發(fā)布時間：2018-01-02 13:20

  本文關(guān)鍵詞：真菌四重PCR體系的建立及其臨床應(yīng)用　出處：《中國皮膚性病學(xué)雜志》2015年05期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的建立多重PCR體系并探討其用于深部真菌感染診斷的可行性。方法用真菌通用引物內(nèi)轉(zhuǎn)錄間區(qū)(ITS)聯(lián)合曲霉屬、鐮刀菌屬、毛孢子菌屬、白念珠菌、新生隱球菌特異性引物建立多重PCR體系,用單重和四重PCR檢測模擬體液和30例可疑深部真菌感染患者臨床標(biāo)本中的真菌。結(jié)果ITS可與5對屬或種特異性引物任意組合(二重PCR),四重PCR組合為ITS+毛孢子菌屬+白念珠菌+新生隱球菌。30例臨床標(biāo)本中,真菌培養(yǎng)、PCR檢測的陽性率分別為26.67%和43.33%,兩種方法的檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論單重和四重PCR敏感性高、穩(wěn)定性好、操作簡單、耗時短,可為深部真菌感染的早期診斷提供病原學(xué)依據(jù)。
[Abstract]:Objective to establish a multiplex PCR system and discusses its feasibility for diagnosis of deep fungal infection. Methods using fungal universal primers internal transcribed spacer (ITS) combined with Aspergillus, Fusarium, Trichosporon, Candida, Cryptococcus neoformans specific primers to establish the multiplex PCR system, simulated body fluid and clinical specimens in patients with fungal 30 cases of suspected deep fungal infection with single and four PCR detection. Results ITS and 5 of genera or species specific primers combinations (double PCR), four PCR combination ITS+ + Trichosporon albicans and Cryptococcus neoformans.30 cases in clinical specimens, fungal culture positive rate of PCR detection were 26.67% and 43.33%, the two methods of detection rates were not statistically significant (P0.05). Conclusion the single and four PCR with high sensitivity, good stability, simple operation, short time, can provide the basis for early diagnosis of deep fungal infection of the pathogen.

【作者單位】： 廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院皮膚科;廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科;
【基金】：湛江市財政資金科技專項競爭性分配項目(湛科[2010]174號);湛江市財政資金科技專項競爭性分配項目(2012C0302-46)
【分類號】：R756
【正文快照】： 真菌培養(yǎng)和組織病理檢查是深部真菌感染診斷的金標(biāo)準(zhǔn),但存在耗時長、敏感性較低、取材困難等缺點(diǎn),不能滿足早期診斷的要求[1]。PCR法具有特異性和敏感性高、檢測快速的優(yōu)點(diǎn),已廣泛用于真菌鑒定、致病性、藥物作用機(jī)制、耐藥性等方面研究[2]。多重PCR利用多對特異性引物同時擴(kuò)

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 張志遠(yuǎn);徐美玲;張劍;;多重PCR診斷真菌性鼻-鼻竇炎的實驗研究[J];臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2011年08期

2 劉軍,劉維達(dá);聚合酶鏈反應(yīng)檢測深部致病真菌的實驗研究[J];中華皮膚科雜志;2005年08期

3 劉軍;沈永年;呂桂霞;陳偉;劉維達(dá);;PCR檢測深部致病真菌感染的研究[J];中華皮膚科雜志;2006年08期

4 劉春玉;王紅;;侵襲性真菌感染非培養(yǎng)診斷方法的研究進(jìn)展[J];中國真菌學(xué)雜志;2011年01期

5 王曉英,劉秀梅;串珠鐮刀菌分離菌株P(guān)CR篩選鑒定方法的研究[J];中國食品衛(wèi)生雜志;2005年02期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張洪彬;;PCR方法檢驗陰道念珠菌病的效果分析[J];當(dāng)代醫(yī)學(xué);2012年08期

2 吳偉懷;李銳;鄭服叢;;甘蔗梢腐病原菌的鑒定及其室內(nèi)毒力測定[J];甘蔗糖業(yè);2006年02期

3 何雪琴;劉興暉;李毅;袁鵬;邱紅;王琴;李國玲;胡曉梅;李蔭桂;;(1,3)-β-D葡聚糖檢測對深部真菌感染的診斷意義[J];公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué);2012年04期

4 孫康德;方敏;陳福祥;虞中敏;唐毅;樂旋;;血漿(1,3)-β-D葡聚糖檢測對侵襲性肺部真菌感染的臨床應(yīng)用價值[J];國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2012年17期

5 高飛;曹萍;吳穎;董躍蘭;霍克克;王亞倩;;30例復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌病患者致病菌株分析[J];重慶醫(yī)學(xué);2013年13期

6 孫偉;馬立艷;;侵襲性真菌的抗原標(biāo)志物檢測[J];國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2013年16期

7 劉文波;孫亮;萬三連;王慕瑾;張宇;鄔國良;繆衛(wèi)國;鄭服叢;;香蕉枯萎病菌遺傳多態(tài)性及其致病力分化[J];廣東農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年17期

8 賴源;朱純?nèi)A;劉娜;葉志純;李梨平;;侵襲性肺部真菌感染患兒(1,3)-β-D葡聚糖檢測的臨床價值[J];國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2014年01期

9 趙志祥;陳圓;陳綿才;符美英;王三勇;肖彤斌;;海南薯蕷莖腐病病原菌的鑒定[J];基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué);2013年06期

10 唐紅梅;周呂蒙;趙蘭蘭;李艷;羅俊;王婷婷;徐煜;蔡禮歡;鄭勇;;血漿(1,3)-β-D葡聚糖檢測對侵襲性真菌病的診斷意義[J];安徽醫(yī)藥;2015年05期

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1 吳偉懷;李銳;鄭服叢;;甘蔗梢腐病原菌的鑒定及其室內(nèi)毒力測定[A];中國熱帶作物學(xué)會2007年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2007年

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1 符美華;深部念珠菌病快速PCR檢測的標(biāo)準(zhǔn)化研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年

2 張曉利;病原性絲狀真菌快速診斷和鑒定的實驗研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

3 王淼淼;臨床常見致病念珠菌的快速鑒定和近平滑念珠菌形態(tài)轉(zhuǎn)換觀察[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

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1 朱磊;茄科尖孢鐮刀菌綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化及其定殖特性的研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2011年

2 白偉紅;慢性鼻—鼻竇炎細(xì)菌PCR檢測和傳統(tǒng)培養(yǎng)對比分析[D];青島大學(xué);2012年

3 許琰丹;浙江淡竹黑腐病病原菌的鑒定及其防治研究[D];浙江大學(xué);2008年

4 張海平;實時熒光PCR檢測臨床真菌方法的建立及其臨床應(yīng)用[D];蘇州大學(xué);2008年

5 武燕;外陰陰道念珠菌病患者陰道分離非白念珠菌的鑒定[D];蘭州大學(xué);2008年

6 黃躍才;幾種鐮刀菌的活性檢測研究[D];貴州大學(xué);2008年

7 李俊霞;四川玉米串珠鐮刀菌產(chǎn)毒素能力及產(chǎn)伏馬菌素基因的檢測[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

8 袁暉;腐爛蘋果中真菌分離鑒定和PCR快速檢測及條件優(yōu)化[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2009年

9 王丹;地霉菌的毛發(fā)穿孔試驗研究和掃描電鏡觀察[D];河北醫(yī)科大學(xué);2010年

10 謝寧;花椒干腐病、疫霉病病原生物學(xué)與DNA多樣性研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2012年

【二級參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張夢宇;鄭磊;溫淑娟;楊春莉;王前;;熒光定量PCR檢測侵襲性曲霉菌感染方法的建立[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2007年05期

2 高海燕;陶格陶呼;彭詩東;李玲香;;真菌特異性引物內(nèi)轉(zhuǎn)錄片段PCR檢測和培養(yǎng)的比較研究[J];臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2007年08期

3 黃曉軍;;重視侵襲性真菌感染的診治[J];中國實用內(nèi)科雜志;2006年01期

4 李秀芳;劉興s，

本文編號：1369401