本文選題：GAB + 黑色素瘤��； 參考：《中華腫瘤防治雜志》2017年14期

【摘要】：目的惡性黑色素瘤主要由皮膚黑色素細胞的惡性轉(zhuǎn)化引起。Grb2協(xié)同結(jié)合蛋白2(Grb2-associated binding protein-2,GAB2)是一個腳手架蛋白,通過招募受體酪氨酸激酶等膜受體進行信號傳遞,已經(jīng)證實GAB2蛋白與多種腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移有關,但GAB2蛋白抑制黑色素瘤的機制還不清楚。本研究通過沉默GAB2基因?qū)K-Mel28細胞轉(zhuǎn)移能力的影響,探討GAB2基因促進SK-Mel28黑色素瘤細胞轉(zhuǎn)移的細胞信號轉(zhuǎn)導通路變化。方法采用RNA干擾技術沉默GAB2基因表達。采用Matrigel法檢測SK-Mel28細胞在沉默GAB2基因表達后48h對細胞轉(zhuǎn)移能力的影響;采用細胞劃痕實驗檢測SK-Mel28細胞在沉默GAB2基因表達后細胞遷移能力的改變;蛋白質(zhì)印跡法檢測PI3K和MAPK信號通路的關鍵蛋白、pAKT、pERK、pPDK1和β-catenin的蛋白表達水平。結(jié)果沉默GAB2基因可使SK-Mel28細胞的轉(zhuǎn)移能力和遷移能力減弱,統(tǒng)計學分析顯示,SK-Mel28細胞的轉(zhuǎn)移能力降低了54.5%,與scramble RNA對照組比較差異有統(tǒng)計學意義,t=5.053,P0.001;SK-Mel28細胞在轉(zhuǎn)染GAB2siRNA 18h后細胞的遷移能力減弱,與scramble RNA對照組比較遷移距離減少了43.0%,差異有統(tǒng)計學意義,t=3.877,P=0.001。SK-Mel28黑色素瘤細胞的GAB2蛋白表達水平降低后,PI3K信號通路的關鍵分子pAKT和pPDK1表達下調(diào),而T-AKT和T-PDK1無明顯變化,細胞膜表面粘附因子β-catenin蛋白表達下降。結(jié)論 GAB2蛋白的表達水平與SK-Mel28黑色素瘤的轉(zhuǎn)移相關,其機制與GAB2蛋白調(diào)控下游的PI3K信號通路并抑制轉(zhuǎn)移相關因子β-catenin有關。
[Abstract]:Objective malignant melanoma is mainly caused by malignant transformation of melanocytes. Grb2 cobinding protein 2(Grb2-associated binding protein-2 GAB2) is a scaffold protein, which is transmitted by recruitment of receptor tyrosine kinase and other membrane receptors.It has been proved that GAB2 protein is involved in the occurrence and metastasis of many kinds of tumors, but the mechanism of GAB2 protein inhibiting melanoma is unclear.In this study, the effect of silencing GAB2 gene on the metastatic ability of SK-Mel28 cells was studied to investigate the changes of signal transduction pathway of SK-Mel28 melanoma cells promoted by GAB2 gene.Methods GAB2 gene expression was silenced by RNA interference technique.Matrigel assay was used to detect the effect of SK-Mel28 cells on the ability of cell metastasis after GAB2 gene expression was silenced for 48 hours, and cell scratch assay was used to detect the change of cell migration ability of SK-Mel28 cells after silencing the expression of GAB2 gene.The protein expression levels of pAKTT pERKN pPDK1 and 尾 -catenin in PI3K and MAPK signaling pathway were detected by Western blotting.Results silencing GAB2 gene decreased the metastasis and migration ability of SK-Mel28 cells.Statistical analysis showed that the metastatic ability of SK-Mel28 cells decreased by 54.5%, which was significantly lower than that of scramble RNA control group. The migration ability of SK-Mel28 cells was decreased after transfection of GAB2siRNA for 18 h.Compared with the control group of scramble RNA, the migration distance was decreased by 43.0. The difference was statistically significant. The expression of GAB2 protein in melanoma cells was significantly decreased, but the expression of pAKT and pPDK1, the key molecules of PI3K signaling pathway, was down-regulated, but T-AKT and T-PDK1 did not change significantly.The expression of adhesion factor 尾-catenin on cell membrane was decreased.Conclusion the expression of GAB2 protein is related to the metastasis of SK-Mel28 melanoma, and its mechanism is related to the regulation of downstream PI3K signal pathway by GAB2 protein and the inhibition of metastasis related factor 尾 -catenin.
【作者單位】： 天津大學生命科學學院微生物與免疫學教研室;天津市腫瘤醫(yī)院血液科;
【基金】：天津市應用基礎與前沿技術研究計劃(13JCYBJC40800)
【分類號】：R739.5

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 白玲,陳保生;穩(wěn)定表達組織因子的黑色素瘤細胞中血管內(nèi)皮細胞生長因子的誘導[J];基礎醫(yī)學與臨床;2003年01期

2 肖國宏;羅成群;唐國茂;周建大;;人內(nèi)皮抑素基因轉(zhuǎn)染原代成人黑色素瘤細胞[J];中南大學學報(醫(yī)學版);2005年06期

3 李鳳云;免疫RNA引起對黑色素瘤細胞的溶解[J];蚌埠醫(yī)學院學報;1978年S1期

4 王亞珍;呂品田;王鳳紅;鄭振茹;;赤芍總苷聯(lián)合卡鉑對黑色素瘤細胞生長的抑制及相關機制研究[J];醫(yī)學動物防制;2011年12期

5 楊方黎;唐均英;米彥;姚陳果;王劍飛;;納秒級陡脈沖電場誘導人黑色素瘤細胞裸鼠皮下移植瘤凋亡作用及機制[J];第四軍醫(yī)大學學報;2009年13期

6 李鳳云;黑色素瘤細胞浸出物在試管內(nèi)抑制淋巴細胞對瘤細胞的毒性作用[J];蚌埠醫(yī)學院學報;1978年S1期

7 羅惠先,劉云華,余達經(jīng),周潔萍;高溫所致黑色素瘤細胞的生長及其表面變化的掃描電鏡觀察[J];同濟醫(yī)科大學學報;1990年02期

8 任師顏;;腫瘤浸潤淋巴細胞對自體黑色素瘤細胞的溶解及有關臨床效果[J];國外醫(yī)學(腫瘤學分冊);1992年01期

9 李永和,陳識杰,朱涵能,莫素珍,高素梅,何介薇,金為翹;α_2-巨球蛋白對黑色素瘤細胞作用的體外實驗研究[J];上海醫(yī)科大學學報;1996年05期

10 賀莉芳;萬啟惠;劉暉;張曦;;家蠅幼蟲抗菌蛋白對黑色素瘤細胞的影響[J];中國公共衛(wèi)生;2006年07期

相關會議論文 前10條

1 桑紅;;積雪甙對黑色素瘤細胞生長影響的實驗研究[A];2002中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學術會議論文匯編[C];2002年

2 林治榮;沈斌;冉胤威;杜俊蓉;王衛(wèi)華;鄭士杰;;不同融合基因修飾的黑色素瘤細胞體外目的基因表達及體內(nèi)致瘤性的研究[A];中國藥理學會第八次全國代表大會論文摘要集（第二部分）[C];2002年

3 向青;徐梅;肖誠;李紅艷;徐波;郭宇鵬;耿傳營;潘琳;房青;唐勁天;;空間環(huán)境對黑色素瘤細胞基因表達的影響[A];中國空間科學學會第16屆空間生命學術研討會論文摘要集[C];2005年

4 陳炳卿;薛英本;薛英威;劉瑞海;;共軛亞油酸對鼠黑色素瘤細胞與轉(zhuǎn)移相關的細胞行為的影響[A];2000全國腫瘤學術大會論文集[C];2000年

5 王淙;李永梅;郭劉斌;馬俊遠;姜麗平;;四種常用美白成分對皮膚黑色素瘤細胞的作用[A];2013醫(yī)學前沿論壇暨第十三屆全國腫瘤藥理與化療學術會議論文集[C];2013年

6 林治榮;沈斌;冉胤威;杜俊蓉;王衛(wèi)華;鄭士杰;;不同融合基因修飾的黑色素瘤細胞體外目的基因表達及體內(nèi)致瘤性的研究[A];中國藥理學會第八次全國代表大會暨全國藥理學術會議論文摘要匯編[C];2002年

7 陳瑾;;DKK1對黑色素瘤細胞侵襲能力的抑制作用[A];中華醫(yī)學會第十八次全國皮膚性病學術年會論文匯編[C];2012年

8 宋旭;;長非編碼RNA參與腫瘤發(fā)生發(fā)展過程[A];生命的分子機器及其調(diào)控網(wǎng)絡——2012年全國生物化學與分子生物學學術大會摘要集[C];2012年

9 孫保存;倪春生;孫濤;趙秀蘭;郄碩;劉易欣;王星輝;古強;戚紅;;小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞與黑色素瘤細胞B16相互作用的初步研究[A];中華醫(yī)學會病理學分會2007年學術年會暨第九屆全國病理大會論文匯編[C];2007年

10 向敏;顧振綸;梁中琴;周文軒;郭次儀;;熊果酸對小鼠B16黑色素瘤細胞的分化誘導作用[A];第七屆全國生化藥理學術討論會論文摘要集[C];2000年

相關重要報紙文章 前3條

1 通訊員 李靜 記者 馬躍華;黑色素瘤細胞生長可被抑制[N];光明日報;2013年

2 王小舒;未來治療皮癌只需涂抹乳霜[N];北京日報;2012年

3 第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科教授 粟秀初;腦瘤為何被誤診為腦膜炎[N];健康報;2014年

相關博士學位論文 前4條

1 王寅;5-脂氧合酶抑制劑對黑色素瘤細胞a375轉(zhuǎn)移的抑制作用[D];第二軍醫(yī)大學;2002年

2 李群;Survivin的下調(diào)對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激誘導的黑色素瘤細胞凋亡抗性的影響機制研究[D];安徽醫(yī)科大學;2012年

3 趙萬洲;乙酰乳香酸（BC-4）抗腫瘤作用的分子機制及黑色素瘤細胞基本生物學特性的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2001年

4 趙小瑜;rhIL-24對A375黑色素瘤細胞體內(nèi)外抗腫瘤效應及其分子機理的研究[D];蘇州大學;2006年

相關碩士學位論文 前10條

1 王曉利;EPS-8沉默和過表達對黑色素瘤細胞A375生物學行為的影響[D];鄭州大學;2015年

2 陳晨;6-姜烯酚通過下調(diào)PKM2的表達抑制黑色素瘤細胞的增殖與轉(zhuǎn)移[D];南京中醫(yī)藥大學;2015年

3 宋登燕;miR-106b-5p抑制黑色素瘤細胞增殖功能的初步研究[D];昆明醫(yī)科大學;2015年

4 殷娜;重樓皂苷Ⅰ對人黑色素瘤細胞的增殖抑制作用的研究[D];昆明醫(yī)科大學;2015年

5 韓健;干擾素-γ對黑色素瘤細胞血管生成擬態(tài)的影響[D];天津醫(yī)科大學;2015年

6 張婧思;間充質(zhì)干細胞對黑色素瘤細胞的抑制作用及其機制的研究[D];北京交通大學;2016年

7 李延峰;靶向eEF-2K對黑色素瘤細胞Vemurafenib治療敏感性的影響及機制研究[D];蘇州大學;2016年

8 門穎麗;4.1B對小鼠黑色素瘤細胞增殖、遷移和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響[D];鄭州大學;2016年

9 周憶新;裂解型基因重組腺病毒對人黑色素瘤細胞及小鼠肝癌抑瘤作用的實驗研究[D];蘇州大學;2007年

10 楊方黎;納秒級陡脈沖電場誘導人黑色素瘤細胞裸鼠皮下移植瘤凋亡作用及機制的研究[D];重慶醫(yī)科大學;2009年

，

本文編號：1767038