本文選題：梅毒螺旋體 + 巢式聚合酶鏈反應(PCR)　； 參考：《蘭州大學》2012年碩士論文

【摘要】：背景：梅毒(sypilis)是由梅毒螺旋體(Treponema pallidum, TP)(又稱蒼白螺旋體)引起的一種全身性慢性傳染性疾病,可侵犯人體所有器官,其病程較長,臨床表現(xiàn)非常復雜,并可通過胎盤傳播,引起胎兒先天性梅毒或妊娠不良,危害下一代健康。梅毒的廣泛流行和傳播已成為世界各國的公共衛(wèi)生問題,因此梅毒的規(guī)范化治療也受到高度重視。治療梅毒的原則是診斷明確、盡早治療、劑量充足、療程規(guī)則、治療后隨訪觀察、配偶或性伴同時接受檢查和治療、治療期間禁止性交,力爭達到臨床和血清學均治愈。然而診斷梅毒時,在某些情況下,梅毒血清學試驗會出現(xiàn)假陽性、假陰性結果,給梅毒的診治帶來很大的困擾。在有關梅毒的各類研究中,臨床免疫學是其中的熱點。近年來,隨著基因克隆技術的不斷發(fā)展,梅毒全基因序列得到確定,其基因編碼的眾多抗原中,TpN15、TpN17、TpN44.5、TpN47等外膜蛋白均可用于TP的檢測。目前國內外尚沒有通過檢測TpN47、TpN15這兩種膜免疫原基因來診斷梅毒的報道,本實驗運用巢式PCR檢測梅毒患者血液中47KDa、15KDa這兩種膜免疫原基因以排除梅毒血清學假陽性。 目的：用巢式聚合酶鏈反應(PCR)擴增全血中梅毒螺旋體(TP)的47KDa、15KDa的膜免疫原基因,以排除梅毒血清學試驗假陽性。 方法：應用巢式PCR和常規(guī)PCR分別擴增90例疑似梅毒病人全血中的TpN15、TpN47,并與血清學方法比較。 結果：通過檢測標本,并與血清學方法比較,巢式PCR檢測TP的敏感性和特異性分別為93.3%和96.7%,兩者符合率為96.7%;兩種PCR方法檢測結果差異有顯著性(P0.01),巢式PCR敏感性高于常規(guī)PCR。 結論：巢式PCR檢測全血中TP較常規(guī)PCR靈敏,通過檢測47KDa、15KDa的膜免疫原基因,有助于排除梅毒血清學試驗假陽性,提高梅毒的診斷準確率。
[Abstract]:Background: syphilis is a chronic systemic infectious disease caused by Treponema pallidumi (TPN) of Treponema pallium, which can invade all organs of human body. The course of disease is long, the clinical manifestation is very complicated, and it can be transmitted through placenta. Causes fetal congenital syphilis or poor pregnancy, harmful to the health of the next generation. The widespread prevalence and spread of syphilis has become a public health problem all over the world, so the standardized treatment of syphilis has also been attached great importance. The principles of treatment for syphilis are clear diagnosis, early treatment, adequate dosage, regular course of treatment, follow-up observation after treatment, examination and treatment of spouse or sexual partner at the same time, prohibition of sexual intercourse during treatment, and strive to achieve both clinical and serological cure. However, the diagnosis of syphilis, in some cases, syphilis serological test will appear false positive, false negative results, the diagnosis and treatment of syphilis brings great trouble. Clinical immunology is one of the hotspots of syphilis research. In recent years, with the development of gene cloning technology, the whole gene sequence of syphilis has been determined. The outer membrane proteins such as TpN15, TpN17, TpN44.5 and TpN47 can be used for the detection of TP. At present, there are no reports at home and abroad on the diagnosis of syphilis by detecting TpN47 and TpN15, two kinds of membrane immunogen genes. In this study, we used nested polymerase chain reaction (NPCR) to detect the membrane immunogen genes of 47 K Da1 15 KDa in the blood of syphilis patients in order to exclude the false positive serology of syphilis. Objective: to amplify the membrane immunogen gene of 47 K Da1 15 KDa in the whole blood by nested polymerase chain reaction (PCR). Methods: TpN15 TpN47 was amplified by nested PCR and routine PCR in 90 patients with suspected syphilis, and compared with the serological method. Results: the samples were detected and compared with the serological method. The sensitivity and specificity of nested PCR for TP detection were 93.3% and 96.7% respectively, the coincidence rate was 96.70.There was significant difference between the two PCR methods, and the sensitivity of nested PCR was higher than that of conventional PCR.Conclusion: nested PCR is more sensitive than conventional PCR in detecting TP in whole blood. The detection of the membrane immunogen gene of 47K Dahe 15KDa is helpful to eliminate the false positive of syphilis serological test and to improve the diagnostic accuracy of syphilis.
【學位授予單位】：蘭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R759.1

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本文編號：2001410