尺寸均一的多功能納米粒在惡性黑素瘤成像和治療中的應(yīng)用
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【摘要】:目的:通過手動過膜擠壓乳化法制備尺寸均一的多功能聚乳酸納米粒子(PTX-PLA-QDs-MNPs),并研究了人黑素瘤A875細(xì)胞對納米粒子的吞噬行為、納米粒子對細(xì)胞的毒性及其在MRI成像中的應(yīng)用。 方法::1、應(yīng)用手動過膜擠壓乳化法制備粒徑均一、可調(diào)的生物降解多功能納米粒子PTX-PLA-QDs-MNPs,用掃描電鏡(SEM)和透射電鏡(TEM)對粒子進(jìn)行形貌表征,用動態(tài)光散射(DLS)對粒徑及其分布進(jìn)行表征,用TEM和凝膠色譜(HPLC)對其包封率(EE%)和載藥量(DL%)進(jìn)行檢測,用HPLC和透析法研究藥物體外釋放行為。2、用熒光顯微鏡檢測不同時間段A875細(xì)胞系攝入納米粒的情況,,用CCK-8試劑盒進(jìn)行細(xì)胞毒性分析,用磁共振檢測儀進(jìn)行納米粒和其在細(xì)胞MRI的成像研究。該方法同樣適用于聚己內(nèi)酯(PCL)和聚乳酸-乙醇酸(PLGA)多功能納米粒子的制備。 結(jié)果:1、通過過膜擠壓乳化這種簡便易行的方法,可以獲得尺寸均一、粒徑分布窄、具有很好生物相容性的多能功能聚合物納米粒;2、熒光顯微鏡觀察細(xì)胞吞噬研究表明,與對照組(空白對照PBS和對照PLA-NPs)相比,PTX-PLA-QDs-MNPs在細(xì)胞培養(yǎng)10min后細(xì)胞質(zhì)中就可以看到微弱的紅色熒光,表明納米粒子已進(jìn)入胞質(zhì)內(nèi),6h后則可以看到細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核中有非常強(qiáng)烈的熒光;3、與裸藥PTX及納米粒子PTX-PLA-QDs相比,PTX-PLA-QDs-MNPs具有更明顯的細(xì)胞毒性,而PTX-PLA-QDs比裸藥PTX具有更顯著的細(xì)胞毒性;4、隨著鐵元素(Fe)濃度的升高,樣品的MRI成像及細(xì)胞吞噬MRI成像呈現(xiàn)明顯的信號強(qiáng)度逐漸減弱。采用PCL和PLGA制備得到的多功能納米粒子具有類似的實驗結(jié)果。 結(jié)論:通過該簡便方法獲得的載有PTX的納米粒子具有多功能性,在載藥、生物成像、腫瘤治療(例如惡性黑素瘤MM的治療)方面有較大的應(yīng)用前景。
【關(guān)鍵詞】:過膜擠壓乳化 惡性黑素瘤 聚酯納米粒 多功能納米粒 載藥
【學(xué)位授予單位】:華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R739.5
【目錄】:
- 縮略詞及中英文對照6-8
- 中文摘要8-9
- Abstract9-10
- 前言10-13
- 第一部分 尺寸均一的多功能聚酯納米粒的制備13-21
- 1 材料和方法13-16
- 1.1 材料13
- 1.2 儀器設(shè)備13-14
- 1.3 實驗步驟14-16
- 1.3.1 聚酯納米粒子的制備14-15
- 1.3.2 納米粒子的表征15
- 1.3.3 納米粒子中PTX含量的測定15-16
- 2 實驗結(jié)果16-20
- 2.1 過膜乳化法制備PLA納米粒子16-17
- 2.2 調(diào)控納米粒子粒徑及其分布17-18
- 2.3 多功能PLA納米粒子18-19
- 2.4 納米粒子EE%和DL%的測定19-20
- 3 小結(jié)20-21
- 第二部分 多功能聚酯納米粒在黑素瘤細(xì)胞成像和治療中的應(yīng)用21-31
- 1 材料和方法21-27
- 1.1 細(xì)胞株來源及培養(yǎng)21
- 1.2 儀器設(shè)備21
- 1.3 相關(guān)材料與試劑21-22
- 1.4 實驗方法22-26
- 1.4.1 細(xì)胞培養(yǎng)22-23
- 1.4.2 細(xì)胞攝入納米粒23-24
- 1.4.3 體外毒性實驗24-25
- 1.4.4 樣品MRI25
- 1.4.5 細(xì)胞MRI25-26
- 1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析26-27
- 2 實驗結(jié)果27-30
- 2.1 細(xì)胞攝入多功能納米粒27-28
- 2.2 體外毒性實驗28-29
- 2.3 體外MRI29-30
- 3 小結(jié)30-31
- 討論31-34
- 參考文獻(xiàn)34-40
- 綜述40-53
- 參考文獻(xiàn)48-53
- 碩士期間發(fā)表的論文53-54
- 致謝54-55
【共引文獻(xiàn)】
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2 董s
本文編號:259327
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