【摘要】：背景銀屑病是以表皮細胞過度增殖、角化不全等表皮動力學(xué)紊亂為特征的慢性炎癥性皮膚病，確切病因尚不清楚。目前認為，可能是感染、創(chuàng)傷、藥物、遺傳因素等內(nèi)外因素相互作用，通過免疫介導(dǎo)的自身免疫性疾病，主要表現(xiàn)特征為角質(zhì)形成細胞過度增生,炎癥細胞浸潤和新生血管形成。 調(diào)節(jié)性T細胞（T regulatory,Treg）是體內(nèi)存在的以調(diào)節(jié)自身T細胞為主要功能的T細胞亞群，是機體以主動方式來維持自身穩(wěn)定的重要途徑，是發(fā)揮免疫抑制效應(yīng)的T細胞。目前研究表明，銀屑病患者的外周血及皮損中CD4+CD25+Treg細胞的數(shù)量減少，F(xiàn)oxp3的表達降低，均將導(dǎo)致Teff細胞中Th1和Th17的異�；罨驮鲋常l(fā)或加重銀屑病的反應(yīng)過程。 銀屑病皮損中顯著的真皮微血管擴張?zhí)崾玖宋⒀芤蛩乜赡苁菃鱼y屑病病理變化的關(guān)鍵之一，血管內(nèi)皮細胞生長因子（VEGF，vascular endothelial growthfactor）是重要的促進血管生成因子之一。 我國在中藥治療銀屑病方面積累了大量有效方劑，但是“中藥療效是安慰劑效應(yīng)”的偏見在西醫(yī)領(lǐng)域仍存在。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中臨床研究方法的深入發(fā)展，采用臨床流行病學(xué)的設(shè)計、測量與評價的方法，使中醫(yī)的臨床研究有了長足的進步，臨床研究中對照、隨機和雙盲原則逐漸被用于中醫(yī)藥的研究中。 涼血活血復(fù)方是我科在前人的研究基礎(chǔ)上通過拆方分析和動物實驗反復(fù)篩試得到的具有涼血、活血、清熱、養(yǎng)血、祛風(fēng)功能的中藥復(fù)方，用于治療進展期銀屑病。前期課題組已經(jīng)對該復(fù)方治療銀屑病進行了相關(guān)的臨床研究，但缺少循證醫(yī)學(xué)的客觀評價。 目的：①通過研究CD4+CD25+Foxp3+Treg細胞在進行期銀屑病患者外周血CD4+Treg細胞中的比例及其Foxp3表達水平，，探討Treg細胞在銀屑病發(fā)病中的作用及其臨床意義。②科學(xué)地評價涼血活血復(fù)方治療進展期銀屑病的療效與安全性。③探討涼血活血復(fù)方治療進展期銀屑病的可能作用靶點，以明確其作用機制，促進中藥的臨床應(yīng)用和開發(fā)。 方法：（1）Treg細胞在進行期銀屑病的差異表達：采用流式細胞術(shù)檢測20例進行期斑塊型銀屑病患者、28例急性點滴型銀屑病患者以及20例健康對照者外周血CD4+CD25+Foxp3+/CD4+Treg細胞的比例及反應(yīng)Foxp3表達水平的平均熒光強度（MFI）。（2）涼血活血復(fù)方的療效及安全性分析：應(yīng)用隨機、雙盲、安慰劑對照的實驗設(shè)計，觀察中藥涼血活血復(fù)方治療進展期銀屑病的臨床療效及安全性，共入組62例，涼血活血復(fù)方治療組35例，安慰劑對照組27例，療程8周，治療后通過比較銀屑病皮損面積和嚴重程度指數(shù)(PASI)評分、醫(yī)生對病情的整體評分(PGA)、皮膚病生活質(zhì)量指數(shù)(DLQI)、患者就l0cm目視模擬標尺對病情的整體評分(VAS)和生活質(zhì)量SF-36等指標，評定其療效，記錄不良反應(yīng)發(fā)生率。（3）涼血活血復(fù)方的作用機制探討：應(yīng)用涼血活血復(fù)方治療進展期銀屑病患者28例，用藥8周后，應(yīng)用流式細胞術(shù)，檢測其治療前后的外周血Treg細胞的比例及其Foxp3的表達水平，并與20例正常人對照相比較，評價與PASI評分的相關(guān)性；酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法，檢測治療前后患者血清中血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）含量的，同時對靶皮損進行治療前后PSI評分及皮膚鏡比對，進行相關(guān)性分析。 結(jié)果：①進行期銀屑病患者外周血Treg細胞的比例和Foxp3表達水平均明顯低于健康對照者（P＜0.05），急性點滴型低于進行期斑塊型。②進行期銀屑病患者外周血Treg細胞的比例和Foxp3表達降低水平與PASI評分無相關(guān)性。③涼血活血復(fù)方治療進展期銀屑病8周時有效率57.6%，明顯高于安慰劑對照組的24.0%（P0.05）。④治療組的PASI評分、PGA、DLQI、VAS以及SF-36均較對照組有明顯改善（P均＜0.05）。⑤涼血活血復(fù)方的不良反應(yīng)率17.14%，主要為稀便和大便次數(shù)增多，未見其余毒副作用。⑥涼血活血復(fù)方治療8周后，外周血Treg細胞的比例（1.58±0.87）及Foxp3表達水平（27.94±16.34）均明顯上調(diào)，分別為2.60±0.88和32.52±14.27（P0.05）。⑦進展期銀屑病患者外周血血清VEGF的含量為80.40±10.75pg/mL，涼血活血復(fù)方治療8周后，VEGF的含量明顯下降，為57.68±10.22pg/mL（P0.05），皮損處微血管密度減少。⑧進展期銀屑病患者治療前血清VEGF的含量與PASI評分呈弱相關(guān)（n=28，r=0.383，P=0.0450.05），而與皮損PSI評分明顯正相關(guān)（n=28，r=0.932，P=0.000＜0.05）。 結(jié)論①急性點滴型和進行期斑塊型銀屑病患者外周血Treg細胞水平及Foxp3表達水平低下，與PASI評分無相關(guān)性，提示Treg細胞在銀屑病進展中起重要作用。②本文首次應(yīng)用隨機、雙盲、安慰劑對照的方法研究了中藥涼血活血復(fù)方治療進展期銀屑病的臨床療效及安全性，探索出用于中藥湯劑臨床療效評價的科學(xué)方法，涼血活血復(fù)方治療進展期銀屑病療效確切，不良反應(yīng)少，安全性好。③涼血活血復(fù)方治療進展期銀屑病后，上調(diào)Treg細胞及其表達，降低血清VEGF的含量，可能通過免疫調(diào)節(jié)及抗血管生成等多靶點作用而起效。
【圖文】：

-1斑塊型銀屑病患者CD4+CD25+Foxp3+/CD4+Treg細胞的比例為2.08%

-2點滴型銀屑病患者CD4+CD25+Foxp3+/CD4+Treg細胞的比例為1.19%
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R285;R758.63

【參考文獻】

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本文編號：2551286