【摘要】：目的建立基于TpN17基因檢測血液中梅毒螺旋體的熒光定量PCR方法。方法根據(jù)梅毒螺旋體TpN17基因保守區(qū)域設計引物,構建質粒標準品pTpN17,優(yōu)化定量PCR反應體系檢測該體系的靈敏度和特異性;同時,采用該方法對梅毒確證陽性的血液樣本進行檢測。結果研究表明,基于TpN17基因的SYBR GREEN熒光定量PCR方法可以有效檢測血液中106~101copies/μL的梅毒螺旋體并通過熔解曲線判定結果的特異性。結論以TpN17基因為擴增目的基因的SYBR GREEN熒光定量PCR方法具有靈敏快速便宜的特點,適用于在血液檢測梅毒螺旋體,能廣泛應用于獻血及血液樣本檢測等領域,提高我國的血液安全。
[Abstract]:Objective to establish a fluorescence quantitative PCR method based on TpN17 gene for detection of Treponema pallidum in blood. Methods primers were designed according to the conserved region of TpN17 gene of Treponema pallidum, and the sensitivity and specificity of the system were determined by constructing the plasmid standard pTpN17, to optimize the quantitative PCR reaction system. At the same time, the method was used to detect syphilis positive blood samples. The results showed that SYBR GREEN quantitative PCR method based on TpN17 gene could effectively detect 106~101copies/ 渭 L Treponema pallidum in blood and determine the specificity of the result by melting curve. Conclusion the method of SYBR GREEN fluorescence quantitative PCR with TpN17 gene as the amplification target gene is sensitive, rapid and cheap. It is suitable for the detection of Treponema pallidum in blood, and can be widely used in blood donation and blood sample detection. Improve blood safety in our country.
【作者單位】： 瀘州醫(yī)學院形態(tài)實驗室;瀘州醫(yī)學院生物醫(yī)學工程系;重慶市北碚區(qū)中醫(yī)院重癥醫(yī)學科;
【分類號】：R446.11;R759.1

【參考文獻】

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