【摘要】：皮膚上出現(xiàn)色素沉著或色斑極大影響面容,且大部分屬于后天性色素沉著。常見的有黃褐斑、雀斑、日曬斑、老年斑、外傷后色素沉著、手術后色素沉著等。其中黃褐斑發(fā)病率高、發(fā)病機理復雜、治療效果不佳、復發(fā)率高,成為皮膚美容領域研究的熱點和難點。 引起色素沉著的原因很多,亦十分復雜。凡影響色素沉著過程中任何一個環(huán)節(jié)都可能導致色素沉著,該過程包括：①黑素細胞內(nèi)黑素小體的裝配與黑素合成；②黑素小體由核周向樹突遠端轉(zhuǎn)移；③黑素小體傳遞至鄰近角質(zhì)形成細胞；④黑素小體在角質(zhì)形成細胞內(nèi)再分布、降解。大致可分為遺傳因素、物理性因素(如紫外線、日光曝曬等)、化學性因素(如重金屬砷、鉍、銀、汞等物質(zhì)刺激)、內(nèi)分泌因素(妊娠、垂體、甲狀腺、腎上腺、性腺功能紊亂等致黃體酮、雌激素水平變化)、炎癥性因素和代謝性因素等幾大類。 雌激素是主要由卵泡和黃體產(chǎn)生的甾體類激素,主要作用是促進生殖系統(tǒng)的發(fā)育,刺激女性第二性征的出現(xiàn),影響代謝機能。既往研究已表明雌激素與乳腺疾病、生殖系統(tǒng)疾病、心腦血管、骨關節(jié)疾病均有密切的關系。 臨床上我們發(fā)現(xiàn),妊娠、口服避孕藥、慢性疾病、化妝品都可能導致皮膚色素沉著,典型表現(xiàn)如黃褐斑。婦女懷孕后,體內(nèi)激素水平會發(fā)生變化,如血液中雌激素、孕激素或促黑色素細胞激素水平增高,可能促使黑色素細胞活性增加,黑色素增多。沉著的色素常常于妊娠早、中期間出現(xiàn),并逐漸加重至足月。而且有些患者在分娩后,其黃褐斑會持續(xù)存在。長期口服避孕藥的婦女,由于體內(nèi)激素水平的變化,也會和妊娠一樣會誘發(fā)黃褐斑。一般癥狀從服藥后1-20個月開始,停藥后可逐漸消退。某些慢性疾病如肝臟病、慢性酒精中毒、結核、內(nèi)臟腫瘤、甲狀腺疾病及一些自身免疫性疾病等,特別是女性生殖器官疾病和月經(jīng)不調(diào)、痛經(jīng)、子宮附件炎、不孕癥等患者面部也常常出現(xiàn)黃褐斑。這可能與卵巢、腦垂體、甲狀腺等內(nèi)分泌失調(diào)、激素水平紊亂有關。以上幾種發(fā)病誘因中都可能有雌激素的作用,但雌激素與色素沉著疾病之間的關系研究甚少。 研究目的： 1、研究黃褐斑皮膚的組織學改變及角蛋白10(CK10)的表達情況。研究黃褐斑的色素分布特點及其與正常皮膚的差異。 2、研究女性黃褐斑患者病損部位的色素特點和血清雌激素水平的變化。探討黃褐斑患者病損部位和正常皮膚雌激素受體p(ERβ)的分布情況,了解雌激素p在黃褐斑發(fā)病中的作用。進行人色素斑皮膚的黑色素細胞體外培養(yǎng),觀察培養(yǎng)的黑色素細胞的形態(tài)與生長特性。觀察不同濃度外源性雌激素(已烯雌酚)對體外培養(yǎng)面部皮膚黑色素細胞的增殖的影響。觀察雌激素對培養(yǎng)的面部黑色素細胞的酪氨酸酶活性及色素合成的影響。 3、研究應用計算機色素分析軟件評估面部色素性疾病及其治療效果。探討黃褐斑的綜合治療方法,提高黃褐斑的治療效果。研究黃褐斑患者病損部位激光治療前后色素分布特點,了解激光治療后黃褐斑色素的代謝變化。 研究方法： 1、取黃褐斑患者眼袋術后外眥多余皮膚,行石蠟切片的HE染色、Fontana-Masson染色和CK10的免疫組化染色,觀察此處皮膚的病理學改變和CK10的分布情況。應用黃褐斑患者行外切口眼袋整形手術切取的外眥部色斑皮膚和周圍正常皮膚分別行HE和Fontana-Masson染色,觀察黃褐斑病損部和周圍非病損皮膚的色素分布情況。 2、采用安琪兒軟件對25例黃褐斑患者的病損部位色素水平進行分析,并利用放免法測定血清雌二醇等性激素水平。應用免疫組化法觀察黃褐斑患者色素病損部和正常皮膚的雌激素受體p的表達分布情況,并分析其表達強度與色素的嚴重程度的相關性。獲取黃褐斑患者眼袋術后皮膚標本,0.25%中性蛋白酶消化獲取表皮,0.25%胰酶+0.02%EDTA消化獲取細胞懸液,加入M254/HMGS條件培養(yǎng)基,進行黑色素細胞純化培養(yǎng),應用倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài),采用多巴染色和S-100蛋白免疫組化染色進行鑒定。進行面部皮膚黑色素細胞的原代及傳代培養(yǎng),將第3代黑色素細胞接種于96孔板,每孔5×103個細胞,24h后換液,加入含1×10-～1×10-8M不同濃度已烯雌酚的培養(yǎng)基,孵育72h后MTT法測定黑素細胞增殖情況。獲取眼袋術后皮膚標本,進行黑色素細胞純化培養(yǎng)并鑒定。將第二代細胞傳代接種,24小時后換液,加入含雌激素的黑色素細胞培養(yǎng)基,48小時后分別進行酪氨酸酶活性和色素合成的檢測,72小時后消化收集細胞通過透射電鏡檢測超微結構的變化。 3、治療前及復診時采集患者色素性疾病區(qū)域的數(shù)碼照片,輸入計算機,應用色素分析軟件系統(tǒng)測量患者皮膚色素性疾病的皮損面積、紅、綠、藍色的灰度值、平均灰度值、最大及最小灰度；對600例黃褐斑患者采用外用藥物治療、輸液治療、口服藥物治療及激光、光子等綜合措施治療。采用色素分析軟件對治療效果進行評估；選取伴下瞼皮膚輕度松弛的黃褐斑志愿者,采用半面對照研究,一側面部先行激光治療3次。最后1次激光治療后1周～1月行外路法雙側眼袋整復術,兩側色斑皮膚分別行HE和Fontana-Masson染色,觀察黃褐斑患者病損部色素顆粒的分布變化情況。 結果： 1、黃褐斑皮損處表皮變薄,基底層細胞周圍可見明顯色素顆粒,基底上層、毛囊上段、真皮層也有色素顆粒分布,真皮膠原紊亂、斷裂,皮膚附屬器數(shù)量較少。CK10主要分布在表皮的基底上層和皮脂腺細胞的胞漿和腺泡的外層。黃褐斑病損處色素主要分布在表皮基底層和釘狀突,成傘狀或者帽樣包繞在細胞核周圍,在毛囊上段、基底上層及真皮層也有色素分布,與非病損皮膚相比,基底層、基底上層色素均有明顯增多。非病損皮膚色素較少,角質(zhì)層增厚。 2、黃褐斑皮損多為黃褐色,平均灰度值為122.84±20.59,患者體內(nèi)雌二醇(E2)、孕酮(P)、黃體生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)水平與無色斑組相比均明顯升高,而睪酮(T)、泌乳素(PRL)與無色斑組相比無顯著差異。ERβ在色素斑處表皮層、毛囊外根鞘的細胞核強表達,表皮從基底層向上表達逐漸減弱,在汗腺、皮脂腺、真皮成纖維細胞、血管內(nèi)皮細胞也有表達。在表皮層中的表達強度與色素的嚴重程度正相關。成功培養(yǎng)了人色素斑皮膚的黑色素細胞,細胞呈雙極或者多級樹突樣,多巴染色和S-100蛋白免疫組化染色結果陽性。在10-8～10-6M濃度范圍內(nèi)己烯雌酚對體外培養(yǎng)黑色素細胞增殖有促進作用,作用強度與藥物濃度呈正相關,10-5M以上己烯雌酚則對黑色素細胞的生長產(chǎn)生抑制或者毒性作用。加入10-6M雌激素后黑色素細胞色素合成和酪氨酸酶活性明顯增加,經(jīng)統(tǒng)計學檢驗P0.05。超微結構顯示細胞中黑素小體數(shù)量和成熟度增加。 3、采用計算機色素分析軟件系統(tǒng),可以測量色素性疾病皮損的面積和平均灰度,面積減少、平均灰度值增加說明治療有效。經(jīng)過綜合治療,144例患者(占24%)色斑顏色基本消退,168例患者(占28%)色斑有明顯改善,204例患者(占34%)色斑有一定改善,總有效率達86%。黃褐斑病損經(jīng)激光治療后色素顆粒分散變小,向基底上層遷移,脫落的角質(zhì)層也含有色素顆粒,真皮層色素顆粒也明顯增加。 結論： 1、黃褐斑病損皮膚各層黑色素含量增多,皮膚組織結構多有老化表現(xiàn)。CK10在基底上層表達增強,其表達增強可能與表皮細胞過度分化、皮膚老化有關。黃褐斑患者色素主要分布在表皮基底層和釘狀突,表皮全層色素顆粒增加,以基底層增加最為明顯。 2、雌激素水平的變化可能在黃褐斑的發(fā)病中具有重要作用。雌激素受體β存在于皮膚及大多數(shù)附屬器,可能在皮膚老化及皮膚色素沉積的過程中發(fā)揮重要作用。采用黑色素細胞條件培養(yǎng)基可以成功培養(yǎng)人色素斑皮膚的黑色素細胞,可以用作進一步的體外研究。一定濃度的己烯雌酚能促進黑色素細胞的增殖,最佳濃度為10-6M。雌激素對黃褐斑的發(fā)病可能具有促進作用。一定濃度的雌激素可以提高酪氨酸酶的活性,促進黑色素細胞合成色素。 3、計算機色素分析軟件系統(tǒng)可以對色素性疾病的皮損的治療效果做出比較客觀和科學的評估。根據(jù)黃褐斑患者的不同情況,選擇不同治療方法,經(jīng)過綜合治療可以取得滿意療效。激光治療可以加速黃褐斑色素顆粒的代謝。
【圖文】：

melasmalesions.AsmallnumberofmelanindistributedinthellPPerseetionofthehairfollieles， theuPPerstratumofthebasementandthedermis·圖3一3一4激光治療后基底層色素顆粒分散變小，向基底上層遷移，脫落的角質(zhì)層也含有色素顆粒，真皮層色素顆粒也明顯增加。(Fontana一Masson‘400)Fig3一3一 4ThePigmentgranulesseatteredandbeeamesmallerafterlasertreatment，， someofwhich migratetotheuPPerstratum.SomeofPigmentgranulesloeatedinthecutiele.ThePlgment granulesindermisalsoinereasedsignificantly·

第三章黃揭斑的綜合治療評價圖3一3一3色素主要分布在表皮基底層和釘狀突，在毛囊上段、基底上層及真皮層也有少量色素分布。(Fontana一Massonx400)Fig3一3一 3Themelaninmainlydistributedinthebasallayerandthenail一 likeProtrusioninthe melasmalesions.AsmallnumberofmelanindistributedinthellPPerseetionofthehairfollieles， theuPPerstratumofthebasementandthedermis·圖3一3一4激光治療后基底層色素顆粒分散變小，向基底上層遷移，脫落的角質(zhì)層也含有色素顆粒，真皮層色素顆粒也明顯增加。(Fontana一Masson‘400)Fig3一3一 4ThePigmentgranulesseatteredandbeeamesmallerafterlasertreatment， someofwhich migratetotheuPPerstratum.SomeofPigmentgranulesloeatedinthecutiele.ThePlgment granulesindermisalsoi
【學位授予單位】：南方醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R758.42

【引證文獻】

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1 湯楠;吳艷華;李其林;李慧;;黃褐斑病因及發(fā)病機制研究現(xiàn)狀[J];皮膚性病診療學雜志;2013年04期

2 蔡莉;;窄譜中波紫外線治療前后照射區(qū)淺表角質(zhì)層細胞中黑素顆粒的變化研究[J];河北醫(yī)學;2014年01期

本文編號：2542538