本文關(guān)鍵詞：中國(guó)地區(qū)臨床孢子絲菌的系統(tǒng)發(fā)育分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《重慶醫(yī)科大學(xué)》 2014年

中國(guó)地區(qū)臨床孢子絲菌的系統(tǒng)發(fā)育分析

劉婷婷  

【摘要】：孢子絲菌病（Sporotrichosis）是一種急性或慢性的皮下組織真菌病，人們常常因?yàn)橥鈧佑|被孢子絲菌（Sporothrix）污染的植物或土壤而致病，部分可因被帶菌的動(dòng)物咬傷或抓傷而感染。申克孢子絲菌（S.schenckii）自1898年首次被Schenck從孢子絲菌病人患病組織中分離出來(lái)，故命名為申克孢子絲菌，曾被認(rèn)為是孢子絲菌病的唯一致病菌，主要通過(guò)形態(tài)學(xué)進(jìn)行鑒定。近年，運(yùn)用分子生物學(xué)研究方法，發(fā)現(xiàn)申克孢子絲菌是包含至少六個(gè)隱含種的申克孢子絲菌復(fù)合體（S. schenckiiComplex），各基因型與地理分布之間存在一定聯(lián)系，且不同孢子絲菌菌種的臨床致病性及抗真菌藥物敏感性不同。 孢子絲菌病在全世界廣泛分布，我國(guó)以吉林、黑龍江、遼寧等地區(qū)發(fā)病率較高。以往我國(guó)采取形態(tài)學(xué)鑒定方法，將致病菌簡(jiǎn)單地歸類為申克孢子絲菌，但尚存在不同的臨床表型及藥物敏感性。周汛等運(yùn)用ITS序列進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析，首次發(fā)現(xiàn)來(lái)自我國(guó)（重慶）的孢子絲菌臨床菌株均為球形孢子絲菌。因此，進(jìn)一步研究我國(guó)孢子絲菌病致病菌種對(duì)明確孢子絲菌分布與孢子絲菌病臨床診療有重要意義。 本研究旨在大量收集中國(guó)地區(qū)孢子絲菌臨床分離株，擴(kuò)增出基因組全長(zhǎng)內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（ITS）序列及部分β-tubulin序列進(jìn)行分子系統(tǒng)發(fā)育分析，以明確我國(guó)孢子絲菌病病原菌的菌種。 本研究收集了來(lái)自重慶、吉林、北京共64株經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定為申克孢子絲菌的臨床分離株，分別提取基因組DNA，對(duì)ITS及β-tubulin序列進(jìn)行擴(kuò)增、測(cè)序，從GenBank獲得參考序列，運(yùn)用ITS聯(lián)合β-tubulin多序列比對(duì)進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析。結(jié)果：本研究成功獲得ITS全長(zhǎng)及β-tubulin部分序列，長(zhǎng)度分別約600bp和450bp；采用最大簡(jiǎn)約法(MP)成功構(gòu)建最優(yōu)系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)；64株（100%）孢子絲菌臨床分離株與球形孢子絲菌（S. globosa）模式菌株位于發(fā)育樹(shù)的同一分支，，支持率為99%。 研究結(jié)果表明，中國(guó)地區(qū)孢子絲菌病臨床致病菌以球形孢子絲菌為優(yōu)勢(shì)菌，而非普遍認(rèn)為的申克孢子絲菌，ITS和β-tubulin能有效地對(duì)孢子絲菌復(fù)合體各菌種進(jìn)行鑒別。我們可以利用孢子絲菌各菌種多位點(diǎn)序列差異，設(shè)計(jì)種特異性引物，快速準(zhǔn)確地完成孢子絲菌種的鑒定。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R756
【目錄】：

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