本文選題：體外培養(yǎng)　切入點(diǎn)：皮膚干細(xì)胞　出處：《福建醫(yī)科大學(xué)》2010年碩士論文

【摘要】： 目的:探討UVB對(duì)體外培養(yǎng)的皮膚干細(xì)胞某些標(biāo)記分子表達(dá)的影響。 方法:利用快速貼壁的方法分離培養(yǎng)皮膚干細(xì)胞,K15、β整合素鑒定其干細(xì)胞性質(zhì)。利用峰值在305nm的UVB照射皮膚干細(xì)胞,照射劑量為10mJ/cm2。觀察皮膚干細(xì)胞在經(jīng)過(guò)UVB照射(實(shí)驗(yàn)組)與未經(jīng)過(guò)照射(對(duì)照組)其形態(tài)學(xué)變化。免疫組化分別檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組皮膚干細(xì)胞標(biāo)記分子K15、β整合素、CD34、beta-catenin、P53的表達(dá)變化。 結(jié)果:①成功分離并培養(yǎng)了皮膚干細(xì)胞。分離出來(lái)皮膚干細(xì)胞其特征性標(biāo)記分子K15及β整合素表達(dá)陽(yáng)性。②對(duì)照組干細(xì)胞密度大,細(xì)胞呈圓形或多角形,細(xì)胞形態(tài)清晰,胞質(zhì)均勻,可見(jiàn)有核分裂細(xì)胞,核質(zhì)比例大。實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞密度稀,細(xì)胞變形、不規(guī)則,細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)空泡,核質(zhì)比例變小。部分細(xì)胞出現(xiàn)核固縮和凋亡。③對(duì)照組皮膚干細(xì)胞beta-Catenin主要在細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)表達(dá),其胞膜和胞核染色陽(yáng)性率分別為64.74%,8.4%。P53主要在胞質(zhì)表達(dá),其胞核染色陽(yáng)性率為6.9%;實(shí)驗(yàn)組皮膚干細(xì)胞beta-Catenin主要在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核表達(dá),其胞膜和胞核染色陽(yáng)性率分別為70.54%和0。P53主要在細(xì)胞核表達(dá),其胞核染色陽(yáng)性率為100%。CD34在兩種情況下均不表達(dá)。④對(duì)照組K15和β整合素在細(xì)胞質(zhì)表達(dá),實(shí)驗(yàn)組兩者均不表達(dá)。 結(jié)論: 1.利用快速貼壁法可分離出皮膚干細(xì)胞,其皮膚干細(xì)胞特征性標(biāo)記分子K15及β整合素表達(dá)陽(yáng)性。 2.UVB能使皮膚干細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的改變。 3.UVB能使CD34陰性皮膚干細(xì)胞beta-Catenin在細(xì)胞質(zhì)積聚并內(nèi)移入胞核。 4.P53可定位于皮膚干細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì),在經(jīng)過(guò)UVB照射后可轉(zhuǎn)移入細(xì)胞核。 5.UVB能使皮膚干細(xì)胞的標(biāo)記分子K15和β整合素表達(dá)消失。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of UVB on the expression of some marker molecules in cultured skin stem cells. Methods: skin stem cells were isolated and cultured by rapid adherent method. The stem cells were identified by 尾 integrin. Skin stem cells were irradiated by peak value of 305nm in UVB. The morphological changes of skin stem cells were observed by UVB irradiation (experimental group) and unirradiated skin stem cells (control group). The expression of K15, 尾 integrin CD34 and beta-catenin p53 were detected by immunohistochemistry. Results the skin stem cells were isolated and cultured successfully by 1: 1. The stem cells in the control group with positive expression of K15 and 尾 integrin were characterized by large density, round or polygonal cells, and clear morphology. The cytoplasm was homogeneous, mitotic cells could be seen, and the ratio of nucleus to cytoplasm was large. In the experimental group, the density of the cells was thin, the cells were deformed, the cells were irregular, and the cytoplasm was vacuolar. In the control group, beta-Catenin was mainly expressed in cell membrane and cytoplasm, and the positive rate of membrane and nucleus staining was 64.748.4. p53 was mainly expressed in cytoplasm. The positive rate of beta-Catenin in the skin stem cells of the experimental group was mainly expressed in the cytoplasm and nucleus, and the positive rates of beta-Catenin in the membrane and nucleus were 70.54% and 70.54%, respectively. The positive rate of nuclear staining was that 100%.CD34 did not express K15 and 尾 integrin in cytoplasm of the control group in both cases, and neither of the two groups in the experimental group expressed K15 and 尾 integrin in the cytoplasm. Conclusion:. 1. Skin stem cells were isolated by rapid adherent method, and K15 and 尾 integrin were positive. 2.UVB can significantly change the morphology of skin stem cells. 3.UVB can induce beta-Catenin accumulation in cytoplasm and transfer into nucleus of CD34 negative skin stem cells. 4.P53 can be localized in the cytoplasm of skin stem cells and metastasized into the nucleus after UVB irradiation. 5.UVB reduced the expression of K 15 and 尾 integrin in skin stem cells.
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R751

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