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表皮細(xì)胞培養(yǎng)上清中ET-1和SCF含量的檢測

發(fā)布時間:2018-10-15 11:53
【摘要】:目的觀察表皮細(xì)胞在3種培養(yǎng)基中的生長情況,檢測不同時間點培養(yǎng)基中內(nèi)皮素-1(ET-1)和干細(xì)胞因子(SCF)的水平。方法采用3種培養(yǎng)基培養(yǎng)表皮細(xì)胞,分別在培養(yǎng)24h,48h,72h,96h時收集培養(yǎng)上清,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)方法檢測ET-1和SCF水平,同時比較不同培養(yǎng)基中細(xì)胞的生長狀態(tài)。結(jié)果三組培養(yǎng)上清中,培養(yǎng)基2(M2)中上清ET-1的含量最高;隨著時間延長ET-1含量均增加,三組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均0.01);三組培養(yǎng)上清中SCF含量在第24~48h顯著下降,三者之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均0.01)。換液后ET-1和SCF變化趨勢基本同換液前(P均0.01)。M2中細(xì)胞增殖最快,角質(zhì)形成細(xì)胞呈集落樣生長,黑素細(xì)胞的樹突較多。培養(yǎng)基1(M1)中貼壁細(xì)胞數(shù)目少,死亡細(xì)胞多,細(xì)胞增殖緩慢,角質(zhì)形成細(xì)胞散在,黑素細(xì)胞多是雙極。培養(yǎng)基3(M3)細(xì)胞生長情況介于M1和M2兩組之間。結(jié)論培養(yǎng)基中的高水平ET-1有利于表皮細(xì)胞的貼壁、增殖和分化。在培養(yǎng)過程中表皮細(xì)胞能夠分泌ET-1,并釋放進(jìn)入培養(yǎng)上清,表皮細(xì)胞培養(yǎng)消耗SCF,但無明顯分泌作用。
[Abstract]:Objective to observe the growth of epidermal cells in three media and to detect the levels of endothelin-1 (ET-1) and stem cell factor (SCF) at different time points. Methods Epidermal cells were cultured in three kinds of culture medium. The supernatants were collected at 24 h, 48 h, 72 h and 96 h, respectively. The levels of ET-1 and SCF were detected by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and the growth status of the cells in different media was compared. Results the content of ET-1 in culture supernatant of culture medium 2 (M2) was the highest in the three groups, and the content of ET-1 increased with time (P0.01), and the content of SCF in the supernatant of culture medium 2 (M2) decreased significantly at 48h after 24 h of culture, and the content of SCF in the supernatant of culture medium 2 (M2) increased with the increase of time (P0.01). The differences among the three groups were statistically significant (P 0.01). The changes of ET-1 and SCF were basically the same before the change of solution (P0.01). The proliferation of M2 cells was the fastest, keratinocytes grew like colony, and melanocytes had more dendrites. In culture medium 1 (M1), the number of adherent cells was small, the number of dead cells was more, the proliferation of cells was slow, the keratinocytes were scattered, and the melanocytes were mostly bipolar. The cell growth of medium 3 (M 3) was between M 1 and M 2 groups. Conclusion the high level of ET-1 in culture medium is beneficial to the adhesion, proliferation and differentiation of epidermal cells. Epidermal cells can secrete ET-1, and release into the supernatant of culture. Epidermal cell culture consumes SCF, but has no effect on secretion.
【作者單位】: 蘇州大學(xué)附屬第三醫(yī)院皮膚性病科;蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院皮膚性病科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(81171516)
【分類號】:R751

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本文編號:2272469

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