本文關(guān)鍵詞：阿魏酸對UVA致人成纖維細(xì)胞光老化的抑制作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《蘇州大學(xué)》 2015年

阿魏酸對UVA致人成纖維細(xì)胞光老化的抑制作用研究

陸一楓  

【摘要】：研究背景和目的:皮膚衰老包括內(nèi)源性自然衰老和受環(huán)境因素影響的外源性衰老,后者主要是由于紫外線輻射所致稱光老化。長波紫外線(UVA,320~400nm)是產(chǎn)生皮膚光老化的主要因素。UVA主要作用于真皮中的成纖維細(xì)胞。光老化時(shí)皮膚組織結(jié)構(gòu)、含水量、光滑度、彈性和順應(yīng)性均下降。組織學(xué)表現(xiàn)為表皮有厚度變化如萎縮或增生,并伴有真皮細(xì)胞及基質(zhì)的改變。皮膚的老化影響美觀,引起患者生活質(zhì)量的下降,隨著環(huán)境污染的日益加重,如何預(yù)防和延緩皮膚老化是關(guān)注和研究的熱點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-β是一大類多功能的細(xì)胞生長增殖調(diào)節(jié)蛋白,對細(xì)胞的生長、分化和免疫功能都有重要的調(diào)節(jié)作用,其中TGF-β1可刺激成纖維細(xì)胞增殖,促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)如膠原蛋白的表達(dá)和抑制ECM的降解�；|(zhì)金屬蛋白酶-1(MMP-1)可以降解Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅹ型結(jié)締組織膠原,導(dǎo)致膠原變性,破壞ECM的正常結(jié)構(gòu)和生理功能。金屬蛋白酶組織抑制劑(TIMP)是MMPs的主要內(nèi)源性抑制物,其中TIMP-1與活化的MMP-1非共價(jià)結(jié)合抑制MMP-1的活性。此外,p66Shc是調(diào)控細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)和ROS產(chǎn)生的重要基因,參與了氧化應(yīng)激和細(xì)胞衰老相關(guān)信號通路。故TGF-β1、MMP-1、TIMP-1、p66Shc在皮膚光老化的發(fā)生和發(fā)展過程中都起著重要作用。由于藥效明確及較少的副作用,從天然植物和傳統(tǒng)藥物中提取的新型防光藥物受到越來越多的重視。阿魏酸(Ferulic Acid)存在于川芎、當(dāng)歸等活血化瘀中藥材中。阿魏酸具有抗血栓形成、消炎止痛及很強(qiáng)的抗氧化、清除自由基以及細(xì)胞保護(hù)作用。既往我們已對阿魏酸的抗紫外線作用進(jìn)行了初步研究,發(fā)現(xiàn)它能夠有效抑制長波紫外線(UVA,320~400nm)和中波紫外線(UVB,290~320nm)對人皮膚細(xì)胞(包括角質(zhì)形成細(xì)胞和成纖維細(xì)胞)的氧化損傷,提高細(xì)胞氧化防御能力。然而,阿魏酸是否也可以減輕UVA輻射所引起的光老化?故我們在本研究中采用UVA輻射以及阿魏酸預(yù)孵育作用于人皮膚成纖維細(xì)胞,觀察UVA致細(xì)胞老化效應(yīng)和阿魏酸干預(yù)對此過程的影響,以探討其作用機(jī)制。方法:分離培養(yǎng)人原代成纖維細(xì)胞,分為空白組、阿魏酸組、UVA組和UVA+阿魏酸組。以UVA照射細(xì)胞,照光劑量為10J/cm2,其中藥物干預(yù)組于照光前后加入200μg/mL阿魏酸孵育。照光后于不同時(shí)間段收集細(xì)胞進(jìn)行檢測。1.組織化學(xué)染色法檢測衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-Gal)表達(dá)。2.酶聯(lián)免疫吸附法檢測上清液中轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)含量。3.實(shí)時(shí)定量PCR(real-time PCR)法檢測基質(zhì)金屬蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)、金屬蛋白酶組織抑制因子-l(tissue inhibitor of metalloproteinase-l,TIMP-1)和p66shcmRNA表達(dá)水平變化。結(jié)果:1.正常細(xì)胞組及單純阿魏酸組β-半乳糖苷酶陽性細(xì)胞均較低,UVA組β-半乳糖苷酶陽性細(xì)胞數(shù)則顯著升高,加入阿魏酸處理可使β-半乳糖苷酶陽性細(xì)胞比率明顯降低。2.單純阿魏酸處理可以促進(jìn)TGF-β1分泌;UVA照射使TGF-β1分泌量明顯降低,加入阿魏酸干預(yù)可增加TGF-β1分泌量。3.UVA能夠誘導(dǎo)MMP-1、TIMP-1和p66ShcmRNA表達(dá)水平升高,而阿魏酸可在一定程度上抑制MMP-1和p66ShcmRNA表達(dá),并誘導(dǎo)TIMP-1mRNA表達(dá)。結(jié)論:阿魏酸能夠延緩UVA輻射引起的皮膚成纖維細(xì)胞的損傷老化過程,其機(jī)制可能與抑制膠原降解、抗氧化應(yīng)激相關(guān)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R751
【目錄】：

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