【摘要】：目的:1、兩種色素脫失模型方法的建立和比較,為進一步研究提供最佳模型。2、從神經(jīng)、免疫、內(nèi)分泌三方面探討應(yīng)激對色素脫失模型小鼠皮膚黑色素合成影響的生理機制,為色素脫失性皮膚病預(yù)防、治療及其新藥開發(fā)提供新思路和更可靠的實驗依據(jù)。 方法:1、分別采用過氧化氫和氫醌兩種脫色法建立色素脫失動物模型并對兩種方法進行比較。2、采用C57BL/6J雄鼠,隨機分為空白對照組(Ctrl組)、氫醌組(HQ組)、氫醌+束縛應(yīng)激組(HQ+RS組)、氫醌+干擾素組(HQ+IFN組)、氫醌+氫化可的松組(HQ+GC組),應(yīng)用氫醌進行色素脫失,并在此基礎(chǔ)上分別對HQ+RS組進行束縛應(yīng)激,對HQ+IFN組注射α-2a重組人干擾素,對HQ+GC組注射和氫化可的松。實驗結(jié)束后,常規(guī)固定海馬并制作HE染色切片,鏡下觀察CA3區(qū)組織變化;固定皮膚組織并制作HE染色切片,鏡下觀察皮膚組織結(jié)構(gòu)變化,并對毛囊進行計數(shù);對胸腺、脾臟稱重并計算胸腺、脾臟指數(shù);采用ELISA試劑盒檢測血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)及促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)含量。 結(jié)果:1、過氧化氫造模,小鼠皮膚損害嚴(yán)重,但毛發(fā)生長未受明顯抑制;而采用氫醌造模,小鼠幾乎無肉眼可見的皮膚損害,但皮膚毛囊生長受到明顯抑制。這說明氫醌建立色素脫失模型更好。2、(1)HQ+RS組、HQ+IFN組、HQ+GC組小鼠體重、曠場實驗行為學(xué)評估均不同程度低于Ctrl組和HQ組,提示束縛應(yīng)激、注射α-2a重組人干擾素和氫化可的松可成功模擬應(yīng)激反應(yīng);(2)同Ctrl組和HQ組相比,HQ+RS組、HQ+IFN組、HQ+GC組小鼠海馬CA3區(qū)出現(xiàn)神經(jīng)細(xì)胞排列不整齊、數(shù)量減少和結(jié)構(gòu)改變;(3)HQ組、HQ+RS組、HQ+IFN組小鼠血清IgG顯著高于Ctrl組(P0.05),而HQ+GC組顯著低于Ctrl組;HQ組、HQ+RS組、HQ+IFN組、HQ+GC組小鼠血清IgM含量均顯著高于Ctrl組(P0.05);HQ+RS組、HQ+GC組和HQ+IFN組均小鼠胸腺指數(shù)低于HQ組和Ctrl組(P0.05);HQ+RS組、HQ+GC組小鼠脾臟指數(shù)低于HQ組和Ctrl組,而HQ+IFN組高于HQ組和Ctrl組(P0.05);(4)HQ+RS組、HQ+IFN組、HQ+GC組小鼠血清ACTH含量均顯著高于Ctrl組和HQ組(P0.05);(5)同Ctrl組相比,HQ組、HQ+RS組、HQ+IFN組、HQ+GC組小鼠皮膚總毛囊數(shù)目和生長期毛囊數(shù)目顯著減少(P0.05);同HQ組相比,HQ+RS組、HQ+IFN組、HQ+GC組小鼠皮膚總毛囊數(shù)目有不同程度的減少。 結(jié)論:1、氫醌能更好地從抑制色素合成方面阻斷黑色素的產(chǎn)生,從而建立色素脫失模型。2、束縛應(yīng)激、α-2a IFN的注射和氫化可的松注射,能較好地從心理、免疫、內(nèi)分泌學(xué)角度模擬機體應(yīng)激反應(yīng)。3、束縛應(yīng)激通過機體神經(jīng)、免疫、內(nèi)分泌三大系統(tǒng)的改變對皮膚黑色素的合成產(chǎn)生影響。4、通過注射α-2a IFN增加免疫因子后,機體神經(jīng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)發(fā)生改變,進而對皮膚黑色素合成產(chǎn)生影響。5、通過注射氫化可的松增加機體糖皮質(zhì)激素后能夠更顯著的對皮膚黑色素合成產(chǎn)生抑制作用,而這種影響重要是通過改變機體的神經(jīng)與免疫來發(fā)揮作用的。
【圖文】：

表 1 應(yīng)激相關(guān)性皮膚疾病 相關(guān)性病、斑禿、特應(yīng)性皮炎 已確定疹、單純皰疹、白癜風(fēng) 有指征但未被證實苔癬、尋常天皰瘡、痤瘡 弱度講，皮膚與神經(jīng)系統(tǒng)共同起源于胚胎外胚層[24]，且神經(jīng)遞質(zhì)和受體，這決定了心理與皮膚有內(nèi)在的器質(zhì)膚病之間的生理及病理聯(lián)系，有人提出“腦-皮膚軸”（激與皮膚病之間的關(guān)系。

7 2 不同處理天數(shù)的不同濃度 H2O2處理組與 Ctrl 組小鼠皮膚肉眼觀察比 2 所示，造模時間越長，組間差異越明顯。同 Ctrl 組相比，越高，，小鼠皮膚變化越明顯。造模第 2d，各組間小鼠膚色差色，提示小鼠毛發(fā)生長處于靜止期階段；第 9d，同 Ctrl 組相鼠皮膚顏色無明顯差別，但 H2O2處理部位皮膚毛發(fā)出現(xiàn)了不褐色，各組小鼠皮膚破損。第 21d，Ctrl 組小鼠皮膚局部出現(xiàn)，余部位皮膚呈粉紅色；1%H2O2組小鼠皮膚顏色呈白色，2%
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R758.4

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2572980