【摘要】：目的：探討人乳頭瘤病毒感染巨噬細(xì)胞的途徑。 方法：1.從尖銳濕疣組織（CA）中提取的微顆粒和從健康人外周血中分離的巨噬細(xì)胞共培養(yǎng)，收集培養(yǎng)后的巨噬細(xì)胞并提取上清液中的微顆粒，上清液中提取的微顆粒再與新分離的巨噬細(xì)胞共培養(yǎng)，如此進(jìn)行四次共培養(yǎng)，通過(guò)RT-PCR的方法檢測(cè)每次共培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞基因組中是否存在HPV-DNA；2.免疫細(xì)胞化學(xué)方法觀察：與微顆粒共培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞是否被染成棕黃色；3.電鏡觀察：與微顆粒共培養(yǎng)后的巨噬細(xì)胞其核內(nèi)是否含有HPV病毒顆粒；4.雙光子熒光顯微鏡觀察：與微顆粒共培養(yǎng)后，，巨噬細(xì)胞可否吞噬尖銳濕疣組織來(lái)源的微顆粒及微顆粒中是否含有HPV病毒顆粒，巨噬細(xì)胞吞噬微顆粒后是否與溶酶體結(jié)合。 結(jié)果：1. RT-PCR方法檢測(cè)結(jié)果：每次（共四次）巨噬細(xì)胞與微顆粒共培養(yǎng)后，其基因組中HPV6/11-DNA表達(dá)均為陽(yáng)性。2.免疫細(xì)胞化學(xué)方法觀察：與微顆粒共培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞中HPV染色呈棕黃色陽(yáng)性反應(yīng)。3.電子顯微鏡觀察：與微顆粒共培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞其核中存在HPV病毒顆粒。4.雙光子熒光顯微鏡觀察：經(jīng)熒光染色后，綠色的巨噬細(xì)胞中含有紅色的微顆粒，紅色的微顆粒中則含有綠色熒光染色的HPV；巨噬細(xì)胞中紅色溶酶體與綠色微顆粒未見(jiàn)結(jié)合。 結(jié)論：1. HPV可通過(guò)微顆粒的方式感染巨噬細(xì)胞。2.巨噬細(xì)胞感染HPV后還能產(chǎn)生并釋放新的含HPV的微顆粒。
[Abstract]:Objective: to explore the pathway of human papillomavirus (HPV) infection in macrophages. Method 1: 1. The microparticles extracted from (CA) of condyloma acuminatum tissue and macrophages isolated from the peripheral blood of healthy people were co-cultured, the cultured macrophages were collected and the microparticles in the supernatant were extracted. The microparticles extracted from the supernatant were co-cultured with the newly isolated macrophages, and then co-cultured for four times. RT-PCR was used to detect the presence of HPV-DNA;2. in the genome of each co-cultured macrophage. Immunocytochemical observation: macrophages co-cultured with microparticles were stained brown. Electron microscope observation: the macrophages co-cultured with microparticles contained HPV virus particles in their nuclei. Two-photon fluorescence microscope observation: after co-culture with microparticles, can macrophage phagocytosis of condyloma acuminatum tissue microparticles and whether there are HPV virus particles, macrophages phagocytosis of micro-particles and lysosome binding. The result is 1: 1. The results of RT-PCR assay showed that the HPV6/11-DNA expression was positive in the genome of macrophages cultured with microparticles each time (four times). Observation of immunocytochemistry: HPV staining in macrophages co-cultured with microparticles was brown. 3. Electron microscope observation: macrophages co-cultured with microparticles have HPV virus particles. 4. 4 in their nuclei. Two-photon fluorescence microscope observation showed that green macrophages contained red microparticles in green macrophages, while red lysosomes in green fluorescent stained HPV; macrophages did not bind with green microparticles. Conclusion 1. HPV can infect macrophages by microparticles. Macrophages infected with HPV also produce and release new HPV-containing microparticles.
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R752.53

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2201111