【摘要】： 干擾素是一類具有廣泛生物學活性的細胞因子，具有顯著免疫調(diào)節(jié)作用和抗腫瘤、抗病毒效應，目前已有50多個國家正式批準其臨床應用。如同其它細胞因子一樣，全身應用IFN-α進行腫瘤免疫治療常常會帶來嚴重的副作用，故其臨床應用受到一定限制。為了克服上述缺點,我們開展了IFN-α基因治療的研究，首先是將IFN-α基因轉(zhuǎn)移入腫瘤細胞，，使其致瘤性明顯降低，以達到腫瘤細胞靶向的基因治療效果；其次是將IFN-α基因轉(zhuǎn)移入載體細胞中，使其分泌IFN-α，然后將載體細胞回植體內(nèi)，使體內(nèi)持續(xù)存在一定水平的IFN-α，以達到副作用小、療效佳的目的。對于體表腫瘤如皮膚黑色素瘤、鱗狀細胞癌的治療，傳統(tǒng)的方法仍然是手術治療加術后放療或化療。但是，黑色素瘤是一種比較常見、死亡率高而目前各種治療方法并不理想的惡性腫瘤，且發(fā)生在頭面部的體表腫瘤常常因為手術導致面容的損毀而使患者不易接受；同時，體表腫瘤形態(tài)學上的直觀性，使其易于早期發(fā)現(xiàn)及早期治療，這是應用基因治療的有利條件。 利用脂質(zhì)體介導，將人IFN-α基因轉(zhuǎn)染入人黑色素瘤細胞(M21)并篩選到高分泌IFN-α的細胞克隆株M21-IFN-α~+，該細胞克隆株能夠在體外長期分泌IFN-α，表明人IFN-α基因已穩(wěn)定地整合到M21細胞染色體上并有效表達。經(jīng)IFN-α基因轉(zhuǎn)移的M21黑色素瘤細胞株在形態(tài)、生長能力及克隆形成能力等體外生物學特性方面 WP=5 與對照組無明顯差異。將M21-IFN-α~+體外擴增后接種于裸鼠皮下，觀察到腫瘤生長緩慢、裸鼠存活期延長，表明高分泌IFN-α的M21細胞克隆株在裸鼠體內(nèi)致瘤性明顯降低。該實驗結(jié)果表明，經(jīng)IFN-α基因修飾的黑色素瘤細胞自身抗原性的增強及分泌的細胞因子能夠有效地激發(fā)局部甚至全身的抗腫瘤免疫應答，抑制其體內(nèi)生長，延長荷瘤裸鼠的存活期并能避免全身應用細胞因子的毒副作用，為進一步開展腫瘤細胞靶向的IFN-α基因治療的研究打下了基礎。 為了完整系統(tǒng)地研究α型干擾素基因療法抗體表腫瘤的效果，我們以人IFN-α基因為治療性目的基因，選擇了易于擴增，易于轉(zhuǎn)染并能穩(wěn)定表達外源目的基因的成纖維細胞為載體細胞，建立了IFN-α基因療法治療人黑色素瘤的實驗模型并探討其免疫學機理。將人IFN-α基因體外轉(zhuǎn)染成纖維細胞NIH3T3中，并獲得一株高分泌IFN-α的細胞克隆株NIH3T3-IFN-α~+。將該高分泌IFN-α的細胞克隆株在體外大量擴增后回植裸鼠腹腔內(nèi)，12小時后裸鼠血清中即能測到IFN-α活性并能維持較長時間。可見經(jīng)成纖維細胞途徑能成功地將人IFN-α基因?qū)塍w內(nèi)并有效表達，同時對荷黑色素瘤裸鼠的腫瘤生長有明顯的抑制作用，經(jīng)該途徑治療后荷瘤裸鼠的存活期也相應延長。鑒于國外學者已成功地將IFN-α應用治療黑色素瘤、腎癌等實體瘤并取得較好的治療效果，我們進一步設計了人IFN-α基因療法與手術切除聯(lián)合應用治療黑色素瘤2例，結(jié)果表明該治療方法可取得較佳的臨床療效。
【學位授予單位】：第二軍醫(yī)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2002
【分類號】：R739.5

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 王字玲,鄧健蓓,韓驊,陳萍,藥立波,蘇成芝;抗人黑色素瘤單鏈抗體基因的克隆和分泌型表達[J];中國生物化學與分子生物學報;1999年01期

2 張勁風,賀曉慧,韓素文,洪美玲,王秉儀,陳廣祥,趙先碧,李慶;人黑色素瘤細胞系p16基因第二外顯子序列分析[J];臨床軍醫(yī)雜志;1998年01期

3 王字玲,鄧健蓓,韓驊,陳梅紅,蘇成芝;黑色素瘤特異性單克隆抗體HB8760可變區(qū)基因的克隆和序列測定[J];第四軍醫(yī)大學學報;1997年03期

4 Akslen L.A.;Angelini S.;Straume O. ;李翠華;;BRAF和NRAS突變好發(fā)于結(jié)節(jié)性黑色素瘤但與腫瘤細胞增殖或患者存活率無關[J];世界核心醫(yī)學期刊文摘(皮膚病學分冊);2006年03期

5 陳敏亮,林子豪!200003,趙耀中!200003,朱曉海!200003,袁湘斌!200003,楊松林!200003,吳建明!200003,曹雪濤,章衛(wèi)平,王全興;α-干擾素基因療法治療人黑色素瘤的免疫學機理的實驗研究[J];中華整形外科雜志;2001年05期

6 李東,謝遵江,賀業(yè)春,劉穎,劉麗;在黑色素瘤組織中免疫細胞的形態(tài)學觀察[J];解剖科學進展;2004年04期

7 于楠;王金柱;張玉玖;毛玉泉;張景權;譚郁彬;;原發(fā)性食管黑色素瘤的臨床和病理探討——附1例報告及文獻復習[J];天津醫(yī)藥;1986年11期

8 李忠,王榮朝;小腸、口腔及肺多灶性無色素性黑色素瘤1例[J];江蘇大學學報(醫(yī)學版);1994年02期

9 汪九湘，劉文格;黑色素瘤與多發(fā)性骨髓瘤并存一例[J];河南腫瘤學雜志;1996年06期

10 楊維春,李世芳;脈絡膜黑色素瘤術后9年單發(fā)肝臟轉(zhuǎn)移病例報告[J];華北煤炭醫(yī)學院學報;1999年03期

相關會議論文 前10條

1 吳緬;;MicroRNA調(diào)控黑色素瘤發(fā)生機制(英文)[A];第三屆細胞結(jié)構(gòu)與功能的信號基礎研討會論文摘要[C];2010年

2 黎川;;黑色素瘤的MRI診斷[A];2010中華醫(yī)學會影像技術分會第十八次全國學術大會論文集[C];2010年

3 許宇;趙培泉;朱穎;;視盤上的黑色素細胞瘤抑或是黑色素瘤[A];中國眼底病論壇·全國眼底病專題學術研討會論文匯編[C];2008年

4 王國華;;惡性黑色素瘤胃轉(zhuǎn)移的X線表現(xiàn)(附5例分析)[A];全國非血管性與血管性介入新技術學術研討大會（第二屆介入放射學新技術提高班、第二屆河南省腫瘤介入診療學術大會）論文匯編[C];2004年

5 賈蘭青;羅利群;張友會;;轉(zhuǎn)導B_7-1基因消除IFN-γ對黑色素瘤轉(zhuǎn)移潛力的增強作用[A];面向21世紀的科技進步與社會經(jīng)濟發(fā)展（下冊）[C];1999年

6 胡巍;張超;方蕓;;霧化吸入羥基喜樹堿對小鼠黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移的藥效學及體外作用機制研究[A];2010年江蘇省藥學大會暨第十屆江蘇省藥師周大會論文集[C];2010年

7 王寅;林文;殷明;姜恅英;陳新生;;5—脂氧合酶對黑色素瘤A375粘附及整合素表達的作用[A];海峽兩岸三地藥理學學術報告會論文匯編[C];2001年

8 徐輝;唐桂波;;黑色素瘤腦轉(zhuǎn)移的MRI表現(xiàn)[A];中華醫(yī)學會第十三屆全國放射學大會論文匯編（上冊）[C];2006年

9 胡巍;張超;方蕓;;霧化吸入羥基喜樹堿對小鼠黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移的藥效學及體外作用機制研究[A];2010施慧達杯第十屆全國青年藥學工作者最新科研成果交流會論文集[C];2010年

10 安菊生;吳令英;李寧;俞高志;劉麗影;;原發(fā)女性生殖道黑色素瘤42例臨床分析[A];中華醫(yī)學會第九次全國婦科腫瘤學術會議論文匯編[C];2006年

相關重要報紙文章 前10條

1 王倫 劉晨;探索黑色素瘤治療新技術[N];保健時報;2009年

2 健康時報特約記者 管九蘋;澳大利亞免費普查黑色素瘤[N];健康時報;2010年

3 實習生 易立;黑色素瘤,是否無藥可治？[N];科技日報;2011年

4 本報記者 聶國春;專家：黑色素瘤可防可治[N];中國消費者報;2011年

5 記者 張e

本文編號：2636229