【摘要】： 前言 皮膚是機體的重要免疫器官，具有多種免疫功能，構成機體抵制外界微生物侵犯的重要一線屏障。近年來越來越多的研究發(fā)現(xiàn)表皮朗格漢斯細胞(LC)及樹突狀表皮T細胞(DETC)與皮膚免疫系統(tǒng)(SIS)密切相關。而許多現(xiàn)象證明毛囊在SIS中占重要地位。以往很多文獻報道了毛囊相關免疫系統(tǒng)包括黑素細胞、角朊細胞、神經(jīng)因子、細胞因子等影響毛囊生長周期，進而影響SIS。我們也曾報道了MHC-Ⅱ及和Thy-1抗原在毛囊周期中的表達及作用。那么LC及DETC在SIS中的作用是否與毛囊周期具有相關性呢?本研究通過動態(tài)觀察C57BL/6小鼠拔毛誘導的毛囊周期中毛囊間表皮LC及DETC數(shù)量和形態(tài)的變化，進一步探討免疫細胞與毛囊周期及SIS的關系和作用。 材料和方法 1．動物：C57BL/6純系小鼠15只，6-8周齡，體重15-20克。選擇皮色粉紅(毛發(fā)處于休止期)的小鼠。 2．試劑：所用單克隆抗體分別為：OX3、OX4及JIJ、22．1。ABC試劑盒(含生物素化馬抗鼠IgG)。 3．方法：小鼠分3組，每組5只(3雌2雄)，將松香/蠟1：1混合，涂于小鼠背部以拔毛，隔天取皮膚標本，應用ABC法進行免疫組化染色。 4．觀察指標：(1)每天觀察小鼠皮色變化。(2)光鏡下觀察拔毛前、后不同時間內(nèi)小鼠表皮免疫細胞的染色情況。 結果 1．小鼠皮色變化：拔毛后第1-4天內(nèi)，小鼠皮膚呈粉紅色；第5-6天鼠皮變黑色；第9-11天局部可見新毛長出；至17-19天鼠皮變灰色；第20天左右鼠皮恢復到原先的粉紅色。 2.表皮LC及DETC變化。 (l)密度變化:拔毛后第2天開始二者密度較拔毛前升高(P0.05)，，拔 毛后第4一8天二者在表皮中密度最高(P0.01)，以后有所下降，直至第 16天，但仍較拔毛前升高(P0.05);拔毛后第17一20天，表皮毛囊間LC 及DETC密度基本恢復到拔毛前數(shù)值，二者之間的差異無統(tǒng)計學意義(P 0 .05)。 (2)形態(tài)變化:拔毛前、后3天內(nèi)，多數(shù)LC及DETC胞體小、圓形，樹突短 小，1一2個;第4一8天，二者多數(shù)細胞體大，圓或不規(guī)則形，樹突粗大，約3 一5個，有的有分枝或次級突起;第9一16天，胞體大小不一，樹突變細，2- 4個;17一20天，多數(shù)胞體較小甚至消失，樹突纖細，長短不一，約2一3個。 討論 小鼠毛發(fā)周期分為退行期、休止期及生長期。在對拔毛誘導C57 BU6 小鼠毛發(fā)生長周期中，以往文獻已報道了毛囊的顯著形態(tài)學變化，即拔毛后 第2一4天內(nèi)，毛囊上皮細胞處于增生分裂狀態(tài)，第5天達生長高峰，出現(xiàn)黑 色素及新生毛發(fā)，鼠皮呈黑色(生長期);以后是增生平穩(wěn)狀態(tài)，至17一19 天出現(xiàn)退化改變，黑素生成減少，鼠皮呈灰色(退行期)，直到第20天則停 止生長，鼠皮亦恢復到原先的粉紅色(休止期)�？筛鶕�(jù)皮膚顏色變化判斷 毛囊周期的變化。以上這些拔毛誘導的鼠毛發(fā)生長周期中毛囊的形態(tài)學變 化與自然狀態(tài)下的鼠毛發(fā)生長周期中毛囊的形態(tài)學變化基本一致。 表皮LC是骨髓來源的樹突狀細胞，主要位于毛囊及基底細胞之上的 表皮層內(nèi)，在常規(guī)HE染色的石蠟切片中為透明細胞而很難辨認，用氯化金 及ATP酶等特殊染色可以表現(xiàn)為樹突狀細胞。LC是表皮細胞中唯一具有 補體C3及Fc一IgG受體以及Ia抗原的細胞，因此可用免疫組化方法將其 顯示。許多與免疫有關的皮膚病有LC改變，特別是在遲發(fā)超敏反應 (DTH)及覃樣肉芽腫(MF)的發(fā)病機理中占重要地位，同時LC與皮膚移植 物排斥有關。人表皮內(nèi)此細胞約有460一1000個/~2，真皮內(nèi)也偶可見 到。LC具有遷移吞噬能力，能攝取、處理、攜帶并遞呈抗原到局部淋巴 結，激活淋巴細胞。但LC密度在毛囊周期中如何變化目前尚報道，此研究 有利于進一步探討免疫細胞與毛囊周期及515的關系和作用。 DETC是一種存在于小鼠表皮內(nèi)的表達，盯細胞受體(TCR)的T細 胞，此細胞具有Thy一1(CD90)、CD3及CD45，呈樹突狀外觀�，F(xiàn)已證實 Thy一1+的DETC均勻分布于小鼠毛囊間表皮內(nèi)，缺乏循環(huán)T細胞具有的 apTCR、CD4或CDS，它可以被IL一2及Con一A激活而具有輔助T細胞 作用，并能分泌IL一2及，一IFN。DETC是一種重要的表皮免疫細胞。半 抗原化表皮細胞富含DETC時可使動物耐受。目前認為DETC是一個重要 的表皮免疫效應細胞，DETC在不同品系小鼠及不同部位存在明顯差異，這 些均表明DETC與515關系密切。 本實驗選用C57 BU6小鼠建立‘毛囊周期。自動發(fā)育的毛囊周期同步 性差，拔毛可快速刺激表皮增生及毛發(fā)生長。本研究通過拔毛誘導小鼠毛 囊進人生長期、退行期直至休止期的變化，動態(tài)觀察了此三階段變化過程中 毛囊間表皮LC及DETC的密度及形態(tài)變化。結果顯示毛囊間表皮LC及 DETC于拔毛后第2天開始密度值升高，第4一8天出現(xiàn)最高值，以后逐漸下 降，第17一20天密度逐漸恢復到拔毛前數(shù)值，，且二者形態(tài)也有相應變化。 表明毛囊間表皮內(nèi)LC及DETC于毛囊生長期密度最高，樹突多且有的有分 枝;退行期下降，至休止期穩(wěn)定，樹突也變少。 拔毛破壞毛囊完整性的同時，必然對皮膚產(chǎn)生一定影響。表皮中LC 及DETC的動態(tài)變化可能是作為一種抵御外界有害刺激的因素之一。引起 此變化的機理還不清楚，我們考慮主要有兩點:
【學位授予單位】：中國醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2004
【分類號】：R751

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本文編號：2606454