【摘要】： 第一部分正常皮膚的CLSM檢測及生理學(xué)評價 目的:對正常人群皮膚的生理狀態(tài)相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行測定和評價。方法:運(yùn)用在體共聚焦激光掃描顯微鏡與組織病理切片相對照,分辨皮膚的各層結(jié)構(gòu);并對100例正常人的前額、面頰、背部、前臂屈側(cè)和伸側(cè)進(jìn)行表皮各層和真皮淺層的成像,包括角質(zhì)層、顆粒層、棘層、基底層及真皮乳頭層,分別測量各層的厚度、細(xì)胞直徑、密度等指標(biāo),并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果:CLSM圖像與組織病理切片可對照辨認(rèn)出各層細(xì)胞及結(jié)構(gòu);角質(zhì)層在深色皮膚的個體及曝光部位較明亮,面部的皮溝和皮紋較明顯;非曝光部位顆粒層角質(zhì)形成細(xì)胞直徑明顯大于曝光部位;曝光部位的真皮乳頭排列較隨意,數(shù)量較多,形狀不規(guī)則;而非曝光部位的皮膚真皮乳頭比較平整,數(shù)量較少,形狀為規(guī)則的橢圓形。表皮各層細(xì)胞厚度測定顯示:角質(zhì)層為1.6～11.1 um(均值為7.065±1.14);顆粒層為3.2～14.3 um(均值為8.32±1.36);棘層為10.4～29.3um(均值為19.32±2.86);表皮最小厚度為30.6～48.8um(均值為34.7±2.13),在前臂屈側(cè)最薄(p＜0.05)。顆粒層的細(xì)胞直徑為20.7～39.6um(均值30.62±4.33):棘細(xì)胞層的直徑為14.4～24.7um(均值20.19±2.22);基底層角質(zhì)形成細(xì)胞的直徑為7～10.1 um(均值9.44±0.96)。結(jié)論:正常人表皮各層厚度和細(xì)胞大小因部位而有所不同,曝光部位的角質(zhì)層較厚;顆粒層細(xì)胞最大,而且非曝光部位各層的細(xì)胞直徑大于曝光部位,表明曝光部位可能受外界影響較大。通過初步測定正常漢族人表皮的形態(tài)學(xué)指標(biāo),為進(jìn)一步的疾病檢測奠定了基礎(chǔ)。 第二部分CLSM在色素異常性疾病觀察和診斷中的應(yīng)用 目的:對正常人生理狀態(tài)下表皮內(nèi)黑素分布的相關(guān)測定指標(biāo)進(jìn)行測定,并對CLSM在白癜風(fēng)、無色素痣的鑒別診斷和黃褐斑的隨訪中的應(yīng)用進(jìn)行評價。方法:將在體共聚焦激光掃描顯微鏡圖像與組織病理切片相對照,并對100例正常人的前額、面頰、背部、前臂屈側(cè)和伸側(cè)進(jìn)行基底層角質(zhì)形成細(xì)胞黑素帽的直徑、密度、亮度進(jìn)行測量。對臨床Nd∶YAG激光治療隨訪的黃褐斑患者進(jìn)行隨訪檢測,分析其相應(yīng)的組織學(xué)特征;對臨床確診的白癜風(fēng)和無色素痣患者的圖像進(jìn)行分析,歸納相應(yīng)的診斷指標(biāo),并在盲態(tài)下評價該指標(biāo)診斷的有效性。結(jié)果:通過上述研究,我們發(fā)現(xiàn)正常皮膚中在基底層角質(zhì)形成細(xì)胞中可檢測到“黑素帽”結(jié)構(gòu),而黑素細(xì)胞不易發(fā)現(xiàn)。黃褐斑患者皮損癥狀的臨床評分與CLSM評分具有良好的一致性;在Nd∶YAG激光治療隨訪過程中皮損改善程度的臨床評分和CLSM評分亦高度相關(guān)。治療后半小時基底層角質(zhì)形成細(xì)胞的黑素帽結(jié)構(gòu)崩解,隨后黑素顆粒隨表皮代謝由下而上逐漸排出;黃褐斑患者治療結(jié)束后,基底層樹枝狀黑素細(xì)胞大量出現(xiàn)。黑素分布的主要范圍(A,Area),黑素亮度(B,Brightness)是否＞3,皮損區(qū)與周圍分界是否清晰(C,Clearance)以及黑素密度(D,Density)是否≤30%可作為白癜風(fēng)與無色素痣的鑒別診斷的主要標(biāo)準(zhǔn),其敏感性和特異性分別可達(dá)80%～92.5%和58.06%～81.7%,其中黑素密度(D,Density)是否≤30%的特異性和敏感性平衡較好;指標(biāo)兩兩結(jié)合可顯著提高鑒別診斷的特異性。結(jié)論:CLSM圖像可作為黃褐斑患者癥狀評價的可靠指標(biāo)之一;治療后黃褐斑患者基底層樹枝狀黑素細(xì)胞的存在可能是復(fù)發(fā)的基礎(chǔ);上述ABCD4個指標(biāo)可作為白癜風(fēng)與無色素痣鑒別診斷的重要依據(jù)。 第三部分CLSM用于基底細(xì)胞癌和日光性角化病的診斷 目的:對CLSM在基底細(xì)胞癌和日光性角化中的診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行初步設(shè)定,并評價其診斷的有效性。方法:對經(jīng)組織病理學(xué)確診的基底細(xì)胞癌和日光性角化的圖像分別進(jìn)行分析,歸納各自相應(yīng)的特異性診斷指標(biāo),并在盲態(tài)下采用回顧性分析方法分別對所有圖像進(jìn)行判讀,評價CLSM圖像診斷的特異性和敏感性。同時對基底細(xì)胞癌患者臨床診斷的準(zhǔn)確率與CLSM診斷的準(zhǔn)確率相對照。結(jié)果:基底細(xì)胞癌的診斷指標(biāo)設(shè)為1)拉長的單一形態(tài)的基底細(xì)胞核;2)極性細(xì)胞核同一軸向分布;3)炎細(xì)胞浸潤;4)真皮血管增多;5)表皮角質(zhì)形成細(xì)胞多形性。其中同一軸向的極性核的敏感性(90.9%)和特異性(97.4%)都較高;隨著CLSM診斷標(biāo)準(zhǔn)的兩兩疊加,診斷的敏感性和特異性均有一定程度的提高,其中以拉長的單一形態(tài)的細(xì)胞核和同一軸向分布相結(jié)合的敏感性和特異性平衡最好,分別為90.9%和97.4%。隨著符合診斷的標(biāo)準(zhǔn)數(shù)目的增加,基底細(xì)胞癌診斷的特異性逐漸增加,5個標(biāo)準(zhǔn)均符合的特異性最高,為100%。臨床高度懷疑BCC診斷的為29例其中病理確診的為18例,診斷率為62.1%;CLSM圖像可顯著提高診斷的準(zhǔn)確性(93.1%)。日光性角化病的診斷指標(biāo)設(shè)為角化過度;角質(zhì)形成細(xì)胞不典型增生;真皮淺層炎癥細(xì)胞浸潤;血管增多增粗;光化性彈力纖維變性;其中角質(zhì)形成細(xì)胞不典型增生的敏感性(97.1%)和特異性(83.3%)較高,可作為主要的診斷指標(biāo)。 結(jié)論:CLSM對基底細(xì)胞癌和日光性角化病的診斷指標(biāo)具有較高的敏感性和特異性,可顯著提高臨床診斷的準(zhǔn)確率,因此可作為有效可靠的診斷手段用于二者的早期篩查、診斷和治療隨訪觀察。
【圖文】：

VivasCope1500系統(tǒng)

復(fù)旦大學(xué)博士研究生論文)中各層的形態(tài)學(xué)特征，，并進(jìn)一步進(jìn)行定性和定像結(jié)果按照水平面方向沿矢狀面對正常皮膚進(jìn)方向在XY軸平面進(jìn)行平切)，如圖ZA、B所示。面HE組織病理學(xué)圖片，通過細(xì)胞所在的層次，深CLSM圖像中相應(yīng)各層的特征。
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R751;R730.4

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 呂岳華;光動力治療鮮紅斑痣前后激光共聚焦顯微鏡的觀察分析[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

本文編號：2615985