三氧化二砷對(duì)皮膚T細(xì)胞淋巴瘤Hut-78細(xì)胞株P(guān)ML異構(gòu)體及端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶表達(dá)影響的研究
發(fā)布時(shí)間:2018-05-23 09:20
本文選題:T細(xì)胞淋巴瘤 + Hut-78細(xì)胞株; 參考:《昆明醫(yī)學(xué)院》2011年碩士論文
【摘要】:目的:通過(guò)檢測(cè)不同濃度三氧化二砷(ATO)對(duì)人皮膚T細(xì)胞淋巴瘤Hut-78細(xì)胞株的誘導(dǎo)凋亡作用、細(xì)胞周期及hTERT、PML、PML-Ⅰ、PML-Ⅳ和PML-V基因表達(dá)的影響,探討上述基因在ATO誘導(dǎo)人皮肽T細(xì)胞淋巴瘤凋亡過(guò)程中的作用及可能機(jī)制。 方法:本課題采用PI單標(biāo)記流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)不同濃度的ATO,作用不同時(shí)間后,對(duì)人皮膚T細(xì)胞淋巴瘤Hut-78細(xì)胞株的誘導(dǎo)凋亡作用及對(duì)細(xì)胞周期的影響;采用RT-PCR方法檢測(cè)不同濃度的ATO,作用不同時(shí)間后,對(duì)人皮膚T細(xì)胞淋巴瘤Hut-78細(xì)胞株hTERT、PML、PML-Ⅰ、PML-Ⅳ及PML-Ⅴ基因表達(dá)變化的影響。 結(jié)果:1、以2-10μmol/L濃度的ATO分別干預(yù)Hut-78細(xì)胞24、48、72小時(shí),流式細(xì)胞儀分析各期細(xì)胞占細(xì)胞周期的比例及細(xì)胞凋亡(壞死)比率,結(jié)果示ATO干預(yù)后被阻滯于G2/M期的細(xì)胞隨著ATO作用時(shí)間及濃度的增加比例逐漸增加,10μmol/L作用72小時(shí)時(shí)G2/M期比例最高,隨藥物濃度的增加及作用時(shí)間延長(zhǎng),Hut-78細(xì)胞的凋亡(壞死)比率逐漸增加;2、在ATO 2、5、10μmol/L三組濃度的作用下,用RT-PCR方法檢測(cè)不同作用時(shí)間下Hut-78細(xì)胞hTERT、PML、PML-Ⅰ、PML-Ⅳ及PML-Ⅴ基因表達(dá)水平,結(jié)果示:(1)隨著ATO濃度和作用時(shí)間的增加,hTERT mRNA的表達(dá)水平逐漸降低;(2)在不同濃度ATO作用48 h后PML的表達(dá)增加至最高,從48h至72h則逐漸降低;(3)在2umol/L 10umol/L和的ATO作用下,隨著作用時(shí)間的延長(zhǎng),PML-I的表達(dá)逐漸增加;在對(duì)照組和5umol/L的ATO作用下,從24h至48h之間,隨著時(shí)間延長(zhǎng),表達(dá)逐漸減少,而從48h至72h之間,則隨著時(shí)間延長(zhǎng),表達(dá)逐漸增加;(4)在不同濃度ATO作用后,在24h至48h之間,隨著時(shí)間延長(zhǎng),PML-IV的表達(dá)逐漸增加,在48至72h之間,隨著時(shí)間延長(zhǎng),表達(dá)逐漸減低;(5)在對(duì)照組和2umol/L的ATO作用后,隨著時(shí)間延長(zhǎng),PML-V的表達(dá)無(wú)明顯變化;在5umol/L和10umol/L的ATO作用后,隨著時(shí)間延長(zhǎng),表達(dá)逐漸增加,其中10umol/L的ATO作用后,PML-V表達(dá)量的增加趨勢(shì)最大;3、PML-Ⅳ表達(dá)與hTERT基因的表達(dá)之間無(wú)相關(guān)性。 結(jié)論:1、在一定濃度范圍內(nèi),ATO對(duì)Hut-78細(xì)胞存在增殖抑制作用,其增殖抑制作用在一定程度上可能與下調(diào)hTERT的表達(dá)有關(guān);2、ATO可誘導(dǎo)Hut-78細(xì)胞發(fā)生凋亡,凋亡主要發(fā)生在G2/M期,其凋亡作用可能與PML、PML-I及PML-IV的表達(dá)增高及下調(diào)端粒酶活性有關(guān);3、ATO對(duì)Hut-78細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡作用呈顯著的時(shí)間一劑量依賴(lài)性;4、不同濃度范圍的ATO對(duì)Hut-78細(xì)胞PML-V基因的表達(dá)影響不同,推測(cè)]PML-V只有在藥物強(qiáng)應(yīng)激情況下,表達(dá)才會(huì)激增。
[Abstract]:Objective: to investigate the effects of different concentrations of arsenic trioxide (ATO) on apoptosis, cell cycle and the expression of PML- 鈪,
本文編號(hào):1924149
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