床推廣應用。通過小樣本臨床分型研究提示1型、1和3/14 2000級碩士研究生論文 混合型與NGU有關,而3/14型更傾向于正常寄生。這也為解腺 支原體感染的防治和深入研究莫定了基礎。
【學位授予單位】:天津醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2002
【分類號】:R759
本文編號:2679580
【學位授予單位】:天津醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2002
【分類號】:R759
【引證文獻】
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1 周運恒;曹廣亞;劉風華;;解脲脲原體感染與精液質量關系的研究進展[J];生殖與避孕;2011年09期
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