本文選題：黑色素瘤 + 周期素依賴性蛋白激酶��； 參考：《山東醫(yī)藥》2017年23期

【摘要】：目的探討轉(zhuǎn)染周期素依賴性蛋白激酶2短發(fā)夾RNA(CDK2-shRNA)對黑色素瘤B16-F1細(xì)胞達(dá)巴卡嗪敏感性的影響及其機(jī)制。方法將黑色素瘤B16-F1細(xì)胞分為觀察組、空質(zhì)粒組和對照組,觀察組轉(zhuǎn)染重組慢病毒pUL-CDK2-shRNA質(zhì)粒,空質(zhì)粒組轉(zhuǎn)染重組慢病毒pUL-NC-shRNA質(zhì)粒,對照組不轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染12 h后用250μmol/L的達(dá)巴卡嗪孵育三組細(xì)胞72 h。采用MTT法檢測三組細(xì)胞吸光度值,采用集落形成實(shí)驗(yàn)檢測三組細(xì)胞集落形成率(CFR),采用Annexin V-FITC/PI雙染法檢測三組細(xì)胞凋亡率,采用Western blotting法檢測三組細(xì)胞Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白相對表達(dá)量,計(jì)算Bax/Bcl-2。結(jié)果觀察組、空質(zhì)粒組和對照組細(xì)胞吸光度值分別為0.221±0.019、0.684±0.049、0.699±0.051。觀察組細(xì)胞吸光度值與空質(zhì)粒組和對照組相比,P均0.05。觀察組、空質(zhì)粒組和對照組細(xì)胞CFR分別為33.00%±1.80%、67.50%±7.26%、69.83%±5.25%。觀察組細(xì)胞CFR與空質(zhì)粒組和對照組相比,P均0.05。觀察組、空質(zhì)粒組和對照組細(xì)胞凋亡率分別為43.6%±4.1%、17.6%±3.8%、15.1%±4.0%。觀察組細(xì)胞凋亡率與空質(zhì)粒組和對照組相比,P均0.05。觀察組、空質(zhì)粒組和對照組細(xì)胞Bax/Bcl-2分別為2.56±0.28、0.84±0.04、0.86±0.11,Caspase-3相對表達(dá)量分別為0.92±0.07、0.69±0.08、0.57±0.05。觀察組細(xì)胞Bax/Bcl-2、Caspase-3相對表達(dá)量與空質(zhì)粒組和對照組相比,P均0.05。結(jié)論轉(zhuǎn)染CDK2-shRNA可以提高黑色素瘤B16-F1細(xì)胞對達(dá)巴卡嗪的敏感性。其機(jī)制是轉(zhuǎn)染CDK2-shRNA可以提高達(dá)巴卡嗪共培養(yǎng)的黑色素瘤B16-F1細(xì)胞Bax/Bcl-2和Caspase-3表達(dá)水平,促進(jìn)其凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of CDK2-shRNA-transfected cyclin dependent protein kinase 2 short hairpin on the sensitivity of melanoma B16-F1 cells to Vaca and its mechanism. Methods melanoma B16-F1 cells were divided into observation group, blank plasmid group and control group. The observation group was transfected with recombinant lentivirus pUL-CDK2-shRNA plasmid, the blank plasmid group was transfected with recombinant lentivirus pUL-NC-shRNA plasmid, and the control group was not transfected. After transfection for 12 h, the cells were incubated with 250 渭 mol/L of Dazarizine for 72 h. The absorbance of three groups of cells was detected by MTT assay, the colony forming rate was detected by colony forming assay, the apoptosis rate of three groups was detected by Annexin V-FITC/PI double staining, the relative expression of Bcl-2BaxCaspase-3 protein was detected by Western blotting method, and the expression of Bax-2Bcl-2 protein was calculated. Results the cell absorbance values of observation group, empty plasmid group and control group were 0.221 鹵0.019 鹵0.684 鹵0.049 鹵0.699 鹵0.051, respectively. The cell absorbance in the observation group was 0.05 compared with that in the blank plasmid group and the control group. The CFR of the observation group, the empty plasmid group and the control group were 33.00% 鹵1.80% and 67.50% 鹵7.26% respectively. Compared with blank plasmid group and control group, the CFR of observation group was 0.05 (P < 0.05). The apoptotic rate of the observation group, the empty plasmid group and the control group were 43.6% 鹵4.1% and 17.6% 鹵3.8% respectively. The rate of apoptosis in the observation group was 0.05 compared with that in the blank plasmid group and the control group. The relative expression of Caspase-3 in the observation group, the empty plasmid group and the control group was 2.56 鹵0.28 鹵0.84 鹵0.04 鹵0.86 鹵0.11 respectively, and the relative expression of Caspase-3 was 0.92 鹵0.07 鹵0.08 鹵0.57 鹵0.05, respectively. Compared with blank plasmid group and control group, the relative expression of Bax-Bcl-2Caspase-3 in observation group was 0.05 (P < 0.05). Conclusion transfection of CDK2-shRNA can enhance the sensitivity of melanoma B16-F1 cells to Dharizine. The mechanism is that transfection of CDK2-shRNA can increase the expression of Bax/Bcl-2 and Caspase-3 in B16-F1 cells and promote the apoptosis of B16-F1 cells.
【作者單位】： 鶴壁職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)院;湖北省食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)研究院;鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院;
【基金】：河南省科技計(jì)劃項(xiàng)目(122300410193) 河南省高等學(xué)校青年骨干教師資助計(jì)劃項(xiàng)目(2011GGJS-262)
【分類號(hào)】：R739.5

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10 Weatherhead S.C.;Lawrence C.M. ;潘敏;;黑色素瘤篩查診所:檢出更多的黑色素瘤還是使患者消除顧慮?[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(皮膚病學(xué)分冊);2006年Z1期

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3 王s，

本文編號(hào)：1844763