本文關(guān)鍵詞：川芎嗪對(duì)長(zhǎng)波紫外線誘導(dǎo)人皮膚成纖細(xì)胞衰老的拮抗作用及其機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《廣州中醫(yī)藥大學(xué)》 2015年

川芎嗪對(duì)長(zhǎng)波紫外線誘導(dǎo)人皮膚成纖細(xì)胞衰老的拮抗作用及其機(jī)制研究

趙敏玲  

【摘要】：目的：本研究旨在通過(guò)觀察人皮膚成纖維細(xì)胞(Human Dermis Fibroblasts, HDF)的體外增殖活性、β-半乳糖苷酶染色陽(yáng)性率、細(xì)胞內(nèi)活性氧類總量(Reactive oxygen species, ROS)、p53蛋白及MMP-1、MMP-3的mRNA表達(dá)等,探討川芎嗪對(duì)長(zhǎng)波紫外線(Utraviolet A, UVA)反復(fù)照射誘導(dǎo)人皮膚成纖維細(xì)胞衰老的可能作用及其機(jī)制,為其進(jìn)一步成為光防護(hù)成分并應(yīng)用于光保護(hù)劑提供理論依據(jù)。方法：第1部分：采用酶消化法從人包皮組織中分離培養(yǎng)成纖維細(xì)胞,對(duì)分離培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定,并選擇合適的傳代細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；低劑量UVA反復(fù)照射人皮膚成纖維細(xì)胞,連續(xù)照射5天,每天10J,采用CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性、染色法估算β-半乳糖苷酶表達(dá)量,探討反復(fù)UVA輻射對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞的作用。第2部分：采用不同濃度的川芎嗪預(yù)處理人皮膚成纖維細(xì)胞后進(jìn)行反復(fù)低劑量UVA照射,連續(xù)照射5天,每天10I,光學(xué)顯微鏡下觀察照射前后細(xì)胞形杰的變化、CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性、β-半乳糖苷酶染色,探討川芎嗪對(duì)反復(fù)UVA輻射誘導(dǎo)人皮膚成纖維細(xì)胞衰老的拮抗作用,并采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ROS總量、Westernblot檢測(cè)p53蛋白表達(dá)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)MMP-1、MMP-3的mRNA表達(dá),探討川芎嗪抗皮膚衰老的可能作用機(jī)制。結(jié)果：第1部分：原代培養(yǎng)細(xì)胞光鏡下見(jiàn)細(xì)胞的形態(tài)從圓形、透亮逐漸伸展呈典型的梭形,并逐漸匯合成魚(yú)群狀,交織成網(wǎng)狀,細(xì)胞生長(zhǎng)快速、純度較高,狀態(tài)良好,符合為人皮膚成纖維細(xì)胞的生長(zhǎng)形態(tài)。細(xì)胞生長(zhǎng)潛伏期為0～1d,生長(zhǎng)期為2～5天,平臺(tái)期為6～7d；反復(fù)UVA照射人皮膚成纖維細(xì)胞可誘導(dǎo)其出現(xiàn)增殖緩慢、β-半乳糖苷酶染色陽(yáng)性率增加等老化現(xiàn)象。第2部分：川芎嗪對(duì)正常人皮膚成纖維細(xì)胞的體外增殖活性無(wú)明顯促進(jìn)或抑制作用,但對(duì)經(jīng)反復(fù)UVA照射后人皮膚成纖維細(xì)胞的體外增殖活性有明顯促進(jìn)作用,并能降低其β-半乳糖苷酶染色陽(yáng)性率,且具有一定的劑量依賴性,與UVA組的差異比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)川芎嗪能降低反復(fù)UVA照射誘導(dǎo)的人皮膚成纖維細(xì)胞內(nèi)ROS總量升高,以濃度為50μg/ml、100μg/ml時(shí)明顯,此兩組細(xì)胞ROS值能降低至接近假照射組,與UVA組比較有均統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均0.05)；UVA反復(fù)照射后人皮膚成纖維細(xì)胞內(nèi)p53蛋白表達(dá)增加,與假照射組的差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而川芎嗪能降低UVA反復(fù)照射誘導(dǎo)的p53蛋白表達(dá),與UVA組比較, UVA+川芎嗪100 μ g/ml和假照射組的p53蛋白表達(dá)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＜0.05),同時(shí)各川芎嗪濃度組的p53蛋白表達(dá)隨著藥物濃度的增加呈下降趨勢(shì)。反復(fù)UVA照射人皮膚成纖維細(xì)胞可誘導(dǎo)其MMP-1、MMP-3的mRNA表達(dá)增加,與假照射組的差異比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05),而川芎嗪在一定濃度范圍內(nèi)能降低MMP-1、MMP-3的mRNA表達(dá),與UVA組的差異比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。結(jié)論：川芎嗪對(duì)低劑量UVA反復(fù)照射誘導(dǎo)人皮膚成纖維細(xì)胞衰老具有拮抗作用,其機(jī)制可能與降低細(xì)胞內(nèi)ROS總量、MMP-1、MMP-3的mRNA表達(dá)以及p53蛋白的表達(dá)有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R751
【目錄】：

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 徐浩翔;中波紫外線誘導(dǎo)皮膚成纖維細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

2 閆言;紫外線對(duì)皮膚成纖維細(xì)胞急性損傷機(jī)制及其防治研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

3 趙維佳;紫外線對(duì)體外培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞蛋白質(zhì)差異表達(dá)的影響[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

4 張青松;自噬與人皮膚成纖維細(xì)胞光損傷及光老化關(guān)系的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

5 王繼華;TGF-β1對(duì)UVA照射皮膚成纖維細(xì)胞保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2008年

6 王瑞艷;強(qiáng)脈沖光照射對(duì)培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞的影響[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

7 劉雷山;兩種皮膚細(xì)胞對(duì)過(guò)氧化氫的不同反應(yīng)及CD147在氧化應(yīng)激所致人皮膚成纖維細(xì)胞衰老中的機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2012年

8 占克斌;C型尼曼皮克病診斷平臺(tái)的建立[D];華中科技大學(xué);2007年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 衛(wèi)俊霞;人皮膚成纖維細(xì)胞的生物學(xué)特性以及在同種異體脫細(xì)胞真皮上的培養(yǎng)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

2 李斌;人皮膚成纖維細(xì)胞衰老過(guò)程中表觀遺傳學(xué)相關(guān)基因表達(dá)的初步研究[D];中南大學(xué);2010年

3 楊高松;不同碘制劑對(duì)體外培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞影響的研究[D];山東大學(xué);2010年

4 張東妍;17-β雌二醇對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞產(chǎn)生透明質(zhì)酸和膠原的影響[D];青島大學(xué);2010年

5 裴翔;外源性硫化氫對(duì)大鼠皮膚成纖維細(xì)胞胱硫醚-γ-裂解酶/硫化氫[D];青海大學(xué);2014年

6 張琦;藍(lán)白花肉牛皮膚成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)及培養(yǎng)條件研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2003年

7 何銘;培養(yǎng)胚胎、小兒皮膚成纖維細(xì)胞的比較及TGF-β1對(duì)小兒成纖維細(xì)胞的干預(yù)研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2012年

8 李天航;雌激素對(duì)體外培養(yǎng)的人皮膚成纖維細(xì)胞MMP-1基因表達(dá)的影響[D];天津醫(yī)科大學(xué);2008年

9 張明;幾種中藥對(duì)皮膚成纖維細(xì)胞的影響[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2009年

10 孫小閔;人皮膚成纖維細(xì)胞攪拌培養(yǎng)和保存的初步研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2010年

  本文關(guān)鍵詞：川芎嗪對(duì)長(zhǎng)波紫外線誘導(dǎo)人皮膚成纖細(xì)胞衰老的拮抗作用及其機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：217339