雷帕霉素對(duì)皮膚鱗癌細(xì)胞體外轉(zhuǎn)移潛能的影響
本文選題:雷帕霉素 + 上皮鱗狀細(xì)胞癌 ; 參考:《中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)》2014年04期
【摘要】:目的研究雷帕霉素(rapamycin,RAPA)在體外對(duì)上皮鱗癌細(xì)胞系A(chǔ)431的增殖、遷移以及侵襲能力的影響。方法體外培養(yǎng)人上皮鱗癌細(xì)胞A431,通過(guò)噻唑藍(lán)(MTT)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同濃度的RAPA(5、10、20 nmol·L-1)對(duì)A431增殖的影響,并篩選出最適濃度。依此濃度分別通過(guò)劃痕、Transwell試驗(yàn)檢測(cè)A431的遷移和侵襲能力變化。經(jīng)RAPA處理后,采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)和Western blot檢測(cè)A431中骨橋蛋白(osteopontin,OPN)的mRNA和蛋白的表達(dá)水平的變化。結(jié)果 MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示不同濃度RAPA對(duì)A431增殖有抑制作用,且表現(xiàn)濃度依賴性。RAPA作用于A431細(xì)胞48 h后,劃痕實(shí)驗(yàn)及Transwell實(shí)驗(yàn)顯示A431的遷移和侵襲能力受到明顯抑制。RT-PCR和Western blot結(jié)果都顯示RAPA處理的A431細(xì)胞中OPN的表達(dá)下調(diào)。結(jié)論 RAPA可降低鱗癌細(xì)胞A431的增殖、遷移以及侵襲能力,其機(jī)制可能與RAPA抑制OPN的表達(dá)有關(guān)。
[Abstract]:Objective to study the effects of rapamycin A on the proliferation, migration and invasion of epithelial squamous cell carcinoma cell line A 431 in vitro. Methods Human epithelial squamous carcinoma cell line A431 was cultured in vitro. The effects of different concentrations of RAPA5 10 ~ (10) nmol L ~ (-1) on the proliferation of human epithelial squamous carcinoma cell line A431 were detected by MTT assay, and the optimum concentration was screened out. The migration and invasiveness of A 431 were detected by scratch Transwell test. After treated with RAPA, the expression of mRNA and protein of osteopontin in A431 was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blot. Results the results of MTT assay showed that the proliferation of A431 cells was inhibited by different concentrations of RAPA, and the proliferation of A431 cells was inhibited by RAPA in a dose-dependent manner. Scratch test and Transwell assay showed that the migration and invasion ability of A431 was significantly inhibited. The results of RT-PCR and Western blot showed that the expression of OPN was down-regulated in A431 cells treated with RAPA. Conclusion RAPA can reduce the proliferation, migration and invasion of squamous cell carcinoma A431, and its mechanism may be related to the inhibition of OPN expression by RAPA.
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No 81172591)
【分類號(hào)】:R739.5
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1828721
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