本文關鍵詞： 人參皂甙Rb1 黑素細胞 黑素生成　出處：《大連醫(yī)科大學》2011年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的:皮膚中黑素含量是決定皮膚顏色的主要因素之一。黑素細胞產(chǎn)生黑素,并將其輸送到周圍的角質形成細胞,從而影響皮膚的顏色。黑素細胞生成黑素的不足可以導致皮膚色素減退或脫失,促進黑素細胞的黑素生成是治療色素脫失性疾病的策略之一。酪氨酸酶是黑素細胞產(chǎn)生黑素的關鍵酶。近年研究發(fā)現(xiàn),酪氨酸酶主要受小眼畸形相關轉錄因子(MITF)的調(diào)控,而MITF的表達又受到上游蛋白如cAMP應答元件結合蛋白(CREB)的影響。中藥人參曾被用于白癜風等脫色素性疾病的治療,而Rb1是中藥人參的主要有效成分之一。近年來有報道人參皂甙Rb1具有抗健忘、抗衰老、抗氧化、抗凋亡,促進神經(jīng)纖維形成并保持其功能、等多重作用。黑素細胞和神經(jīng)細胞在胚胎發(fā)生中同源,但人參皂甙Rb1對黑素細胞黑素生成的作用尚未見報道。本文研究人參皂甙Rb1對人表皮黑素細胞黑素生成的影響及其作用機制,以探討其用于治療色素脫失性皮膚病的前景。 方法:將黑素細胞進行原代培養(yǎng)、傳代,選取第2-5代黑素細胞進行實驗,采用MTT法測定細胞增殖情況,氧化多巴法測定酪氨酸酶活性,氫氧化鈉裂解法測定黑素生成,免疫蛋白印記法測定酪氨酸酶和小眼畸形相關轉錄因子(MITF)的表達及cAMP應答元件結合蛋白(CREB)的激活。 結果:加入25-100μM人參皂甙Rb1作用72h后,黑素細胞活力無明顯影響,細胞酪氨酸酶活性和黑素含量呈濃度依賴性增強;100μM人參皂甙Rb1作用72h后,酪氨酸酶、MITF蛋白表達明顯增加,CREB明顯激活。10μM的蛋白激酶A(PKA)抑制劑H-89預處理細胞,可明顯抑制人參皂甙Rb1引起的CREB激活、酪氨酸酶及MITF蛋白表達的增加,進而抑制人參皂甙Rb1引起的酪氨酸酶活性作用增強及黑素合成增加。 結論:人參皂甙Rb1可促進正常人黑素細胞的黑素合成和酪氨酸酶活性。PKA/CREB/MITF/酪氨酸酶信號通路參與了人參皂甙Rb1的促黑素生成機制。
[Abstract]:Objective: the content of melanin in skin is one of the main factors that determine the skin color. Melanocytes produce melanin and transport it to the surrounding keratinocytes. Thus affecting the color of the skin. The lack of melanocyte production melanin can lead to hypopigmentation or loss of skin. Promoting melanogenesis in melanocytes is one of the strategies for the treatment of dystrocytic diseases. Tyrosinase is the key enzyme for melanocytes to produce melanin. Tyrosinase is mainly regulated by MITF, a transcription factor associated with microocular malformation. The expression of MITF is affected by upstream proteins such as cAMP response element binding protein (cAMP). Ginseng has been used in the treatment of depigmented diseases such as vitiligo. In recent years, ginsenoside Rb1 has been reported to have anti-amnesia, anti-aging, anti-oxidation, anti-apoptosis, promote the formation of nerve fibers and maintain its function. Melanocytes and nerve cells are homologous in embryogenesis. However, the effect of ginsenoside Rb1 on melanogenesis of melanocytes has not been reported. The effect of ginsenoside Rb1 on melanogenesis of human epidermal melanocytes and its mechanism have been studied in this paper. To explore its application in the treatment of pigmented dermatosis. Methods: melanocytes were cultured and subcultured. The proliferation of melanocytes was measured by MTT assay and tyrosinase activity was determined by oxidative dopa method. The formation of melanin was determined by sodium hydroxide pyrolysis method. The expression of tyrosinase and MITF and activation of cAMP response element binding protein (CREBB) were detected by immuno protein imprinting. Results: after treated with 25-100 渭 M ginsenoside Rb1 for 72 h, the activity of melanocytes was not affected, and the activity of tyrosinase and the content of melanin were increased in a dose-dependent manner. After treated with ginsenoside Rb1 for 72 hours, the protein expression of tyrosinase was significantly increased. The activation of CREB induced by ginsenoside Rb1 was significantly inhibited by the pretreatment of H89, a protein kinase (PKA) inhibitor of .10 渭 M, which was activated by CREB. The expression of tyrosinase and MITF protein increased, which inhibited the increase of tyrosinase activity induced by ginsenoside Rb1 and the increase of melanin synthesis. Conclusion:. Ginsenoside Rb1 can promote melanin synthesis and tyrosinase activity in normal human melanocytes. PKA / CREB- MITF / tyrosinase signaling pathway is involved in the melanogenesis mechanism of ginsenoside Rb1. .
【學位授予單位】：大連醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R285.5;R758.5

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