本文關(guān)鍵詞：人真皮間充質(zhì)干細(xì)胞對白癜風(fēng)患者皮損周圍CD8~+T淋巴細(xì)胞表達(dá)和分泌IL-13的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《安徽醫(yī)科大學(xué)》 2014年

人真皮間充質(zhì)干細(xì)胞對白癜風(fēng)患者皮損周圍CD8~+T淋巴細(xì)胞表達(dá)和分泌IL-13的實驗研究

鮑華燁  

【摘要】：白癜風(fēng)是一種常見的皮膚色素脫失性疾病，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，病因不明，治療困難，通常以黑素細(xì)胞的破壞或者缺失導(dǎo)致色素脫失斑的產(chǎn)生為特征。白癜風(fēng)可發(fā)生于任何年齡以及任何部位。近年來，該病的發(fā)病率有上升的趨勢。白癜風(fēng)主要影響患者的容貌，特別是顏面部皮損，給患者造成巨大的精神和心理壓力。本病病因復(fù)雜，確切的發(fā)病機(jī)制尚不清楚。發(fā)病機(jī)制有眾多學(xué)說，一般廣為接受的基本學(xué)說包括：遺傳學(xué)說，黑素細(xì)胞自毀學(xué)說，自身免疫學(xué)說以及神經(jīng)學(xué)說等。本病治療的手段多種多樣，但是均不能達(dá)到令患者及醫(yī)生非常滿意的程度。 本課題組前期已經(jīng)將人真皮來源的間充質(zhì)干細(xì)胞和白癜風(fēng)患者CD8+T淋巴細(xì)胞共同培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)DMSC抑制患者CD8+T淋巴細(xì)胞的活性和增殖，并促進(jìn)其凋亡。并且，將DMSC與白癜風(fēng)患者皮損周圍CD8+T淋巴細(xì)胞共同培養(yǎng)，做了細(xì)胞因子芯片，分析比較各組細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，研究發(fā)現(xiàn)，患者皮損周圍CD8+T淋巴細(xì)胞和DMSC共同培養(yǎng)后，多種細(xì)胞因子分泌下降，其中IL-13的下降更加顯著。 本實驗以IL-13為靶點，旨在研究IL-13在DMSC和白癜風(fēng)患者皮損周圍CD8+T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)中可能發(fā)揮的作用。 目的 初步探討人真皮間充質(zhì)干細(xì)胞（DMSC）對白癜風(fēng)患者皮損周圍CD8+T淋巴細(xì)胞分泌表達(dá)IL-13的影響。 方法 應(yīng)用細(xì)胞增殖檢測法（MTS）檢測重組IL-13（rIL-13）對黑素細(xì)胞增殖的影響。采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）和蛋白質(zhì)印跡法（Western印跡法）分別檢測8例進(jìn)展期尋常型白癜風(fēng)患者皮損周圍及外周血中CD8+T淋巴細(xì)胞中IL-13基因和蛋白表達(dá)。應(yīng)用實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）技術(shù)和雙抗體夾心ELISA法分別檢測DMSC與白癜風(fēng)患者皮損周圍CD8+T淋巴細(xì)胞共培養(yǎng)前后細(xì)胞IL-13mRNA水平和上清蛋白水平的表達(dá)。流式細(xì)胞術(shù)檢測rIL-13對CD8+T淋巴細(xì)胞的增殖及活性影響。 結(jié)果不同濃度（10,50,100，250,500μg/L）的rIL-13作用黑素細(xì)胞24、48、72、96h后黑素細(xì)胞的增殖與對照組比較均未見明顯變化（均P0.05）。白癜風(fēng)患者皮損周圍及外周血中CD8+T淋巴細(xì)胞均可表達(dá)IL-13，但皮損周圍CD8+T淋巴細(xì)胞表達(dá)IL-13更顯著，，將皮損周圍CD8+T淋巴細(xì)胞和DMSC共培養(yǎng)，CD8+T淋巴細(xì)胞IL-13mRNA(0.100±0.010)和蛋白表達(dá)水平(1509.62±148.44)均顯著低于單獨培養(yǎng)CD8+T淋巴細(xì)胞（mRNA：0.383±0.018，蛋白：5507.98±518.11，均P0.05）。100μg/L rIL-13作用CD8+T淋巴細(xì)胞24、48、72h, CD8+T淋巴細(xì)胞的增殖及活性均為見明顯變化。 結(jié)論 白癜風(fēng)患者皮損周圍CD8+T淋巴細(xì)胞高表達(dá)IL-13，DMSC抑制白癜風(fēng)患者皮損周圍CD8+T淋巴細(xì)胞表達(dá)和分泌IL-13。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R758.41
【目錄】：

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