紫外線及黃芪甲苷對人皮膚成纖維細(xì)胞E3連接酶Hrd1表達(dá)的影響
本文關(guān)鍵詞: 紫外線 人皮膚成纖維細(xì)胞 E連接酶 羥甲基戊二酰輔酶A還原酶降解蛋白 黃芪甲苷 出處:《臨床皮膚科雜志》2014年04期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的:探討紫外線(UV)對人皮膚成纖維細(xì)胞中E3連接酶Hrd1表達(dá)的影響及黃芪甲苷的干預(yù)作用。方法:分離培養(yǎng)人原代成纖維細(xì)胞,分別以10J/cm~2UVA和30mJ/cm~2 UVB進(jìn)行照射,黃芪甲苷進(jìn)行干預(yù)處理。采用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法檢測不同濃度的黃芪甲苷對成纖維細(xì)胞增殖活性的影響;熒光定量PCR法檢測成纖維細(xì)胞中Hrd1的mRNA表達(dá);免疫組化法觀察成纖維細(xì)胞Hrd1的蛋白表達(dá)。結(jié)果:MTT結(jié)果示:在適宜濃度下,黃芪甲苷對體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞有顯著的促增殖作用,藥物濃度為10、20、30mg/L時(shí)最為明顯(P0.001);熒光定量PCR結(jié)果示:UVA、UVB照射組成纖維細(xì)胞Hrd1 mRNA表達(dá)量明顯高于正常對照組,而黃芪甲苷可顯著抑制UV輻射后成纖維細(xì)胞中Hrd1的表達(dá)(P0.001);免疫組化結(jié)果示:UV照射(UVA或UVB)可增加Hrd1的蛋白表達(dá),黃芪甲苷可顯著抑制UV照射后成纖維細(xì)胞中Hrd1的蛋白表達(dá)。結(jié)論:UV輻射可以上調(diào)人皮膚成纖維細(xì)胞中E3連接酶Hrd1的表達(dá),而黃芪甲苷對這一現(xiàn)象具有逆轉(zhuǎn)作用。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of UV on the expression of E3 ligase Hrd1 in human skin fibroblasts and the effect of astragaloside A. methods: the primary fibroblasts were isolated and cultured and irradiated with 10 J / cm ~ (2) UVA and 30 mg / cm ~ (2) UVB, respectively. The effects of different concentrations of astragaloside on the proliferation of fibroblasts were detected by MTT colorimetry, and the mRNA expression of Hrd1 in fibroblasts was detected by fluorescence quantitative PCR. The expression of Hrd1 protein in fibroblasts was observed by immunohistochemistry. Results: under the appropriate concentration, astragaloside A could significantly promote the proliferation of fibroblasts cultured in vitro. The results of fluorescence quantitative PCR showed that the expression of Hrd1 mRNA was significantly higher than that of the normal control group when the concentration was 10 ~ 20 ~ 30 mg / L, and the results of fluorescence quantitative PCR showed that the expression of Hrd1 mRNA was significantly higher than that of the normal control group. Astragaloside A could significantly inhibit the expression of Hrd1 in the fibroblasts after UV irradiation, and the immunohistochemical results showed that the protein expression of Hrd1 was increased by WUV irradiation. Astragaloside A can significantly inhibit the expression of Hrd1 protein in fibroblasts after UV irradiation. Conclusion the expression of E3 ligase Hrd1 in human skin fibroblasts can be upregulated by 1: UV irradiation, and Astragaloside A can reverse this phenomenon.
【作者單位】: 南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院皮膚性病科;南京醫(yī)科大學(xué)代謝疾病研究中心;
【基金】:江蘇省“六大人才高峰”基金(2008101)資助項(xiàng)目 江蘇省中醫(yī)藥局科技基金(LZ11082)資助項(xiàng)目
【分類號】:R758.1
【參考文獻(xiàn)】
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