【摘要】：目的檢測(cè)皮膚鱗癌及正常皮膚組織中抑癌基因P14ARF、E-cad啟動(dòng)子區(qū)甲基化情況，并與原癌基因c-jun、c-fos甲基化情況作比較分析這些基因在腫瘤發(fā)生過(guò)程中的協(xié)同作用。 方法利用甲基化特異性PCR（MSP）檢測(cè)30例皮膚鱗癌患者P14ARF、E-cad基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化情況，并與20例正常人皮膚組織中P14ARF、E-cad基因甲基化情況作比較，分析在鱗癌患者和正常人之間P14ARF和E-cad基因的甲基化狀態(tài)的區(qū)別。 結(jié)果（1）皮膚鱗癌組織中，P14ARF和E-cad基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化發(fā)生率分別為60%和36.7%明顯高于正常組織5.0%和10%（P0.05）。（2）皮膚鱗癌組織中，c-fos和c-jun基因啟動(dòng)子區(qū)的去甲基化程度分別為73.3%、83.3%顯著高于正常組織（30%）、（5%）（P0.05）。 結(jié)論皮膚鱗癌的發(fā)生可能與抑癌基因P14ARF和E-cad啟動(dòng)子區(qū)高甲基化進(jìn)而導(dǎo)致基因失活有密切的關(guān)系；原癌基因c-jun和c-fos啟動(dòng)子區(qū)的低甲基化與鱗癌的發(fā)生也有一定的聯(lián)系。抑癌基因高甲基化與原癌基因低甲基化可能聯(lián)合起來(lái)共同導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路在經(jīng)過(guò)了半個(gè)多世紀(jì)的研究后，人們認(rèn)識(shí)到基因突變和表觀遺傳的因素綜合起來(lái)才能導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。通過(guò)在分子水平上對(duì)腫瘤組織和對(duì)應(yīng)的正常組織相比較，可以發(fā)現(xiàn)DNA甲基化狀態(tài)的變化與其他基因的變化是普遍存在的現(xiàn)象。事實(shí)上，在幾乎所有腫瘤中都能找到相關(guān)基因的異常甲基化狀態(tài)。由此可知DNA甲基化的改變?cè)谀[瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中扮演著非常重要的角色。 DNA甲基化（DNA methylation）是比較常見的表觀遺傳學(xué)現(xiàn)象，它是指在DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNMTs）的作用下，將甲基直接添加到DNA分子中的堿基上。常見的DNA甲基化發(fā)生在DNA雙鏈上的胞嘧啶的第5位碳原子上，通過(guò)共價(jià)鍵結(jié)合后形成5甲基胞嘧啶（5mC）。在結(jié)構(gòu)基因的5’端存在著以成簇串聯(lián)的形式排列的CpG二聯(lián)核苷酸，甲基化經(jīng)常發(fā)生在這些CpG二聯(lián)核苷序列上。甲基化的結(jié)果導(dǎo)致基因表達(dá)的沉默。腫瘤組織中普遍存在的低甲基化和局部的高甲基化現(xiàn)象，其分子機(jī)制還不是十分清楚，但可以明確的是DNA甲基化異常與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有著十分重要的聯(lián)系。 皮膚鱗癌是常見的皮膚腫瘤，該病的病因目前尚不完全清楚。DNA甲基化理論為鱗癌的研究帶來(lái)了更加寬廣的領(lǐng)域，及全新的視角。我們通過(guò)對(duì)相關(guān)的抑癌基因P14ARF、E-cad及原癌基因c-fos、c-jun啟動(dòng)子和外顯子區(qū)的甲基化研究，發(fā)現(xiàn)抑癌基因高甲基化導(dǎo)致基因的沉默和原癌基因的低甲基化導(dǎo)致的基因活化，在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著聯(lián)合作用。因此，為了明確哪些原癌及抑癌基因在鱗癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起著關(guān)鍵的作用，以及擬建一種高效微創(chuàng)的皮膚鱗癌診斷方法，我們通過(guò)甲基化特異性PCR（MSP）對(duì)與鱗癌相關(guān)的4種基因p14ARF、E-cad、c-jun和c-fos進(jìn)行了全面的甲基化狀態(tài)檢測(cè)，以便明確皮膚鱗癌p14ARF、E-cad、c-jun和c-fos基因啟動(dòng)子及外顯子的甲基化是否可以成為皮膚鱗癌的特異性甲基化片段標(biāo)志物，為腫瘤的早期診斷、判斷預(yù)后和治療思路提供堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。 對(duì)來(lái)源于臨床的30例皮膚鱗癌患者的癌組織和20例正常人的皮膚組織進(jìn)行了原癌基因和抑癌基因啟動(dòng)子區(qū)的DNA甲基化分析。通過(guò)甲基化特異性PCR（MSP）實(shí)驗(yàn)，對(duì)抑癌基因P14ARF、E-cad和原癌基因c-fos、c-jun啟動(dòng)子區(qū)的甲基化狀態(tài)進(jìn)行定性檢測(cè)。 本論文共分成三部分，第一部分是論文的第1章，設(shè)立正常對(duì)照組織與皮膚鱗癌進(jìn)行比對(duì)，通過(guò)MSP檢測(cè)抑癌基因P14ARF，E-cad啟動(dòng)序列高甲基化狀態(tài)，以及對(duì)皮膚鱗癌發(fā)生的影響。第二部分是論文的第2章，設(shè)立正常組織對(duì)照與皮膚鱗癌進(jìn)行比較，通過(guò)MSP法檢測(cè)原癌基因c-jun和c-fos啟動(dòng)子及外顯子區(qū)低甲基化與鱗癌發(fā)生的聯(lián)系。論文的第3部分是一篇綜述，即抑癌基因與原癌基因甲基化異常對(duì)腫瘤發(fā)生發(fā)展的影響，，及臨床應(yīng)用價(jià)值。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R739.5

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2275286